嚢胞性線維症の新生児の集団検診の特徴。 遺伝性疾患のための産科病院での新生児スクリーニングの実施：かかとからの血液検査

新生児スクリーニングとは何ですか、いつ、どのように行われますか？

新生児のスクリーニング、または「ヒールテスト」は、ロシア、ヨーロッパ、米国で大規模に実施されています。 通常、分析は赤ちゃんの生後4日目または5日目に病院で行われます。 結果は平均3週間で得られます。 ほとんどの場合、この検査中に、嚢胞性線維症と呼ばれる病気が子供に見られます。

新生児のスクリーニング（英語のスクリーニングから-並べ替え）は、最も多いものの1つです 効果的な方法診断 遺伝病新生児期。 遺伝子研究は、世界保健機関（WHO）の主導で実施されています。 ロシアでは、過去15年間、スクリーニングが必須の診断手段のリストに含まれています。 遺伝性疾患の大規模なリストから、有病率、疾患の重症度、および受け取る能力などの要因を考慮して、5つの病状を診断することをお勧めします 信頼できる結果分析して適用する 効果的な治療.

スクリーニングの利用規約

新生児スクリーニングはどのように行われますか？

📍満期産児では、分析は病院で4日目に行われます。
📍未熟児は生後7日目以降にスクリーニングされます。子供が早期に退院した場合、赤ちゃんは自宅または地元のポリクリニックで検査されます。
📍スクリーニングでは、末梢血（かかとから）が採取されるため、「かかとテスト」が行われます。
📍血液は、ろ過された紙の5つの別々のブランク（円）に適用されます。
📍テストは空腹時に行われ、スクリーニングの3時間前に新生児に栄養を与えることはできません。

いつスクリーニングを行うのですか？ 以前に分析を行った場合（生後2日目または3日目）、結果は偽陽性と偽陰性の両方になる可能性があります。 生後10日以内に試験に合格することをお勧めします。 先天性代謝異常症の特定 初期段階良好な予後のために重要です。

遺伝子レベルの病理の診断

どんな種類 先天性疾患ロシアでのスクリーニングによって診断されましたか？ このリストには、次の方法で治癒または重症度を軽減できる疾患が含まれています。 早い日付明らかにする。 これらは、さまざまな代謝障害に関連する病状です。 たとえば、これにはダウン症などの染色体異常の診断は含まれません。

📍甲状腺機能低下症。 この病気はホルモンの生産の違反と関連しています。 甲状腺..。 この病気の結果は深刻です：一般的な身体的および精神的遅滞。 平均して、5,000人の新生児につき1例の遺伝性甲状腺機能低下症が記録されており、少女は病気になる可能性が高くなります。 陽性のスクリーニング結果の後に検出された病気を完全に治癒する可能性は非常に高く、甲状腺機能低下症を打ち負かすことができます。 ホルモン療法が必要です。 甲状腺機能低下症、子供のTSH率については、他の記事をご覧ください。

📍嚢胞性線維症。 この病気では、肺の分泌物の生成が中断され、 消化管..。 細胞から分泌される水分が濃くなり、肺、肝臓、膵臓の深刻な機能障害を引き起こします。 嚢胞性線維症は最も 頻繁な病気、スクリーニング中に検出された1例は、2〜3千人の新生児に登録されています。 タイムリーな治療が開始されれば、予後は良好です。

📍副腎生殖器症候群。 まれで、15,000人の新生児に約1例です。 これには、（副腎皮質での）コルチゾールの産生の違反によって引き起こされる一群の遺伝病が含まれます。 この病気の結果は何ですか？ 生殖器の発達が遅れ、腎臓、心臓、血管が影響を受けます。 提供されない場合、おそらく致命的 健康管理..。 治療は生涯にわたるホルモン療法で構成されています。

📍ガラクトース血症。 この病気の原因は、ガラクターゼを分解する酵素の欠乏です。 この物質はブドウ糖とともに体内に入り、乳糖に含まれています。 ガラクトース血症の症状は徐々に現れ、新生児はかなりのようです 健康な子供..。 しかし、数週間後、嘔吐、食欲不振、腫れ、尿タンパク、黄疸が現れることがあります。 ガラクトース血症は、その結果として危険です：肝機能の深刻な違反、視力の低下、身体的、知的発達の遅延。 これはスクリーニングで診断される最もまれな病気であり、3万人​​の新生児に1回発生します。 ガラクトース血症の治療は、乳製品を一切使用しない厳格な食事療法です。

