ميزات الفحص الشامل لحديثي الولادة بحثًا عن التليف الكيسي. إجراء فحص حديثي الولادة لحديثي الولادة في مستشفى الولادة للأمراض الوراثية: فحص دم من الكعب

ما هو فحص حديثي الولادة وكيف ومتى يتم؟

يتم إجراء فحص حديثي الولادة أو "اختبار الكعب" على نطاق واسع في روسيا وأوروبا والولايات المتحدة الأمريكية. عادة ، يتم إجراء التحليل في مستشفى الولادة في اليوم الرابع أو الخامس من حياة الطفل. تأتي النتائج في المتوسط بعد ثلاثة أسابيع. في أغلب الأحيان ، أثناء هذا الفحص ، يتم تشخيص الأطفال بمرض يسمى التليف الكيسي.

يعد فحص الأطفال حديثي الولادة (من فحص اللغة الإنجليزية - الفرز) أحد أكثرها طرق فعالةالتشخيص أمراض وراثيةفترة حديثي الولادة. يتم إجراء البحوث الجينية بمبادرة من منظمة الصحة العالمية (WHO). في روسيا ، تم إدراج الفحص في قائمة تدابير التشخيص الإلزامية على مدار الخمسة عشر عامًا الماضية. من بين قائمة كبيرة من الأمراض الوراثية ، يوصى بتشخيص خمسة أمراض ، مع مراعاة عوامل مثل انتشار الأمراض ، وشدتها ، وكذلك القدرة على تلقيها. نتائج موثوقةالتحليلات والتطبيق علاج فعال.

شروط وأحكام الفحص

كيف يتم فحص حديثي الولادة؟

📍 في حالة الأطفال الناضجين ، يتم التحليل في اليوم الرابع في مستشفى الولادة.
يتم فحص الأطفال الخدج في اليوم السابع من العمر وما بعده. إذا كان الطفل قد خرج من المستشفى في وقت مبكر ، يتم تحليل الطفل في المنزل أو في العيادة في مكان الإقامة.
📍 يؤخذ الدم المحيطي (من الكعب) للفحص ، ومن هنا "فحص الكعب".
يتم تطبيق الدم على 5 أشكال منفصلة (دوائر) من الورق المصفى.
يتم التحليل على معدة فارغة ، فلا يمكنك إطعام الرضيع 3 ساعات قبل الفحص.

متى يتم الفحص؟ إذا أجريت التحليل في وقت سابق - في اليوم الثاني أو الثالث من العمر - فقد تكون النتائج إيجابية كاذبة وسلبية كاذبة. يُنصح بإجراء الاختبار في غضون الأيام العشرة الأولى من الحياة. تحديد اضطرابات التمثيل الغذائي الوراثي المراحل الأولىمهم للتشخيص الجيد.

تشخيص الأمراض على مستوى الجينات

اي نوع أمراض خلقيةتم تشخيصه بالفحص في روسيا؟ تتضمن القائمة تلك الأمراض التي يمكن علاجها أو تقليل شدتها بواسطتها المدى المبكركشف. هذه أمراض مرتبطة باضطرابات التمثيل الغذائي المختلفة. هذا ، على سبيل المثال ، لا يشمل تشخيص مرض الكروموسومات مثل متلازمة داون.

📍 قصور الغدة الدرقية. يرتبط هذا المرض بانتهاك إنتاج الهرمونات. الغدة الدرقية. عواقب هذا المرض وخيمة: تأخر عام في النمو البدني والعقلي. في المتوسط ، يتم تسجيل حالة واحدة من قصور الغدة الدرقية الوراثي لكل 5000 مولود جديد ، وتكون الفتيات في الغالب مريضات. إن فرص الشفاء التام من المرض المكتشف بعد نتائج الفحص الإيجابية عالية جدًا ، ويمكن التغلب على قصور الغدة الدرقية. يتطلب العلاج الهرموني. اقرأ المزيد عن قصور الغدة الدرقية ، حول معايير TSH عند الأطفال ، اقرأ في مقالتنا الأخرى.

التليف الكيسي. في هذا المرض ، يتم تعطيل إنتاج الإفرازات في الرئتين و السبيل الهضمي. يصبح السائل الذي تفرزه الخلايا سميكًا ، مما يؤدي إلى خلل خطير في وظائف الرئتين والكبد والبنكرياس. يعد التليف الكيسي أحد أكثرها أمراض متكررةالتي يتم الكشف عنها أثناء الفحص يتم تسجيل حالة واحدة لكل 2-3 آلاف مولود جديد. يكون التشخيص مواتياً إذا بدأ العلاج في الوقت المناسب.

📍 متلازمة أدرينوجينيتال. إنه نادر الحدوث ، حوالي واحد من كل 15000 مولود جديد. يتضمن ذلك مجموعة من الأمراض الوراثية التي يسببها انتهاك إنتاج الكورتيزول (في قشرة الغدة الكظرية). ما هي عواقب هذا المرض؟ يتأخر نمو الأعضاء التناسلية ، وتعاني الكلى والقلب والأوعية الدموية. يحتمل أن تكون قاتلة إذا لم يتم توفيرها رعاية صحية. يتكون العلاج من العلاج الهرموني مدى الحياة.

📍 الجالاكتوز في الدم. سبب هذا المرض هو نقص الإنزيم الذي يكسر الجالاكتاز. تدخل هذه المادة الجسم مع الجلوكوز ، وتوجد في اللاكتوز. تظهر أعراض الجالاكتوز في الدم تدريجياً ، ويبدو أن المولود هادئ طفل سليم. ولكن بعد بضعة أسابيع ، قد يظهر قيء ، فقدان الشهية ، انتفاخ ، بروتين في البول ، يرقان. يعتبر الجالاكتوز في الدم خطيرًا لعواقبه: اضطرابات خطيرة في وظائف الكبد ، وانخفاض حدة البصر ، وبطء النمو البدني والعقلي. هذا هو أندر مرض يتم تشخيصه أثناء الفحص ، ويحدث مرة واحدة من بين كل 30000 مولود جديد. علاج الجالاكتوز في الدم هو اتباع نظام غذائي صارم يستبعد منتجات الألبان.

📍 بيلة فينيل كيتون. مرض وراثي نادر يحدث مرة واحدة بين كل 15 ألف مولود جديد. تظهر بيلة الفينيل كيتون نتيجة لانتهاك إنتاج إنزيم يجب أن يدمر حمض فينيل ألانين. تؤثر نواتج اضمحلال فينيل ألانين سلبًا على الجسم بالكامل وتتراكم في الدم. بادئ ذي بدء ، المركزية الجهاز العصبي، الدماغ ، تظهر التشنجات. لتجنب مضاعفات المرض ، فمن الضروري نظام غذائي صارم، والذي يستبعد تناول الفينيل ألانين في الجسم.

في الطب ، هناك حوالي خمسمائة مرض مرتبط باضطرابات التمثيل الغذائي أو التمثيل الغذائي. على سبيل المثال ، في ألمانيا ، يتم تشخيص 14 مرضًا وراثيًا من خلال فحص حديثي الولادة ، في الولايات المتحدة الأمريكية - أكثر من 40 مرضًا. في روسيا ، يتم إجراء فحص حديثي الولادة لتشخيص أكثر خمسة أمراض خطيرةالتي تبدأ في التطور في عمر مبكر. بناءً على طلب الوالدين ، إذا كان الطفل معرضًا للخطر ، يمكن توسيع الفحص ليشمل 16 مرضًا.

هناك الكثير من الجدل حول موضوع فحص حديثي الولادة. لا يُنصح الآباء الذين عانوا من الإجهاد بعد نتيجة إيجابية خاطئة في الفتات بإجراء العملية. يشعر الآباء والأمهات الآخرون الذين أصيب أطفالهم بتشخيصات خطيرة بالامتنان لهذا التشخيص ، لأنهم تمكنوا من إنقاذ الطفل من العواقب الوخيمة أو وقف المرض أو علاجه.

5 أسئلة للآباء

يسبب الفحص القلق لكثير من الأمهات والآباء ، وفترة انتظار النتيجة مليئة بالقلق والخوف. قد تبدأ الأمهات القلقات بشكل خاص في مواجهة مشاكل الرضاعة. ربما هذا هو السبب في عدم إخطار الأمهات في بعض مستشفيات الولادة على الإطلاق بأي أغراض يتم إجراء التحليل.

📍 متى يمكنني الحصول على النتيجة؟ يتم إجراء التحليل في غضون ثلاثة أسابيع. إذا كانت النتائج سلبية (وتحدث في معظم الحالات) ، فلا أحد يبلغ عنها. لكن البيانات مسجلة في البطاقة الطبية للطفل. إذا كانت هناك نتيجة إيجابية ، فسيقومون بالتأكيد بمعاودة الاتصال من العيادة وطلب إجراء الاختبار مرة أخرى. الاختبارات الإيجابية الكاذبة الأكثر شيوعًا هي للتليف الكيسي.
إذا أكد الفحص الثاني التحليل السابق؟ الآباء مدعوون لإجراء محادثة مع عالم وراثة. يعطي توجيهات للأخصائيين الضيقين ، حيث يتم إجراء فحص إضافي: coprogram ، تشخيص الحمض النووي ، تحليل بقعة الدم الجافة ، إذا كان هناك اشتباه في التليف الكيسي ، اختبار العرق.
إذا تم تأكيد التشخيص بعد إجراء اختبارات إضافية ، يتم تحديد مسألة أساليب علاج الطفل.
هل يمكن إجراء فحص حديثي الولادة في المنزل؟ إذا لم يتم إجراء الفحص لسبب ما في مستشفى الولادة أو كان الخروج في اليوم الثالث ، يتم إجراء التحليل في العيادة في مكان الإقامة. بعض الأمهات ، يعلقن على الوضع ، يشاركن تجربتهن: شخص ما اتصل بالممرضة إلى المنزل ، وذهب شخص ما إلى العيادة ، وجاءت الممرضة إلى منزل شخص ما وأخذت عينة دم للفحص. إذا كانت هناك صعوبات ، وكان توقيت أخذ الدم للفحص ينفد ، يمكنك إجراء تحليل في مختبر مدفوع الأجر. يمكنك أيضًا الاتصال بالسلطات الصحية العليا التابعة لمستشفى الولادة في المنطقة والعيادة الشاملة ، واسأل عن كيفية التصرف في هذه الحالة.
📍 ما مدى موثوقية الفحص؟ إذا تم إجراء التحليل في الوقت المحدد ، وإذا لم يأكل الطفل قبل 3 ساعات من أخذ عينات الدم ، فإن موثوقية الاختبارات تكون عالية. لكن التشخيص لا يتم تحديده أبدًا بعد النتيجة الإيجابية الأولى. هناك حالات نادرة يظهر فيها الفحص بنتائج سلبية خاطئة. في هذه الحالة ، يتم اكتشاف المرض في وقت متأخر ، عندما تظهر الأعراض بالفعل.
هل يمكنني الانسحاب من الفحص؟ نعم تستطيع. يتحمل الآباء المسؤولية ويوقعون على وثيقة ترفض فحص المولود الجديد. هذه الورقة مُلصقة في بطاقة الطفل. ستتصل الممرضة أو الطبيب في عيادة المنطقة ، ويعود إلى المنزل ، ويترك ملاحظات تطلب الفحص حتى كتابة رفض الوالدين.

من المهم أن تعرف أن الاضطرابات الأيضية المرضية لا يمكن أن تكون أمراضًا وراثية فقط. يمكن للوالدين الأصحاء تمامًا أن يلدوا أطفالًا مصابين بالتليف الكيسي ، قصور الغدة الدرقية ، الجالاكتوز في الدم ، بيلة الفينيل كيتون ، متلازمة الأدرينوجين التناسلية. من المهم أيضًا معرفة أنه عند تأكيد التشخيص ، لا ينبغي للمرء أن يؤخر العلاج وإهمال النظام الغذائي الموصى به لبيلة الفينيل كيتون أو الجالاكتوز في الدم.

فحص حديثي الولادة في مستشفى الولادة سريع ومجاني وغير مؤلم للأطفال. يوصي العاملون في المجال الطبي بأن يتعامل الوالدان بوعي مع هذا التشخيص ، والذي يتم تنفيذه في إطار برنامج الدولة ومبادرة منظمة الصحة العالمية. لسوء الحظ ، فإن الكشف المتأخر عن أمراض التمثيل الغذائي الوراثي يؤدي إلى عواقب لا رجعة فيها ، والعجز والوفيات عند الأطفال.

تم إجراء فحص حديثي الولادة (NS) للكشف عن مرض التليف الكيسي الحاد (CF) بالفعل في أوروبا في أوائل السبعينيات ، ولكن هذه كانت المحاولات الأولى فقط. تضمنت هذه الدراسات تحليل العقي لمحتوى الألبومين فيه. في عام 1979 ، في بلازما دم الأطفال حديثي الولادة ، تعلموا تحديد مستوى التربسين المناعي (IRT) ، والذي يزيد مع التليف الكيسي. كان هذا الحدث نقطة البداية لمزيد من البحث في إجراء الفحص الشامل لحديثي الولادة لوجود التليف الكيسي.

عندما تم إجراء أول استنساخ للجين CFTR في عام 1989 ، توسعت إمكانيات HC بشكل كبير. أصبح من الممكن تضمين تحليل الحمض النووي في بروتوكولات فحص التليف الكيسي.

بيانات فحص حديثي الولادة في العالم

في أوروبا ، تم إجراء مسح على 1.6 مليون طفل حديث الولادة ، تم تحديد 400 طفل منهم أعراض التليف الكيسي.

في عام 2008 ، تضاعف عدد الأطفال الذين تم فحصهم تقريبًا. وتعزى هذه الزيادة إلى إدخال NS في المملكة المتحدة وروسيا. لقد برر هذا البرنامج نفسه تمامًا ليس فقط في المكون الطبي ، ولكن أيضًا في المكون الاقتصادي.

مع إمكانية الكشف المبكر عن المرض ، يمكن بدء العلاج في وقت مبكر ، مما يؤدي لاحقًا إلى تحسين نوعية حياة المرضى والتشخيص بالمرض. أدى إدخال HC والتنميط الجيني لجين CFTR إلى إمكانية تنظيم الأسرة في وقت مبكر ، مع الأخذ في الاعتبار مجموعة الجينات المثقلة بالعبء.

خيارات NS

في البلدان الأوروبية ، هناك حوالي 26 نوعًا مختلفًا من الجمعية الوطنية ، والتي تتكون من 2-4 مراحل. المرحلة الأولى في كل مكان هي قياس مستوى التربسين المناعي في الدم في الأسبوع الأول من حياة المولود الجديد. العلامة حساسة للغاية ، لكن خصوصيتها غير كافية ، لأن الزيادة في IRT تحدث أيضًا مع اليرقان المقترن ، إجهاد الفترة المحيطة بالولادة ، رتق الأمعاء ، فشل كلوي. علاوة على ذلك ، يتم زيادة مستويات IRT في أمريكا الشمالية والأمريكيين الأفارقة مقارنة بالأوروبيين.

المرحلة الثانية ضرورية لزيادة الخصوصية. ليس من الممكن في مجتمع يوجد فيه عدد كبير من الجنسيات معًا تحديد المرضى الذين يعانون من جينات متحولة عن طريق تحديد RTI / DNA.

آحرون طريقة بديلةالخطوة الثانية هي العثور على البروتين المرتبط بالتهاب البنكرياس (PAP) بمفرده أو بالاشتراك مع IRT. يمكن أن يساعد هذا النهج في تجنب المشكلات المرتبطة باكتشاف طفرات CFTR وتحليلها. حاليا ، هناك تطوير طريقة مجتمعة: مجموعة لتعريف وتقييم PAP + IRT.يجري التخطيط للبحث.

يجب دمج البرامج المذكورة أعلاه ويجب استخدامها في الأقارب الذين يعانون من أمراض خطيرة وفي السكان بشكل عام ، لأن الإخوة والأخوات مرضى التليف الكيسيقد تحتوي في نصف الحالات على جين متنحي ، أي أن يكون حاملاً.

الجوانب السلبية لمجلس الأمة

عند الحصول على نتيجة إيجابية لـ CF ، يجب إجراء العلاج الفوري. خلال الفترة الأولى من الوعي ، يمكن للوالدين القلق والشكوك الكبيرة حول وجود التليف الكيسي في أطفالهم. إذا كان هناك القليل من الوقت بين بيانات الفحص التي تم الحصول عليها والتأكيد التشخيصي النهائي ، فإن هذا الموقف له تأثير نفسي إيجابي على حالة والدي مريض صغير ، مما يساهم في البدء المبكر للعلاج المناسب وتطوير علاقة ثقة بينهم وبين الطبيب.

غالبًا ما يصعب إقامة هذه العلاقات وأحيانًا تكون مستحيلة. مع NS ، هناك احتمال للاختبارات الإيجابية الكاذبة. وبالتالي ، فإن مهمة العلماء هي تحديد أقل نسبة ممكنة من الاختبارات الإيجابية الكاذبة.

بروتوكول الجمعية الوطنية في روسيا

IRT 2 ؛
اختبار العرق
تشخيص الحمض النووي.

منذ عام 2007 ، تم إدخال NS على التليف الكيسي كإجراء إلزامي للكشف عن الأمراض الوراثية الشديدة ، والتي تشمل بيلة الفينيل كيتون ، قصور الغدة الدرقية ، الجالاكتوز في الدم ، ومتلازمة الأدرينوجينيل.

تكلفة التحليل في روسيا مرتفعة (حوالي 100 دولار) ، لذلك نادرًا ما يتم تنفيذ زمالة المدمنين المجهولين.

اختبار العرق

في الأساس ، في المراكز الطبية في أوروبا ، يتم إجراء اختبارات العرق لوجود الكلوريدات. في روسيا ، تم تسجيل نظامين لتحديد الكلوريدات في سائل العرق. هذه طريقة غير مباشرةتعاريف هذه المواد.

أنظمة جمع وتحليل العرق

تم استخدام نظام Macroduct مع محلل العرق Sweat-Chek أمريكي الصنع بنجاح في الأطفال في الأشهر الأولى من الحياة. يمكن إجراء التحليل بمساعدته خارج المختبر لمدة 30 دقيقة.

يتم استخدام جهاز Nanoduct أيضًا ، وهو مزود بنظام لتحفيز التعرق عن طريق الرحلان الكهربائي لمحلول بيلوكاربين 0.1٪ ومحلل توصيل العرق.

للتحليل ، هناك حاجة إلى 3 إلى 6 ميكرولتر من العرق. لذلك ، يتم استخدام هذا الجهاز على نطاق واسع كمعدات تقنية للفحص الشامل. تعتبر نتائج 80 مليمول / لتر إيجابية. مؤشرات الحدود - 60-80 مليمول / لتر.

بيانات المسح

على مدى ثلاث سنوات من البحث ، خضع أكثر من 4 ملايين مولود جديد لـ NS لـ التليف الكيسي عند الأطفال. من بين جميع الذين تم فحصهم ، تم تحديد 416 طفلاً ظهرت عليهم علامات التليف الكيسي. وبالتالي ، فإن معدل حدوثها في روسيا هو 1: 10000 مولود جديد.

لا يتم إجراء دراسات متكررة في كثير من الأحيان على الأطفال المصابين الاختبارات الإيجابية(مع زيادة المستوى IRT) ، لأن الآباء يرفضون إجراء المزيد من البحث.

الفحص السريري لحديثي الولادة

عندما يتم الكشف عن حالة مرضية ، يقوم الأطباء بمراقبة الأطفال كل أسبوعين لمدة 3 أشهر ، ثم كل شهر للأشهر الستة التالية ، وبعد ذلك كل شهرين حتى عام واحد ، ومن عام كل ربع سنة.

من المهم مراقبة المرضى دون أي مظاهر للمرض. يتم إجراء الفحص المكسور كل شهر حتى عام واحد ، ويتم تحديد إيلاستاز البنكرياس مرتين في السنة الأولى من العمر ، التحليل العامدم. مع تطور تفاقم عملية مرضيةيجب أن يكون الفحص أعمق وأكثر شمولاً.

علاج التليف الكيسي

تبدأ الإجراءات العلاجية من لحظة تشخيص المرض. كمية العلاج تعتمد على الاعراض المتلازمةواتساع تلف الأعضاء. في الغالبية العظمى من المرضى ، تحدث جميع الأعراض في السنة الأولى من العمر وفي الشهر الأول من العمر.

بالنسبة لحديثي الولادة ، يتم استخدام العلاج الحركي باستخدام التدليك والاهتزاز والتمسيد وتمارين الكرة. يجب أن تكون جميع الأنشطة ممتعة للطفل.

عند ربط انسداد الشعب الهوائية ، يشار إلى موسعات الشعب الهوائية ومزيلات المخاط.

إذا كانت هناك مظاهر لعسر الهضم ، توصف الإنزيمات كعلاج بديل والفيتامينات التي تذوب في الدهون.