📍フェニルケトン尿症。 15,000人の新生児に1回発生するまれな遺伝性疾患。 フェニルケトン尿症は、フェニルアラニンの酸を破壊すると思われる酵素の生成の中断の結果として発生します。 フェニルアラニンの分解生成物は、全身に悪影響を及ぼし、血液中に蓄積します。 まず第一に、中央 神経系、脳、けいれんが現れます。 病気の合併症を避けるために、それは必要です 最も厳しい食事、これは体内へのフェニルアラニンの摂取を除外します。

医学では、代謝障害、または代謝に関連する約500の病気があります。 たとえば、ドイツでは、14の遺伝病が新生児スクリーニングによって診断され、米国では40を超える病気が診断されています。 ロシアでは、新生児スクリーニングが実施され、最も多い5つを診断しています。 危険な病状で開発を開始します 若い頃..。 両親の要請により、赤ちゃんが危険にさらされている場合、スクリーニングは16の病気に拡大することができます。

新生児スクリーニングのトピックに関しては多くの論争があります。 赤ちゃんに偽陽性の結果が出た後にストレスを経験した親は、この手順を受けることをお勧めしません。 赤ちゃんが深刻な診断を受けた他の母親と父親は、子供を深刻な結果から救い、病気を一時停止または治癒することができたので、この診断に感謝しています。

親が心配している5つの質問

スクリーニングは多くのママとパパにとって不安であり、待機期間は不安と恐怖に満ちています。 特に不安な母親は授乳の問題さえ抱えているかもしれません。 おそらくそれが、一部の産科病院では、分析がどのような目的で行われるのか、母親にまったく通知しない理由です。

📍いつ結果を得ることができますか？ 分析は3週間以内に実行されます。 結果が否定的である場合（そしてこれはほとんどの場合に当てはまります）、誰もそれを報告しません。 しかし、データは赤ちゃんの医療カードに記録されています。 陽性の結果が出た場合、彼らは間違いなくクリニックから電話をかけ直し、再度検査を受けるように依頼します。 ほとんどの場合、偽陽性検査は嚢胞性線維症に対するものです。
📍再スクリーニングで前のテストが確認された場合は？ 両親は遺伝学者との会話に招待されています。 彼は狭い専門家に紹介し、そこで追加の検査が行われます：コプログラム、DNA診断、乾燥血液スポットの分析、そして嚢胞性線維症が疑われる場合は汗試験。
追加の分析の後、それでも診断が確認された場合、赤ちゃんを治療する戦術の問題が決定されています。
📍新生児スクリーニングは自宅で行うことができますか？ 何らかの理由で病院でスクリーニングが行われなかった場合、または退院が3日目であった場合、分析は居住地のポリクリニックで行われます。 一部の母親は、状況についてコメントし、彼らの経験を共有しています。誰かが自宅で看護師に電話し、誰かが診療所に行き、誰かに看護師が帰宅してスクリーニングのために血液サンプルを採取しました。 何か問題があり、スクリーニングのために採血する時間がなくなっている場合は、有料の検査室で分析を行うことができます。 また、地区産科病院とポリクリニックに従属する高等保健当局に連絡して、この状況でどのように行動するかを尋ねることもできます。
📍スクリーニングの信頼度はどれくらいですか？ 分析が時間通りに行われ、赤ちゃんが採血の3時間前に食事をしていなければ、検査の信頼性は高くなります。 しかし、最初の陽性結果の後に診断が下されることはありません。 スクリーニングで偽陰性の結果が示されることはまれです。 この場合、症状がすでに現れているときに、病気は遅く検出されます。
📍スクリーニングをオプトアウトできますか？ はい、できます。 両親は責任を負い、新生児のスクリーニングを拒否する文書に署名します。 この紙は赤ちゃんのカードに接着されています。 地区クリニックの看護師または医師は、親の拒否が書かれるまで、電話をかけ、帰宅し、スクリーニングを受けるようにとのメモを残します。

病理学的代謝障害は遺伝性疾患だけではない可能性があることを知っておくことが重要です。 嚢胞性線維症、甲状腺機能低下症、ガラクトース血症、フェニルケトン尿症、副腎生殖器症候群の子供は、完全に健康な親に生まれることができます。 診断を確定するときは、治療を遅らせたり、フェニルケトン尿症やガラクトース血症に推奨される食事を怠ったりしてはならないことを知っておくことも重要です。