استنتاج

قيمة السعر فحص حديثي الولادةلمرض التليف الكيسي في روسيا سيكون ممكنًا بعد بضع سنوات. في الوقت نفسه ، يجب على الدولة أن تفهم أهمية هذه الأحداث وأن تعمل بكل طريقة ممكنة على تحسين ظروف تنفيذها.

بيانات فحص حديثي الولادة في العالم

في أوروبا ، تم إجراء مسح على 1.6 مليون طفل حديث الولادة ، تم تحديد 400 طفل منهم أعراض التليف الكيسي.

خيارات NS

في البلدان الأوروبية ، هناك حوالي 26 نوعًا مختلفًا من الجمعية الوطنية ، والتي تتكون من 2-4 مراحل. المرحلة الأولى في كل مكان هي قياس مستوى التربسين المناعي في الدم في الأسبوع الأول من حياة المولود الجديد. العلامة حساسة للغاية ، لكن خصوصيتها غير كافية ، لأن الزيادة في IRT تحدث أيضًا مع اليرقان المقترن ، والإجهاد في الفترة المحيطة بالولادة ، ورتق الأمعاء ، والفشل الكلوي. علاوة على ذلك ، يتم زيادة مستويات IRT في أمريكا الشمالية والأمريكيين الأفارقة مقارنة بالأوروبيين.

طريقة أخرى بديلة للمرحلة الثانية هي العثور على البروتين المرتبط بالتهاب البنكرياس (PAP) في شكل واحد أو بالاشتراك مع RTI. يمكن أن يساعد هذا النهج في تجنب المشكلات المرتبطة باكتشاف طفرات CFTR وتحليلها. في الوقت الحالي ، هناك طريقة مشتركة مطورة: مجموعة لتحديد وتقييم PAP + IRT.يجري التخطيط للبحث.

الجوانب السلبية لمجلس الأمة

بروتوكول الجمعية الوطنية في روسيا

IRT 2 ؛
اختبار العرق
تشخيص الحمض النووي.

تكلفة التحليل في روسيا مرتفعة (حوالي 100 دولار) ، لذلك نادرًا ما يتم تنفيذ زمالة المدمنين المجهولين.

اختبار العرق

في الأساس ، في المراكز الطبية في أوروبا ، يتم إجراء اختبارات العرق لوجود الكلوريدات. في روسيا ، تم تسجيل نظامين لتحديد الكلوريدات في سائل العرق. هذه طريقة غير مباشرة لتحديد هذه المواد.

أنظمة جمع وتحليل العرق

بيانات المسح

غالبًا لا يتم إجراء الدراسات المتكررة للأطفال الذين لديهم اختبارات إيجابية (مع زيادة مستوى RTI) ، لأن الآباء يرفضون إجراء المزيد من الدراسات.

الفحص السريري لحديثي الولادة

من المهم مراقبة المرضى دون أي مظاهر للمرض. يتم إجراء فحص برازى كل شهر حتى عام واحد ، ويتم تحديد إيلاستاز البنكرياس مرتين في السنة الأولى من العمر ، وهو تعداد الدم الكامل. مع تطور تفاقم العملية المرضية ، من الضروري إجراء فحص أعمق وأكثر شمولاً.

علاج التليف الكيسي

تبدأ الإجراءات العلاجية من لحظة تشخيص المرض. يعتمد مقدار العلاج على المظاهر السريرية واتساع تلف الأعضاء. في الغالبية العظمى من المرضى ، تحدث جميع الأعراض في السنة الأولى من العمر وفي الشهر الأول من العمر.

عند ربط انسداد الشعب الهوائية ، يشار إلى موسعات الشعب الهوائية ومزيلات المخاط.

إذا كانت هناك مظاهر لعسر الهضم ، توصف الإنزيمات كعلاج بديل والفيتامينات التي تذوب في الدهون.

استنتاج

سيكون من الممكن تقييم قيمة فحص حديثي الولادة للكشف عن التليف الكيسي في روسيا في غضون سنوات قليلة. في الوقت نفسه ، يجب على الدولة أن تفهم أهمية هذه الأحداث وأن تعمل بكل طريقة ممكنة على تحسين ظروف تنفيذها.

الهدف الرئيسي من الفحص الجيني هو التعرف على مجموعة من الأشخاص الذين لديهم نمط وراثي معين يسبب إما مرضًا ، أو يهيئ لحدوثه ، أو يمكن أن يسبب مرضًا في النسل. تم تطوير المبادئ الأساسية للفحص الجيني في الستينيات. من القرن الماضي ، عندما بدأ استخدامه للكشف عن بيلة الفينيل كيتون بين الأطفال حديثي الولادة. في عام 1968 ، قامت مجموعة من خبراء منظمة الصحة العالمية ، بعد نتائج فحص بيلة الفينيل كيتون التي أجريت في العديد من دول العالم ، بنشر المتطلبات العامة لبرامج فحص الأطفال حديثي الولادة من أجل الأمراض الوراثيةالتمثيل الغذائي. هذه المتطلبات لا تزال سارية المفعول اليوم.

المبادئ الأساسية للفحص الجيني
المتطلبات العامة لتنفيذ برامج فحص حديثي الولادة لأمراض التمثيل الغذائي الوراثي تشمل المعايير التالية:
يجب أن يكون تواتر المرض بين السكان مرتفعًا بدرجة كافية (هذا المطلب ليس صارمًا للغاية ، لأنه يتعلق فقط بفعالية تكلفة البرنامج) ؛
يجب دراسة المرض بشكل جيد سريريًا ومختبرًا ؛
يجب أن يكون المرض شديدًا أو حتى قاتلًا بحيث تفوق فائدة برنامج الفحص تكلفة تشغيله ؛
يجب ألا تعطي الاختبارات المعملية نتائج سلبية خاطئة حتى لا يفوتك مريض واحد ؛ يجب ألا يكون معدل الإيجابيات الكاذبة مرتفعًا أيضًا ، حتى لا يقلل من فعالية تكلفة البرنامج ؛
يجب أن تكون الاختبارات المعملية بسيطة وآمنة ومقبولة أخلاقياً ؛
يجب تطوير علاج فعال للأمراض التي تم فحصها ؛
يجب تحديد الفترة الزمنية منذ الولادة عندما يعطي العلاج نتيجة إيجابية بدقة ؛
يجب أن تكون عملية الفرز فعالة من حيث التكلفة.

بناءً على هذه المتطلبات ، يعد فحص حديثي الولادة نظامًا من التدابير ، وأهمها تحديد الأطفال حديثي الولادة المصابين بأمراض معينة في المرحلة قبل السريرية ؛ العلاج المبكر الممرض ، مما يجعل من الممكن إعطاء المجتمع أفرادًا كاملين ؛ الاستشارة الطبية الوراثية للأسرة بهدف منع ولادة طفل مريض ثان.

يندرج فحص الأمراض الوراثية الأكثر شيوعًا وخطورة ضمن فئة الأولوية العالية من بين المشاكل الصحية الأخرى ، حيث إنه يؤثر على دافع السكان ، ويقلل نسبة كبيرة من الإعاقة ويوفر وفورات في الموارد. فحص حديثي الولادة هو نهج جديد في الأساس للوقاية ، يقترحه علم الوراثة الطبية للصحة العامة العملية.

يتم تلبية المتطلبات المذكورة أعلاه من خلال عدد من الأمراض الأيضية الوراثية. في روسيا ، يُجرى فحص حديثي الولادة للكشف عن بيلة الفينيل كيتون منذ عام 1985 ، للكشف عن قصور الغدة الدرقية الخلقي - منذ عام 1993 ؛ منذ عام 2006 ، وكجزء من مشروع National Health of the Nation ، تم استكمال الفحص بثلاثة أمراض أخرى - الجالاكتوز في الدم ومتلازمة الأدرينوجين التناسلية والتليف الكيسي.

Phenylketonuria هو مرض وراثي مع نوع وراثي جسمي متنحي من الوراثة (يتراكم المرضى في الأسرة في جيل واحد).

متوسط تواتر بيلة الفينيل كيتون في الدول الأوروبية هو 1: 10000 مولود جديد ، في الجزء الأوروبي من روسيا - 1: 6500-1: 7000. المعيار التشخيصي الرئيسي لجميع أشكال بيلة الفينيل كيتون هو زيادة تركيز الفينيل ألانين في الدم. تشتمل المجموعة غير المتجانسة من فرط فينيل ألانين الدم على عدد من الاضطرابات الوراثية في التمثيل الغذائي للحمض الأميني فينيل ألانين ، مما يؤدي إلى تراكم هذا الحمض الأميني ومشتقاته في السوائل البيولوجية. الاضطراب الأكثر شيوعًا هو الشكل الكلاسيكي لبيلة الفينيل كيتون ، الناجم عن طفرات في جين هيدروكسيلاز فينيل ألانين على الكروموسوم 12 (12q22-q24.2). حتى الآن ، تم تحديد مئات الطفرات في جين هيدروكسيلاز الفينيل ألانين ، 8 منها هي الأكثر شيوعًا. الطفرة الرئيسية التي تحدث عند تردد 45٪ هي R408Q. نتيجة لطفرة في الجين ، يكون الإنزيم معيبًا ، ولا يمكن تحويل فينيل ألانين إلى تيروزين ويتراكم في الدم.

تحدث كتلة التمثيل الغذائي ، ونتيجة لذلك ينمو مستوى فينيل ألانين باستمرار ويصل إلى هذه التركيزات التي يصبح عندها سامًا ، بشكل أساسي لدماغ الطفل النامي. بدون علاج ، 95 ٪ من الأطفال المصابين بيلة الفينيل كيتون يصابون بشكل حاد التأخر العقلي، وتأخر النمو الحركي ، والتشنجات ، والأكزيما على الجلد ، والاضطرابات السلوكية الجسيمة في سن أكبر.

إذا بدأ العلاج مبكرًا وتم تنفيذه بعناية ، فلن تظهر على الطفل أعراض إكلينيكية لمرض بيلة الفينيل كيتون وسوف يكبر بصحة جيدة ، ولا يختلف عمليًا عن أقرانه. معنى العلاج هو تقليل محتوى الفينيل ألانين في الطعام الذي يتلقاه الطفل. يتم تحقيق ذلك عادة من خلال الخلطات والأنظمة الغذائية الخاصة. تتم مراقبة محتوى فينيل ألانين في الدم باستمرار لدى الطفل ، واعتمادًا على معايير المختبر ، يتم تعديل تكوين تلك المنتجات التي لن تزيد من مستوى الفينيل ألانين ، ولكنها ستضمن النمو والتطور الطبيعي للطفل. يجب أن تتلقى الأسرة التي يوجد فيها مريض بيلة الفينيل كيتون استشارة طبية وراثية ، ويمكن إجراء تشخيص الحمض النووي قبل الولادة في حالات الحمل اللاحقة.

يتجلى قصور الغدة الدرقية الخلقي في انتهاكات خطيرة لنمو وتطور الطفل منذ الولادة وينتج عن خلل كامل أو جزئي في الغدة الدرقية التي تنتج هرمونات تحتوي على اليود. في معظم الحالات ، يحدث قصور الغدة الدرقية الخلقي بسبب عدم وجود الغدة الدرقية ، أو تخلفها ، أو وضعها غير الصحيح. إذا تُرك قصور الغدة الدرقية الخلقي دون علاج ، فإن نمو الطفل يتباطأ بشكل كبير ، ويتطور تخلف عقلي شديد لا رجعة فيه ، ويتطور الآخرون. علامات طبيهالأمراض. يتطور المرض طوال الوقت ويمكن أن يؤدي إلى إعاقة مدى الحياة. ومع ذلك ، إذا بدأ العلاج في غضون الشهر الأول بعد ذلك
الولادة ، في الغالبية العظمى من الحالات ، يتطور الطفل بشكل طبيعي. ما يقرب من 80-85 ٪ من حالات قصور الغدة الدرقية الخلقي غير وراثية ، وتحدث بالصدفة ، وعادة ما تكون ناجمة عن اضطراب الغدة الدرقية الذي لا يعرف سببه. في التسبب في تطور الاضطرابات العابرة لوظائف نظام الغدة النخامية - الغدة الدرقية ، كلاهما زيادة في نشاط الغدة النخامية مع زيادة تخليق الهرمون المنبه للغدة الدرقية ، وتثبيط إنتاج هرمونات الغدة الدرقية يمكن أن تكون ذات أهمية قصوى.

تشمل مجموعة المخاطر لحدوث تغيرات عابرة ، مصحوبة بانخفاض في تركيز هرمونات الغدة الدرقية ، ما يلي:
حديثي الولادة من أمهات مصابات بحمل معقد ، خاصة مع قصور الجنين ؛
حديثي الولادة من أمهات يعانين من أمراض الغدد الصماء ، وخاصة مع أمراض الغدة الدرقية ؛
حديثي الولادة مع عدم النضج الوظيفي بسبب الخداج أو سوء التغذية داخل الرحم.

في 15-20٪ من الحالات ، يُورث قصور الغدة الدرقية الخلقي ، عادةً بطريقة وراثية متنحية. من المعروف أن ما لا يقل عن 7 جينات تتحور لتسبب قصور الغدة الدرقية. هذا هو السبب في أن التحليل الجيني الجزيئي في قصور الغدة الدرقية الخلقي معقد وغير فعال دائمًا. ومع ذلك ، نظرًا لأن قصور الغدة الدرقية الخلقي ، الوراثي وغير الوراثي ، يتم علاجه جيدًا عند اكتشافه مبكرًا ، فليس هناك حاجة كبيرة لمثل هذا التحليل الجيني.

يحدث قصور الغدة الدرقية الخلقي في جميع أنحاء العالم بنفس التردد تقريبًا - 1: 3000-1: 4000 حديثي الولادة. نفس تواتر قصور الغدة الدرقية الخلقي في روسيا. في الفتيات ، لأسباب غير معروفة ، يوجد مرتين أكثر من الأولاد. يستخدم برنامج الفحص هرمون الغدة الدرقية كاختبار أولي في عينات بقع الدم المجففة. في الحالات التي يزيد فيها محتوى هرمون الغدة الدرقية في عينات الدم ، يتم إجراء إعادة الاختبار ، وفقًا لنتائج تحديد الأطفال المرضى. يحيل اختصاصي الوراثة المريض إلى اختصاصي الغدد الصماء ، الذي يصف العلاج ويراقب الطفل في المستقبل.

الجالاكتوز في الدم هو أحد الاضطرابات الوراثية لعملية التمثيل الغذائي للكربوهيدرات. يعتمد التسبب في المرض على خلل في أحد إنزيمات التمثيل الغذائي - الجالاكتوز ، والذي يتكون في الأمعاء أثناء التحلل المائي لثنائي سكاريد اللاكتوز. الخطوة الأولى في تحول الجالاكتوز في خلايا الجسم هي الفسفرة ، والتي تتم بمساعدة إنزيم غالاكتوكيناز. يتم استقلاب ناتج هذا التفاعل ، جالاكتوز -1 فوسفات ، بواسطة الجالاكتوز -1 فوسفات يوريديل ترانسفيراز إلى يوريدي فوسفوجالاكتوز. يحدث مزيد من التحول في الأخير بمساعدة uridyldiphosphogalactose-4-epimerase. نتيجة عدم كفاية أي من الإنزيمات الثلاثة - غالاكتوكيناز ، فوسفات يوريديل ترانسفيراز أو يوريدي فوسفوجالاكتوز - 4 - إبيميراز - زيادة في تركيز الجلاكتوز في الدم - الجالاكتوز في الدم. كقاعدة عامة ، الجالاكتوز في الدم يعني وجود عيوب في فوسفات يوريديل ترانسفيراز ، وأخطرها هو الشكل الكلاسيكي للجالاكتوز في الدم. معدل تكرار الشكل الكلاسيكي ، وفقًا للأدبيات ، هو 1: 50000-1: 60.000 مولود جديد.

هناك نوعان من الجالاكتوز في الدم. يُورث الجالاكتوز في الدم الكلاسيكي بسبب نقص الجالاكتوكيناز بطريقة وراثية متنحية. يتم ترجمة الجين في موضع 9p13. بداية المرض حادة ؛ في فترة الوليد ، يظهر القيء والإسهال واليرقان وتضخم الكبد وإعتام عدسة العين وسوء التغذية والتخلف الحركي النفسي والخلل الأنبوبي الكلوي.

الجالاكتوز في الدم بسبب النقص الجهازي في uridyldiphosphogalactose-4-epimerase موروث أيضًا بطريقة وراثية متنحية. يتم ترجمة الجين في موضع 1p36-p35. بداية المرض في فترة حديثي الولادة. أعراض المرض متشابهة ، باستثناء إعتام عدسة العين (غائب) ، لكن يوجد صمم عصبي حسي. بالنسبة لهذين الشكلين ، يتم وصف متغير حميد غير مصحوب بأعراض من الجالاكتوز في الدم (متغير دوارتي) ، حيث يكون تواتر السكان أعلى من تكرار الشكل الكلاسيكي.

إذا بدأ العلاج مبكرًا ، فلن تظهر على الطفل أعراض سريرية للجالاكتوز في الدم وسينمو بصحة جيدة. الهدف من العلاج هو القضاء منتجات الطعامتحتوي على الجالاكتوز ، على وجه الخصوص حليب الثديومخاليط الحليب الأخرى. يمكن استبدالها بخلائط خاصة محضرة على أساس فول الصويا. يسمح لك التعيين المبكر للعلاج ، على النحو الأمثل - قبل اليوم العاشر من العمر ، بتجنب الأزمات الشديدة التي تؤدي غالبًا إلى الوفاة. يمكن إجراء تشخيص الحمض النووي قبل الولادة في حالات الحمل اللاحقة من خلال الاستشارة الوراثية الطبية.

يعد التليف الكيسي أحد أكثر الأمراض الوراثية شيوعًا ، وعادةً ما يكون مصحوبًا بمسار شديد وتوقعات سيئة للحياة. يختلف تواتر التليف الكيسي بين ممثلي العرق الأوروبي من 1: 600 إلى 1: 12000 مولود جديد. يتم تعيين جين التليف الكيسي CFTR على الذراع الطويلة للكروموسوم 7. يتجاوز عدد الطفرات التي تم تحديدها حاليًا في هذا الجين 2000 ، منها delF508 هي الأكثر شيوعًا ، وتوجد في 54٪ من مرضى التليف الكيسي في روسيا.

الجين مسؤول عن تخليق البروتين الذي يعمل كقناة لأيونات الكلوريد في الخلايا. بسبب الخلل الوظيفي لهذه القناة ، يصبح المخاط والأسرار الأخرى في الرئتين والبنكرياس والأعضاء الأخرى سميكًا ولزجًا جدًا. هذا يؤدي إلى التنمية عدوى مزمنة، تلف أنسجة الرئة ، ضعف هضم الطعام ، لأن إنزيمات البنكرياس لا تستطيع دخول الأمعاء. يبدأ المرض عادة في سن مبكرة. هناك ثلاثة أشكال رئيسية من التليف الكيسي: الرئوية والمعوية والمختلطة. الأكثر شيوعًا هو الشكل المختلط. يحدث في حوالي 80٪ من مرضى التليف الكيسي. يتجلى الشكل الرئوي في الانسداد المزمن عملية القصبات الرئوية. مزمن العملية الالتهابيةمما يؤدي إلى تدمير أنسجة الرئة. يعاني المريض من ضعف في تشبع الدم بالأكسجين ، مما يتسبب في معاناة القلب والكبد والأعضاء الأخرى ، ويتخلف الأطفال عن أقرانهم في الطول ووزن الجسم. يتطلب علاج مرضى التليف الكيسي الرئوي استخدام مضادات حيوية قوية بجرعات عالية. في الشكل المعوي من التليف الكيسي ، تتعطل عملية هضم الطعام ، لأن إنزيمات البنكرياس التي تكسر البروتينات والدهون لا تدخل الأمعاء بسبب انسداد قنوات الغدة. العلاج الرئيسي للشكل المعوي هو تناول إنزيمات البنكرياس. في الشكل المختلط من التليف الكيسي ، تؤدي المظاهر المعوية إلى تفاقم تلف الرئة. علاج الشكل المختلط هو الأصعب. المرضى الذين يعانون من التليف الكيسي الذين لا يتلقون العلاج اللازم لديهم متوسط العمر المتوقع قصير. إذا تم اكتشاف التليف الكيسي عند حديثي الولادة وتم علاجه بالفعل من الشهر الثاني من العمر ، فإن المظاهر السريرية للمرض تكون أسهل بكثير وينمو الطفل بشكل طبيعي جسديًا وعقليًا. يزيد من متوسط العمر المتوقع ، والذي يبلغ في الوقت الحاضر ، بفضل العلاج المناسب ، أكثر من 35 عامًا في البلدان المتقدمة.