産科病院での新生児スクリーニングは、赤ちゃんにとって迅速、無料、無痛です。 医療専門家は、親が意識的にこの診断に取り組むことを推奨しています。この診断は、州のプログラムとWHOのイニシアチブに従って実施されます。 残念ながら、遺伝性代謝性疾患の検出が遅れると、不可逆的な結果、障害、および子供の死亡率につながります。

嚢胞性線維症（CF）の重篤な病気の新生児スクリーニング（NS）は、前世紀の70年代初頭にヨーロッパですでに実施されていましたが、これらは最初の試みにすぎませんでした。 これらの研究には、アルブミン含有量の胎便の分析が含まれていました。 1979年、新生児の血漿中で、嚢胞性線維症とともに増加する免疫反応性トリプシン（IRT）のレベルを測定することを学びました。 このイベントは、嚢胞性線維症の存在について新生児の集団検診を実施するためのさらなる研究の出発点となりました。

CFTR遺伝子の最初のクローニングが1989年に行われたとき、NSの能力は劇的に拡大しました。 CFスクリーニングプロトコルにDNA分析を含めることが可能になりました。

世界的な新生児スクリーニングデータ

ヨーロッパでは、160万人の新生児を対象に調査が実施され、そのうち400人の乳児が 嚢胞性線維症の症状.

2008年には、スクリーニングされた子供の数はほぼ2倍になりました。 この増加は、英国とロシアでの国民議会の実施によるものです。 このプログラムは、医療の要素だけでなく、経済の要素においても完全に正当化されています。

病気を早期に発見できれば、早期に治療を開始できるため、患者さんの生活の質や予後がさらに改善されます。 NSの導入とCFTR遺伝子の遺伝子型決定により、負担のかかった遺伝子プールを考慮に入れて、早期の家族計画が可能になりました。

NSオプション

ヨーロッパ諸国では​​、NAには約26のバリアントがあり、2〜4段階で構成されています。 最初の段階は、新生児の生後1週間の血中の免疫反応性トリプシンのレベルの測定です。 症状は非常に敏感ですが、IRTの増加は抱合性黄疸、出生前ストレス、腸閉鎖症でも見られるため、その特異性は不十分です。 腎不全..。 さらに、RTIレベルは、ヨーロッパ人と比較して北米人とアフリカ系アメリカ人で増加しています。

特異性を高めるために第二段階が必要です。 多数の国籍が共存する社会では、RTI / DNAを測定することで遺伝子変異のある患者を特定することはできません。

その他、 別の方法第二段階は、均一な形で、またはIRTと組み合わせて膵炎関連タンパク質（PAP）を見つけることです。 このアプローチは、CFTR変異の特定と分析に関連する問題を回避するのに役立ちます。 現時点では、開発された 組み合わせた方法：RAP +ИРТの決定と評価のために設定されています。研究は計画されているだけです。

上記のプログラムは組み合わせる必要があり、兄弟姉妹がいるため、病状が悪化している親戚や一般の人々が使用する必要があります。 嚢胞性線維症の患者症例の半分、つまり保因者に劣性遺伝子が含まれている可能性があります。

NSのネガティブな側面

CF検査が陽性の場合は、早急な治療が必要です。 親が子供のCFについて心配し、非常に疑わしいかもしれないのは、最初の気づきの時期です。 得られたスクリーニングデータと最終診断確認の間に少し時間が経過すると、この状況は心理的に小さな患者の両親の状態に好影響を与え、適切な治療の早期開始と両親との信頼関係の発展に貢献します。医者。

これらの関係を改善することはしばしば困難であり、時には不可能です。 NAの場合、誤検知テストの可能性があります。 したがって、科学者の仕事は、偽陽性テストの可能な限り低いパーセンテージを決定することです。

ロシアのNAプロトコル

1. ИРТ2;
2. 汗試験;
3. DNA診断。

2007年以来、NF on CFは、フェニルケトン尿症、甲状腺機能低下症、ガラクトース血症、副腎生殖器症候群などの重度の遺伝性疾患を検出するための必須の手段として導入されています。