يستخدم برنامج الفحص كاختبار أولي لتحديد محتوى التربسين المناعي في عينات من بقع الدم الجافة. إذا كانت الاختبارات المعملية الأولى والثانية إيجابية ، فعندئذ ، على عكس الأمراض الوراثية الأخرى التي تم فحصها ، فإن هذا لا يعني أن الطفل مصاب بالتليف الكيسي ، على الرغم من أن احتمالية مثل هذا التشخيص عالية. لتأكيد التشخيص ، يخضع الطفل الرضيع الذي يتراوح عمره بين 3 و 4 أسابيع إلى اختبار كبير - لقياس تركيز الكلور في سائل العرق. إذا كانت نتيجة اختبار الدفعة سلبية ، يعتبر الطفل بصحة جيدة ، على الرغم من أنه سيظل مراقبًا لبعض الوقت. إذا كان اختبار الدفعة إيجابيًا ، فسيتم اعتبار تشخيص التليف الكيسي ثابتًا حتى قبل ظهور أي مظاهر سريرية للمرض.

المتلازمة الأدرينوجينية هي مجموعة من الأمراض التي تعتمد على خلل في أحد الإنزيمات أو بروتينات النقل المشاركة في التخليق الحيوي لهرمونات الستيرويد في الغدد الكظرية. ترتبط معظم حالات المرض (حوالي 90-95٪) بنقص 21 هيدروكسيلاز ، 5-10٪ - مع نقص 11-p-hydroxylase.

يتم تعيين جين 21 هيدروكسيلاز (CYP21B) في موضع 6p21.3 مع الجين الزائف CYP21A. يمكن أن تؤدي درجة عالية من التنادد والترتيب الترادفي لجينين إلى إعادة تكوينهما وتعطيل وظائف الجين النشط. تم تحديد العشرات من الطفرات التي تؤدي إلى نقص 21 هيدروكسيلاز. تشكل الطفرات النقطية حوالي 80٪ ، وتمثل عمليات الحذف حوالي 20٪ من التغييرات. الطفرات النقطية الأكثر شيوعًا هي 12 شريحة ، ثم I172N ، إلخ. وتيرة نقص 21 هيدروكسيلاز عالية جدًا وتصل إلى 1: 8000-1: 15000 مولود جديد. التشخيص المتأخر ، في وقت متأخر و معاملة خاطئةيمكن أن يؤدي إلى عواقب وخيمة: وفاة طفل من أزمات فقدان الملح ، وأخطاء في اختيار الجنس مع استفزاز شديد للأعضاء التناسلية الخارجية عند الفتيات ، واضطرابات النمو ، والبلوغ ، والعقم. يتيح إدخال فحص حديثي الولادة اكتشاف المرض في الوقت المناسب وتجنب الأخطاء التشخيصية.

هناك ثلاثة أنماط ظاهرية سريرية متلازمة أدرينوجينيتال:
شكل خاسر من الملح - منذ الولادة الأعضاء التناسلية "المشكوك فيها" ؛ في فترة حديثي الولادة - فقدان الملح الشديد ، يتجلى في شكل أزمات الغدة الكظرية (القيء والجفاف والتشنجات والسكتة القلبية) ؛
شكل رجولي بسيط - من الولادة الأعضاء التناسلية "المشكوك فيها" عند الفتيات ، طبيعية عند الأولاد ، بعد الولادة في كلا الجنسين ، ظهور سابق لأوانه للخصائص الجنسية الثانوية ، قصر القامة ؛
الشكل المخفف (غير الكلاسيكي) - يبدأ في سن البلوغ وعند الفتيات فقط (ضعف نمو الغدد الثديية ونمو الشعر على طول نوع الذكور، انقطاع الطمث).

تمثل هذه الأشكال الثلاثة ما يقرب من 90٪ من جميع حالات تضخم الغدة الكظرية الخلقي ، والتي يمثل شكل فقدان الملح منها 60-65٪. نتيجة لنقص 21 هيدروكسيلاز ، يضعف تحويل الكوليسترول إلى الكورتيزول والألدوستيرون ، الذي يتحكم فيه هذا الإنزيم. في الوقت نفسه ، هناك تراكم لسلائف الكورتيزول والألدوستيرون ، والتي تتحول عادة إلى هرمونات الذكورة الجنسية - الأندروجينات. نظرًا لأن الكثير من سلائف الكورتيزول والألدوستيرون تتراكم في متلازمة الأدرينوجين التناسلية ، يتم تكوين أكثر بكثير من الأندروجين الطبيعي ، وهو السبب الرئيسي للتطور الصورة السريريةمتلازمة أدرينوجينيتال. المرض موروث بطريقة وراثية متنحية. يستخدم برنامج الفحص تركيزات 17 هيدروكسي بروجستيرون في عينات بقع الدم المجففة كاختبار أولي. في الحالات التي تحتوي على نسبة عالية من المحتوى ، يتم إجراء إعادة الاختبار ، وبالتالي يتم تحديد الأطفال المرضى. يجب وصف العلاج في أسرع وقت ممكن ، ثم لن تظهر الأعراض السريرية لمتلازمة الأدرينوجين التناسلية لدى الطفل وسوف يكبر بصحة جيدة ، لا يختلف عن أقرانه. في الاستشارات الوراثية الطبية ، يمكن إجراء تشخيص الحمض النووي قبل الولادة في حالات الحمل اللاحقة.

المراحل الرئيسية لفحص حديثي الولادة
تقليديا ، يمكن التمييز بين 5 مراحل لفحص الأطفال حديثي الولادة بحثًا عن أمراض وراثية.
المرحلة 1 - سحب الدم من الأطفال حديثي الولادة من الكعب في مؤسسات التوليد في اليوم الرابع إلى الخامس من العمر. يجب تطوير ونشر المعايير لجميع طرق جمع عينات الدم على ورق الترشيح. من الناحية المثالية ، ينبغي تزويد المؤسسات بمواد الفيديو. بالإضافة إلى ذلك ، يجب أن يكون نظام نقل عينات الدم المجففة بسيطًا ويمكن الوصول إليه ، مما سيسمح بالتحليل والعلاج في وقت قصير ، على سبيل المثال ، في الجالاكتوز في الدم ومتلازمة الأدرينوجين التناسلية في غضون 10 أيام من الولادة ، قبل بداية الأزمات.
المرحلة الثانية - الفحص الأولي السريع لتحديد معايير المختبر ذات الصلة. يتم إجراء هذا التحليل في المختبرات بالمعدات المناسبة.
المرحلة الثالثة - التشخيص التأكيدي في حالة نتائج إيجابية، يجب إجراؤها في نفس المختبرات بأسرع ما يمكن. يتم إجراء تشخيص الحمض النووي ومراقبة جودة التحليلات المعملية في المرحلتين الثانية والثالثة في المراكز المرجعية الفيدرالية.
المرحلة 4 - علاج المرضى الذين تم تحديدهم ، والتي يجب أن يقوم بها علماء الوراثة وأطباء حديثي الولادة وأطباء الأطفال وأخصائيي الغدد الصماء. يجب أن يوصف العلاج خلال الشهر الأول من العمر. تتم مراقبة فعالية العلاج باستخدام البيانات السريرية والمخبرية.
المرحلة 5 - الاستشارة الطبية الوراثية وتشخيص الحمض النووي قبل الولادة في العائلات التي ظهر فيها طفل مريض. يتم إجراؤها في الاستشارات الطبية الوراثية.

يجب أن تكون جميع المراحل معدة بشكل كامل ، ثم يمكنك بدء البرنامج. لتطويرها بنجاح ، يجب تحديد العديد من المشاكل وحلها في مرحلة تخطيط البرنامج. بادئ ذي بدء ، يعد الدعم الحكومي والموارد المالية مهمين ، لأنه في بلدنا ، كما هو الحال في معظم دول العالم ، يعد فحص الأطفال حديثي الولادة برنامجًا حكوميًا.

تتعلق مباشرة بتنفيذ البرنامج:
تدريب العاملين في مستشفيات الولادة (جمع عينات الدم) ؛
قدرة المختبرات (المعدات) وتدريب الموظفين ؛
التوفر القيم العاديةالمؤشرات قيد الدراسة لفحص السكان حديثي الولادة ؛
مخطط لنقل عينات الدم.
تنسيق عمل المختبرات.
تهيئة الظروف لجمع البيانات وتنبيه الأطباء ؛
إنشاء نظام محوسب لتخزين المعلومات حول عينات الدم والاستنتاجات والتنبيهات للآباء والمرضى الذين تم تحديدهم والعلاج ونتائجها ؛
برنامج مراقبة جودة المختبر ؛
توافر الرعاية الطبية.

يعد الإعداد طريقة فعالة للحفاظ على جودة جميع أقسام البرنامج نصيحة عمليةمع وصف تفصيلي للإجراءات الخاصة بكل مرحلة من مراحل البرنامج. بالإضافة إلى ذلك ، من الضروري إعداد دليل عام (دليل) يلخص الخبرة العملية في حل المشكلات الناشئة. أحد الشروط المهمة للتنفيذ الناجح لبرنامج فحص الأطفال حديثي الولادة هو إعداد السكان ، ما يسمى بالكتلة التعليمية للبرنامج. يحتاج الناس إلى معرفة ما هو فحص حديثي الولادة ، وكيف يتم ، وكيف يفيد كل فرد من السكان.

تشارك ثلاث مؤسسات في فحص الأطفال حديثي الولادة ، على الأقل في بلدنا: مستشفيات الولادة (أخذ عينات دم من الأطفال حديثي الولادة) ، والاستشارات الطبية الوراثية (إجراء المرحلتين الثانية والثالثة ، وعلاج بعض الأمراض والرقابة المخبرية على علاج جميع الأمراض التي تم فحصها ، والمستشفيات الطبية استشارة وراثية للأسرة) ، مراكز مرجعية (مراقبة جودة المختبر ، تشخيص الحمض النووي). توجد شبكة دولية لبرامج الفحص.

البحوث المخبرية
مبادئ عامة
المادة البيولوجية المستخدمة في فحص حديثي الولادة هي الدم المجفف على ورق الترشيح.

الحصول على المواد البيولوجية
يتم إجراء أخذ عينات الدم من كل مولود جديد بشكل صارم في اليوم الرابع إلى الخامس من العمر (ليس قبل 72 ساعة بعد الولادة) في المؤسسة الطبية حيث يوجد الطفل في تلك اللحظة. بحلول موعد أخذ عينات الدم ، يجب أن يتلقى الطفل تغذية جيدة لمدة يوم على الأقل. في الأطفال الخدج ، يؤخذ الدم في اليوم السابع والرابع عشر من العمر. في الأطفال الذين خضعوا لنقل الدم أو غسيل الكلى ، يتم أخذ عينات الدم مرة أخرى بعد شهر واحد من الإجراء الأخير.

يتم أخذ عينات الدم فقط على أشكال خاصة من ورق الترشيح ، حاليًا - Whatman 903. يتم توفير النماذج لجميع المؤسسات الطبية بواسطة المختبر الوراثي الطبي في المنطقة. استخدام أي ورقة أو نماذج أخرى لهذا الغرض غير مقبول ، حيث يتم إجراء القياسات المختبرية وتقييمها وتفسيرها باستخدام عينات المعايرة ومواد التحكم المصنوعة من نفس النوع من الورق. قبل أخذ عينة الدم ، يجب غسل كعب المولود ، ومسح بقطعة قماش معقمة ومبللة بمحلول إيثانول 70٪ ، وتنشيفه بقطعة قماش جافة معقمة. يعد استخدام محاليل مطهرة أخرى بدلاً من الإيثانول أمرًا غير مرغوب فيه ، حيث قد يؤثر بعضها على نتيجة القياس. يتم أخذ الدم باستخدام مخدش يمكن التخلص منه. تتم إزالة القطرة الأولى بعد الثقب باستخدام قطعة قطن جافة ومعقمة لتجنب انحلال الدم. يتم نقع كل دائرة من الدوائر المشار إليها في النموذج بقطرة واحدة كبيرة من الدم ، دون لمس كعب الطفل بالشكل. يجب أن تكون بقع الدم بالحجم الموضح في النموذج على الأقل ، ويكون مظهر البقع هو نفسه على جانبي الشكل. هذه الكمية من الدم كافية لدراسات الفحص. في حالة عدم اكتمال ملء الدوائر بالدم ، من الضروري تكرار الثقب. يتم تجفيف النماذج التي تحتوي على الدم لمدة 2-3 ساعات في درجة حرارة الغرفة ، مع تجنب أشعة الشمس المباشرة. في الأطفال الأكبر سنًا ، يجب أخذ الدم بالطريقة المعتادة - من الإصبع.

المعلومات التالية مكتوبة بشكل واضح ومقروء على الاستمارة بالدم: اللقب ، والاسم ، واسم الأب ، إذا تم أخذ الدم في مؤسسة للولادة ، أو من الطفل ، إذا تم أخذ الدم في مؤسسة طبية أخرى ؛ تاريخ ميلاد الطفل ، وتاريخ أخذ عينة الدم ، وعنوان التسجيل المفصل وتاريخ مغادرة الطفل ، ورقم الهاتف ، ورمز المؤسسة الطبية واسم الشخص الذي أخذ الدم. علاوة على ذلك ، يتم تسجيل المعلومات المصاحبة: وزن جسم الطفل ، وعمر الحمل ، والخداج ، ونقل دم الطفل ، وغسيل الدم ، وتناول الأم و / أو الطفل الأدوية، على وجه الخصوص ديكساميثازون ، فرط بيليروبين الدم أكثر من 30 مجم / ديسيلتر ، إلخ.

النموذج عبارة عن مستند يملأ ويكون مسؤولاً عن صحة أخذ عينات الدم ودقة المعلومات الموضحة في النموذج. تجفف النماذج التي تحتوي على الدم في درجة حرارة الغرفة وتعبأ في مظروف ورقي نظيف وتسلم إلى المختبر الوراثي الطبي الإقليمي مرة واحدة على الأقل كل 3 أيام. يتم تقييم عينات الدم المأخوذة مع وجود تشوهات على أنها غير مناسبة للتحليل. في هذه الحالة ، من الضروري إجراء عينة دم ثانية.

المبادئ العامة لإجراء التحليل ومراقبة الجودة البحوث المخبرية
في المختبر الوراثي الطبي الذي يقوم بفحص حديثي الولادة في المنطقة ، يتم تقييم جودة المواد البيولوجية التي تم الحصول عليها. يتم فرز النماذج مع الدم وتسجيلها في قاعدة بيانات الكمبيوتر. يتم إخراج خمسة أقراص بحجم 3 مم من كل عينة دم ثم يتم وضعها في خمس ألواح ميكروية منفصلة. في كل من الألواح الدقيقة ، يتم قياس مادة تحليلية واحدة ، وهي علامة كيميائية حيوية للمرض. بالنسبة لبيلة الفينيل كيتون ، فإن الواسم هو تركيز فينيل ألانين في الدم ، لقصور الغدة الدرقية الخلقي - مستوى الهرمون المنبه للغدة الدرقية ، للتليف الكيسي - التربسينوجين المناعي ، للجالاكتوز في الدم - الجلاكتوز الكلي ، لمتلازمة الأدرينوجينيل - 17-هيدروكسي بروجستيرون.

يتم وضع عينات المعايرة الموجودة في مجموعة الكاشف ، ومواد التحكم ذات التركيز المعروف للمادة التحليلية ، وعينات الدم المختبرة من الأطفال حديثي الولادة في صفيحة ميكروية بها 96 بئر. بعد ذلك ، قم بتنفيذ إجراء التحليل القياسي وفقًا لتعليمات المجموعة. يتم تقديم نتائج القياس لكل لوحة في شكل مطبوع ، يحتوي على قيم التألق الخاصة بالمعايرة ، ومنحنى المعايرة ، وقيم التألق وتركيز التحليلة في مواد التحكم ، وقيم التألق والتركيز التحليلي في الدم عينات قيد الدراسة.

يسمح تقييم التركيزات المقاسة من التحليلات في المواد الضابطة بمراقبة الجودة داخل الشركة. في سلسلة إعداد تتكون من 20 قياسًا على الأقل ، يحدد كل مختبر القيم المتوسطة والتفاوتات الخاصة به. يتم إدخال نتائج قياسات جميع الأجهزة اللوحية في بطاقة التحكم. إذا كانت قيم مواد المراقبة تفي بالمتطلبات المنصوص عليها في أمر وزارة الصحة في الاتحاد الروسي رقم 45 بتاريخ 7 فبراير 2000 "بشأن نظام الإجراءات لتحسين جودة البحوث المخبرية السريرية في مجال الرعاية الصحية مؤسسات الاتحاد الروسي "، يتم تقييم نتيجة القياس اللوحي على أنها مقبولة. خلاف ذلك ، يتم إعادة تصنيع الجهاز اللوحي.

تشارك مختبرات فحص الأطفال حديثي الولادة أيضًا في النظام الفيدرالي التقييم الخارجيالجودة ، والتي تعمل بمثابة ضابط خارجي مستقل ، وهو أمر ضروري لتقييم صحة الدراسات وتحديد الأخطاء النظامية. إلى جانب ذلك ، يشارك عدد من مختبرات الترددات اللاسلكية في هذا الملف الشخصي في مراقبة الجودة الدولية ، ولا سيما مركز السيطرة على الأمراض.

فحص المواليد الجدد لداء الفينيل كيتون
يعد فحص بيلة الفينيل كيتون هو المعيار لبرامج فحص حديثي الولادة ، حيث أنه على مدار أكثر من 40 عامًا من تنفيذه ، تراكمت كمية هائلة من المواد حول مسببات المرض ، والطرق المختبرية للتشخيص والعلاج. يوجد حاليًا مجموعة واسعة من الطرق لقياس تركيز الورم الغدي الليفي ، بدءًا من الاختبار الميكروبيولوجي المثبط المستخدم حتى الآن إلى قياس الطيف الكتلي الترادفي. في الاتحاد الروسي ، يتم تحديد مستوى الورم الغدي الليفي في بقع الدم الجافة بواسطة طريقة القياس الفلوري للصفيحة الدقيقة. يعتمد مبدأ قياس تركيز الورم الغدي الليفي في بقعة دم جافة على تكوين مركب فلوري من الورم الغدي الليفي مع النينهيدرين ، حيث تزداد شدة التألق عند التفاعل مع ثنائي الببتيد L-leucyl-b-alanine. يتم قياس الإسفار باستخدام محلل متعدد الوظائف بطول موجة 485 نانومتر. تتناسب شدة التألق طرديًا مع كمية الورم الغدي الليفي في عينة الدم. يقارن البرنامج شدة التألق لعينات الدم التي تم تحليلها مع تألق عينات المعايرة. يتم تقييم صحة التحليل من خلال قيم الورم الغدي الليفي في عينات التحكم.

تفسير النتائج
الأساسي هو القيمة الحدية لتركيز الورم الغدي الليفي ، الذي ينتج عن المختبر ، مع الأخذ في الاعتبار مجموعة الكواشف الموصى بها من قبل الشركة المصنعة ، والقيم السكانية لمستوى التحليل للمواليد الجدد في هذه المنطقة ، وكذلك المعلومات من المعامل المماثلة في الاتحاد الروسي والخارج. لتحديد هذا المؤشر ، من المهم تقدير عدد عمليات إعادة الاختبارات ، والتي تعتمد على القيمة النهائية. بالنسبة للمواليد الجدد والأطفال في الشهر الأول من العمر ، فإن مستوى الورم الغدي الليفي الذي يساوي 2 مجم / ديسيلتر (120 ميكرولتر / لتر) غالبًا ما يؤخذ كعتبة ، للأطفال الأكبر من شهر واحد - 3 مجم / ديسيلتر (150 ميكرو مول / لتر) ل). يتم أيضًا تحليل عينات الدم التي كانت نتيجة القياس الأول للورم الغدي الليفي مرتفعة بشكل غير طبيعي في تحليل موازٍ باستخدام نفس عينة الدم. يخضع جميع الأطفال الذين تبين أن مستوى الورم الغدي الليفي لديهم أعلى من القيمة المقطوعة أثناء القياس الموازي لإعادة الفحص.

يتم الحصول على عينة دم ثانية من الطفل (إعادة الاختبار) في مكان الإقامة أو في المؤسسة الطبية التي يوجد بها. للقيام بذلك ، اعتمادًا على درجة الزيادة في تركيز الأحماض الأمينية ، باستخدام المعلومات الموجودة في النموذج مع الدم ، يتم الاتصال بالعائلة. إذا كان المستوى الزائد من الورم الغدي الليفي ضئيلاً - حتى 3 مجم / ديسيلتر (181.5 ميكرولتر / لتر) ، يتم إخطار العائلة بالحاجة إلى دراسة ثانية. مع زيادة كبيرة في الورم الغدي الليفي - أكثر من 3 ملغ / ديسيلتر - هناك حاجة للاتصال في حالات الطوارئ مع الأسرة. يتم تنفيذ الرقابة المحلية على توفير الاختبارات من قبل كبير أطباء الأطفال في قسم الصحة في المنطقة ، المدينة ، الذي يحتفظ المختبر باتصال دائم به عبر الهاتف أو عبر البريد الإلكتروني.

في معظم الحالات ، خاصة عند الأطفال الذين يعانون من زيادة أولية طفيفة ، يكون مستوى الورم الغدي الليفي في تحليل إعادة الاختبار طبيعيًا. يمكن أن ترتبط الزيادة الأولية في المؤشر بعدم نضج أنظمة إنزيمات الكبد ، وخصائص مسار المخاض ، والخداج ، والشدة. الحالة العامةطفل ، إلخ.

يتم تشخيص الأطفال الذين يعانون من زيادة متكررة في تركيز الورم الغدي الليفي في إعادة الاختبار من 3 إلى 8 مجم / ديسيلتر (150-484 ميكرولتر / لتر) بفرط فينيل ألانين الدم. يحتاجون إلى مراقبة معملية منتظمة لمستوى الورم الغدي الليفي ومراقبة من قبل أخصائي الوراثة الذي يقرر ما إذا كان العلاج مناسبًا أم لا. إذا تم الكشف عن مستوى الورم الغدي الليفي الذي يساوي أو يزيد عن 8 ملجم / ديسيلتر (484 ميكرو مول / لتر) في إعادة الاختبار ، يعتبر تشخيص بيلة الفينيل كيتون مؤكدًا ، حيث يعمل هذا المؤشر كمعيار معمل موثوق للمرض. الآباء والأمهات الذين لديهم طفل مدعوون إلى استشارة طبية وراثية. يصف عالم الوراثة على الفور العلاج المناسب للطفل المصاب بالورم الغدي الليفي ويعلم الوالدين كيفية حساب النظام الغذائي. وفقًا للمعايير الحديثة ، يجب إجراء تشخيص بيلة الفينيل كيتون وبدء العلاج في موعد لا يتجاوز شهرًا من حياة الطفل. يتم إجراء العلاج اللاحق ، الذي يتم تنفيذه لسنوات عديدة ، تحت سيطرة كيميائية حيوية ثابتة لمستوى الورم الغدي الليفي في الدم ، والذي يتم إجراؤه أيضًا بواسطة المختبر الوراثي الطبي. يعتبر التركيز الأمثل للحمض الأميني في الدم أثناء العلاج بين 1 و 6 مجم / ديسيلتر (60.5-363 ميكرو مول / لتر).

الفحص الوليدي لفرط التفرط الخلقي
تختلف مسببات قصور الغدة الدرقية الخلقي ، لكن جميع أشكاله تتميز بنقص هرمونات الغدة الدرقية. بسبب قلة الخصوصية وعدم وضوح الأعراض السريرية عند الأطفال حديثي الولادة التشخيص المبكرقصور الغدة الدرقية الخلقي ممكن فقط على أساس دراسة مستوى هرمونات الغدة الدرقية. يعتمد الفحص على تحديد مستوى هرمون الغدة الدرقية ، والذي يزيد في الأشكال الأولية للمرض. يتم قياس مستوى الهرمون المنبه للغدة الدرقية في بقع الدم الجافة بطريقة تحليل اللانثانيد المناعي مع دقة الوقت ، باستخدام "شطيرة" من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عالية النوعية مقابل موقعين مختلفين على جزيء الهرمون المنبه للغدة الدرقية. مستوى التألق مستقر ، وشدته تتناسب طرديا مع كمية هرمون الغدة الدرقية في العينة.

تفسير النتائج
يتم تفسير قيم هرمون الغدة الدرقية الذي تم الحصول عليه أثناء الفحص مع مراعاة مجموعة الكواشف التي أوصت بها الشركة المصنعة وبيانات السكان حول مستوى هرمون الغدة الدرقية لحديثي الولادة في المنطقة. بالنسبة للتحليلات التي يتم إجراؤها في اليوم الرابع إلى السابع من حياة الطفل ، يكون الحد الفاصل هو 14 ميكرو وحدة دولية / مل ، للأطفال الذين تزيد أعمارهم عن 14 يومًا - 5 ميكرو وحدة دولية / مل. كعتبة للاشتباه في قصور الغدة الدرقية مع بدرجة عاليةالاحتمال ، استخدم قيمة 80 وحدة دولية / مل. جميع الأطفال الذين تزيد مستويات هرمون الغدة الدرقية عن هذه القيمة يخضعون لإعادة الفحص ، أي دعوتهم لإعادة الاختبار على أساس طارئ. يجب تسليم الدم المعاد جمعه لهؤلاء الأطفال إلى المختبر في غضون 48 ساعة بعد جمعها. تتم إحالة الأطفال الذين تم اكتشاف زيادة في مستوى هرمون الغدة الدرقية إلى اختصاصي الغدد الصماء للتحقق من التشخيص (قصور الغدة الدرقية الخلقي أو العابر) والعلاج.

فحص الجلاكتوزيميا في المواليد الجدد
حاليًا ، يتم استخدام خوارزميات مختلفة (معًا أو بشكل منفصل) كمخططات فحص للجالاكتوز في الدم: قياس تركيز الجالاكتوز والجالاكتوز -1 الفوسفات ، وتحليل النشاط الأنزيمي لجالاكتوز -1 فوسفات يوريديل ترانسفيراز.

يسمح استخدام تركيز الجالاكتوز في الدم كمعيار تشخيصي بالتزامن مع وجود خلل في galactose-1-phosphate uridyltransferase للكشف عن أوجه القصور في galactokinase و uridyldiphosphogalactose-4-epimerase ، حيث يتم زيادة تركيزات هذه التحليلات في جميع الحالات الثلاث. ومع ذلك ، مع التقييد الذي تم إدخاله في النظام الغذائي ، فإن هذا المؤشر ليس مفيدًا.

تتمثل ميزة تحليل النشاط الأنزيمي لجالاكتوز -1 فوسفات يوريديل ترانسفيراز في استقلاله عن طبيعة التغذية والقيود الغذائية ، إن وجدت ، التي تم تقديمها قبل الفحص. ومع ذلك ، في حالة نقل الدم السابق ، يمكن الحصول على نتيجة سلبية خاطئة. من ناحية أخرى ، يمكن أن تؤدي شروط الحصول على المواد ونقلها وتخزينها (درجة الحرارة والرطوبة) إلى انخفاض في نشاط الإنزيم القابل للحرارة ، أي إلى نتيجة إيجابية خاطئة.

تستخدم بعض برامج فحص حديثي الولادة الأجنبية طرقًا وراثية جزيئية للبحث عن الطفرات الأكثر شيوعًا في جين galactose-1-phosphate uridyltransferase. يتم إجراء هذا البحث بالتوازي مع الدراسة المعلمات البيوكيميائيةأو كخطوة لاحقة في فحص الدم من نفس النموذج. يتيح استخدام تحليل الحمض النووي تحسين الفحص - لتقليل عدد النتائج الإيجابية الخاطئة ، والتمييز بين الشكل الكلاسيكي ، وما إلى ذلك. ومع ذلك ، فإن القدرة على تحديد عدد محدود من الطفرات لا تجعل من الممكن تغطية جميع متغيرات المرض. يرتفع مستوى الجالاكتوز في جميع أشكال الجالاكتوز في الدم. هذا هو السبب في استخدام هذا المعيار كمؤشر بيوكيميائي أولي.

يتم قياس إجمالي الجالاكتوز في بقع الدم الجافة بواسطة طريقة قياس الفلور باستخدام الصفيحة الدقيقة. تتيح طريقة أوكسيديز الجالاكتوز المستخدمة قياس تركيز الجالاكتوز الكلي ، أي مجموع تركيزات الجالاكتوز والجالاكتوز -1 الفوسفات الحر. يتم تقييم صحة القياس التحليلي من خلال إجراء مراقبة الجودة داخل المختبر لتحديد تركيزه في المواد الضابطة.

تفسير النتائج
يتم تفسير قيم الجالاكتوز الكلي التي تم الحصول عليها أثناء الفحص مع مراعاة الفاصل الذي تم تطويره ، مع التركيز على مجموعة الكواشف التي أوصت بها الشركة المصنعة ، وبيانات السكان في المنطقة ، والخبرة المتاحة . تركيز عتبة إجمالي الجالاكتوز لحديثي الولادة في معظم مختبرات الاتحاد الروسي هو 7 مجم / ديسيلتر (385 ميكرو مول / لتر) ، موصى به من قبل الشركة المصنعة لنظام الاختبار. يجب إعادة اختبار الأطفال الذين تزيد تركيزاتهم من المادة التحليلية في عينات الدم عن 7 مجم / ديسيلتر.

تعتمد الحاجة الملحة للحصول على عينة دم ثانية من الطفل (إعادة الاختبار) على درجة الزيادة في إجمالي الجالاكتوز. نظرًا لأن الشكل الكلاسيكي للجالاكتوز في الدم يتميز بمظاهر حادة وشديدة في فترة حديثي الولادة ، ومهددة للحياة ، حيث تتجاوز قيمة الجالاكتوز الإجمالية 15 مجم / ديسيلتر (825 ميكرولتر / لتر) ، فمن الضروري الاتصال بالعائلة والعائلة. طبيب أطفال في الإقليم للحصول على معلومات حول حالة الطفل وإعادة الاختبار. إذا تم تأكيد مستوى مرتفع من هذا المؤشر في إعادة الاختبار واستنادًا إلى الحالة الصحية للطفل ، فقد يقرر طبيب الأطفال حديثي الولادة أو طبيب الأطفال نقل الطفل على وجه السرعة إلى نظام غذائي خالٍ من الجالاكتوز دون انتظار نتائج التحقق المختبري من تشخبص.

يعد التركيز المرتفع للجالاكتوز في الدم معيارًا ضروريًا ولكنه غير كافٍ لتشخيص الجالاكتوز في الدم. زيادة طفيفة في تركيز المادة التحليلية هي سمة من سمات شكل دوارتي. بالإضافة إلى ذلك ، فإن خصوصيات مسار الولادة ، والحالة العامة الشديدة للطفل ، وقصور وظائف الكبد ، وأمراض الكروموسومات تؤدي إلى زيادة مستوى الجالاكتوز في الدم.

يتطلب توضيح شكل الجالاكتوز في الدم فحصًا إضافيًا إلزاميًا - دراسة النشاط الأنزيمي لجالاكتوز -1 فوسفات يوريديل ترانسفيراز وتحليل الطفرات في جين الجالاكتوز -1 فوسفات يوريديل ترانسفيراز أو تسلسله. منذ تحليل الحمض النووي يسمح لنا بالتحقيق كمية محدودةالطفرات ، الكشف عن قصور النشاط الأنزيمي لجالاكتوز -1 فوسفات يوريديل ترانسفيراز هو معيار تشخيصي مهم. إذا تم تأكيد التشخيص ، يتم وصف الطفل على وجه السرعة بنظام غذائي خالٍ من الجالاكتوز ويتم إجراء الاستشارة الوراثية الطبية للعائلة. مزيد من العلاجيتم إجراء الطفل تحت سيطرة تحديد الجالاكتوز في الدم.

الفحص العصبي من أجل التليف الكيسي
هناك عدد من المخططات لفحص حديثي الولادة عن التليف الكيسي ، وتتمثل المرحلة الأولى منها في تحديد مستوى التريبسينوجين المناعي. التربسينوجين هو أحد المنتجات الرئيسية لإفراز البنكرياس ، وهو الوحيد من الإنزيمات التي ينتجها البنكرياس فقط ، لذلك فهو علامة محددة لوظيفة البنكرياس. في التليف الكيسي ، لوحظ زيادة في مستوى التربسينوجين المناعي في الدم في الشهرين الأولين من حياة الطفل. علاوة على ذلك ، ينخفض مستوى التربسينوجين المناعي ويصل إلى متوسط قيم السكان.

يتم استكمال النتائج التي تم الحصول عليها عن طريق قياس مستوى التربسينوجين المناعي عن طريق اختبار العرق و / أو تحليل الحمض النووي في مجموعات مختلفة:
IRT -> اختبار العرق -> تحليل الحمض النووي ؛
IRT -> تحليل الحمض النووي -> اختبار العرق ؛
IRT 1 -> IRT 2 -> اختبار العرق -> تحليل الحمض النووي.

في روسيا ، يتم قبول المخطط الأخير بشكل عام. يتم قياس مستوى التربسينوجين المناعي في بقع الدم الجافة بواسطة طريقة تحليل التألق المناعي اللانثانيد مع دقة الوقت ، باستخدام "شطيرة" من الأجسام المضادة أحادية النسيلة عالية التحديد ضد موقعين مختلفين على جزيء التربسينوجين المناعي. الإسفار مستقر ، شدته تتناسب طرديا مع كمية التربسينوجين المناعي في العينة.

تفسير النتائج
يتم تفسير قيم التربسينوجين المناعي الذي تم الحصول عليه أثناء الفحص مع مراعاة القطع ومجموعة الكواشف التي أوصت بها الشركة المصنعة والمركز الروسي للتليف الكيسي. بالنسبة للأطفال الذين تقل أعمارهم عن 21 يومًا ، تعتبر قيم التربسينوجين المناعي حتى 70 نانوغرام / مل طبيعية. بالنسبة للأطفال الأكبر سنًا ، يبلغ الحد الفاصل 40 نانوغرام / مل.

التربسينوجين المناعي ليس علامة محددة للمرض ؛ من المستحيل إجراء تشخيص بناءً على قيمته الأساسية. هذا هو السبب في أن جميع الأطفال الذين يعانون من مستويات مرتفعة من التربسينوجين المناعي يحتاجون إلى إعادة الفحص. لإعادة فحص التليف الكيسي (إعادة الاختبار) ، هناك فترة محدودة للغاية: من 21 يومًا إلى شهرين من العمر. الدم المأخوذ في سن متأخرة غير مناسب للبحث بسبب الطبيعة غير الإعلامية للاختبار. يجب إزالة التشخيص أو تأكيده بطرق أخرى. قد تكون الزيادة في مستوى التربسينوجين المناعي بسبب خصوصيات مسار العمل - فترة طويلة اللامائية ، والعمل السريع ، وكذلك خصائص الدورة فترة النفاس- إجهاد الأطفال حديثي الولادة ومتلازمة الضائقة التنفسية ونقص السكر في الدم. الالتهابات الخلقية، رتق الأمعاء ، الأمراض الخلقية والكروموسومية الشديدة ، إلخ.

اختبار العرق وتحليل الحمض النووي
يحتاج الأطفال الذين تم اكتشاف زيادة في التربسينوجين المناعي في إعادة الاختبار ، وكذلك أولئك الذين لم يتم إعادة فحصهم من أجل التريبسينوجين المناعي حسب العمر ، إلى مرحلة ثانية من الفحص - اختبار العرق. اختبار العرق - قياس تركيز الكلور في سائل العرق - المعيار التشخيصي الرئيسي للمرض للتليف الكيسي. تتمثل الطريقة الكلاسيكية لإجراء اختبار العرق ، ولكنها تستغرق وقتًا طويلاً وتستغرق وقتًا طويلاً في العمل ، في تحديد تركيز الكلور في العرق عن طريق معايرته وفقًا لطريقة جيبسون وكوك. حاليًا ، تُجرى الدراسة باستخدام جهاز يقيس التوصيل الكهربائي للعرق ، وهو ما يعادل تركيز الكلور. يتم جمع العرق على ساعد الطفل باستخدام التحليل الكهربائي للبيلوكاربين الأولي في موقع التجميع. النطاق الطبيعي لتركيزات الكلور الموصى به من قبل الشركة المصنعة للكواشف هو 0-60 مليمول / لتر من العرق. تعتبر قيم 61-80 مليمول / لتر مشكوك فيها وتتطلب إعادة الفحص والتكرار والمراقبة السريرية في الديناميات. ترتبط تركيزات الكلور الأكبر من 80 مليمول / لتر بالتليف الكيسي.

بالتوازي مع قياس التربسينوجين المناعي ، يتم إجراء تحليل للطفرات المتكررة ، ولا سيما delF508 وغيرها من الطفرات التالية في التردد ، وهو معيار تشخيصي مهم لـ هذا المرضوتحسين فحص حديثي الولادة. ومع ذلك ، نظرًا لأن عدد الطفرات المعروفة في الجين كبير ، فإن دراسة الطفرات المتكررة لا تؤكد أو تدحض التشخيص دائمًا. لهذا السبب يجب دائمًا تأكيد التشخيص عن طريق اختبار العرق. يتم إرسال الأطفال الذين تم تشخيص حالتهم مؤكدة لتلقي العلاج والمراقبة في المستوصف إلى مركز إقليمي. متخصص في علم الوراثة يقدم المشورة الطبية الوراثية للأسرة.

فحص حديثي الولادة من أجل تناذر الغدة الكظرية
تتمثل الخطوة الأولى في فحص حديثي الولادة للكشف عن متلازمة الأدرينوجين في تحديد مستوى 17-هيدروكسي بروجسترون ، وهو مقدمة للكورتيزول. يرتفع مستوى 17-هيدروكسي بروجسترون في كلا الشكلين من متلازمة الأدرينوجين التناسلية الناتجة عن نقص 21 هيدروكسيلاز أو 11-ب هيدروكسيلاز ، مما يجعل من الممكن التعرف على أكثر من 95٪ من الأطفال المصابين بمتلازمة الأدرينوجين التناسلية. في الأشكال الأخرى من متلازمة الأدرينوجينيل ، لا يتغير مستوى 17 هيدروكسي بروجستيرون ، لكن تواتر هذه الأشكال منخفض. يتم تحديد مستوى 17-هيدروكسي بروجسترون في بقع الدم الجافة عن طريق طريقة تحليل اللانثانيد المناعي مع دقة الوقت. يعتمد الاختبار على المنافسة بين 17-hydroxyprogesterone و 17-hydroxyprogesterone المسمى اليوروبيوم في دم حديثي الولادة من أجل موقع الارتباط مع الأجسام المضادة أحادية النسيلة الخاصة بـ 17-hydroxyprogesterone. الإسفار مستقر ، شدته تتناسب عكسيا مع كمية 17-هيدروكسي بروجسترون في العينة.

تفسير النتائج
يتم تفسير القيم التي تم الحصول عليها من 17-hydroxyprogesterone مع مراعاة مجموعة الكواشف التي أوصت بها الشركة المصنعة ومعهد أبحاث طب الغدد الصماء لدى الأطفال SE ENTS RAMS. بالنسبة للأطفال الناضجين مع فترة حمل تزيد عن 37 أسبوعًا ويزيد وزن جسمهم عن 2000 جرام ، يكون الحد الفاصل 17-هيدروكسي بروجسترون في الدم هو 30 نانومول / لتر. كقيمة حدية للاشتباه في وجود متلازمة أدرينوجينيتال بدرجة عالية من الاحتمال ، يتم استخدام قيمة 90 نانومول / لتر.

بالنسبة للأطفال الخدج الذين تتراوح أعمارهم بين 33 و 36 أسبوعًا ووزن الجسم أقل من 2000 جرام ، فإن مستوى 17-هيدروكسي بروجسترون هو 60 نانومول / لتر. في الأطفال الذين يعانون من الخداج العميق (عمر الحمل - 23-32 أسبوعًا) ، تعتبر النتيجة إيجابية إذا كان مستوى 17 هيدروكسي بروجسترون أكثر من 150 نانومول / لتر.

بالإضافة إلى الخداج ، يمكن الحصول على نتائج إيجابية خاطئة عند الأطفال الذين يعانون من حالة عامة شديدة ، على خلفية نقل الدم في الوريد ، مع ارتفاع نسبة البيليروبين في الدم (أكثر من 30 مجم / ديسيلتر). في الأطفال الذين يتلقون ديكساميثازون (أو إذا كانت الأم تأخذ الدواء) ، يمكن الحصول على نتيجة سلبية خاطئة. الأطفال الذين يعانون من زيادة متكررة في مستوى 17-هيدروكسي بروجستيرون في إعادة الاختبار تتم إحالتهم إلى اختصاصي الغدد الصماء للأطفال للتحقق من التشخيص ووصف العلاج. يحتاج جميع الأطفال المصابين بمتلازمة الأدرينوجين التناسلية وأولياء أمورهم وأفراد أسرهم إلى دراسة وراثية جزيئية واستشارة طبية وراثية.

في الختام يجب التأكيد على أن أي برنامج فحص يستخدم خوارزميات حديثة و طرق المختبرلا يكتشف 100٪ من مرضى هذا المرض الذي يرجع بشكل موضوعي إلى أشكال مختلفةالأمراض ، الحساسية غير الكافية ونوعية الأساليب المستخدمة ، القصور التنظيمي ، العامل البشري ، إلخ. لهذا السبب ، مع أي اشتباه سريري بمرض ما ، يجب إعادة فحص المريض بالكامل.