ロシアでの分析のコストは高い（約100ドル）ため、NSが実行されることはめったにありません。

汗のサンプル

主にヨーロッパの医療センターでは、塩化物の存在について汗試験が実施されています。 ロシアでは、汗液中の塩化物を測定するために2つのシステムが登録されています。 この 間接法これらの物質の決定。

汗の収集と分析システム

アメリカ製のSweat-Chek汗分析装置を備えたMacroductシステムは、生後1か月の子供にうまく使用されています。 分析は、30分以内に実験室条件の外でその助けを借りて実行することができます。

0.1％ピロカルピン溶液の電気泳動による発汗を刺激するシステムと汗コンダクタンスアナライザーを備えたナノダクト装置も使用されています。

分析には3〜6μLの汗が必要です。 したがって、この装置は、マススクリーニングの技術装置として非常に広く使用されています。 80ミリモル/ Lの結果は陽性と見なされます。 指標の境界線-60〜80ミリモル/リットル。

調査データ

3年間の研究で、400万人以上の新生児がNSを受けました 子供の嚢胞性線維症..。 検査されたすべての中で、CFの兆候のある416人の乳児が特定されました。 したがって、ロシアでの発生率は1：10,000人の新生児です。

繰り返される研究は、多くの場合、 陽性テスト（と レベルの増加 IRT）、両親がそれ以上の研究を拒否するため。

新生児の臨床検査

病状が検出されると、赤ちゃんは2週間ごとに3か月間、その後6か月間は毎月、その後は2か月ごとから1年まで、および1年ごとに四半期ごとに医師によって観察されます。

病気の兆候がない状態で患者を監視することが重要です。 スカトロジカル検査は1年まで毎月実施され、膵臓エラスターゼは生後1年に2回測定されます。 一般的な分析血液。 悪化の進展とともに 病理学的プロセス検査は、より深く、より徹底的な方法で実施する必要があります。

嚢胞性線維症の治療

治療法は、病気が診断された瞬間から始まります。 治療の量はに依存します 臨床症状臓器の損傷の幅。 圧倒的多数の患者では、すべての症状は生後1年と生後1か月に発生します。

新生児の場合、運動療法は、マッサージ、振動、撫でる、ボールのエクササイズを使用して使用されます。 すべての活動は子供にとって楽しいものでなければなりません。

気管支閉塞が付着している場合は、気管支拡張薬と粘液溶解薬が適応となります。

消化不良の症状がある場合は、酵素が代替治療として処方され、脂溶性ビタミンが含まれます。

結論

レート値 新生児スクリーニングロシアの嚢胞性線維症の場合、数年後には可能になるでしょう。 同時に、州はこれらのイベントの重要性を理解し、あらゆる方法でそれらの実施条件を改善する必要があります。

嚢胞性線維症（CF）の重篤な病気の新生児スクリーニング（NS）は、前世紀の70年代初頭にヨーロッパですでに実施されていましたが、これらは最初の試みにすぎませんでした。 これらの研究には、アルブミン含有量の胎便の分析が含まれていました。 1979年、新生児の血漿中で、嚢胞性線維症とともに増加する免疫反応性トリプシン（IRT）のレベルを測定することを学びました。 このイベントは、嚢胞性線維症の存在について新生児の集団検診を実施するためのさらなる研究の出発点となりました。

CFTR遺伝子の最初のクローニングが1989年に行われたとき、NSの能力は劇的に拡大しました。 CFスクリーニングプロトコルにDNA分析を含めることが可能になりました。

世界的な新生児スクリーニングデータ

ヨーロッパでは、160万人の新生児を対象に調査が実施され、そのうち400人の乳児が 嚢胞性線維症の症状.

2008年には、スクリーニングされた子供の数はほぼ2倍になりました。 この増加は、英国とロシアでの国民議会の実施によるものです。 このプログラムは、医療の要素だけでなく、経済の要素においても完全に正当化されています。

病気を早期に発見できれば、早期に治療を開始できるため、患者さんの生活の質や予後がさらに改善されます。 NSの導入とCFTR遺伝子の遺伝子型決定により、負担のかかった遺伝子プールを考慮に入れて、早期の家族計画が可能になりました。

NSオプション

ヨーロッパ諸国では​​、NAには約26のバリアントがあり、2〜4段階で構成されています。 最初の段階は、新生児の生後1週間の血中の免疫反応性トリプシンのレベルの測定です。 症状は非常に敏感ですが、IRTの増加は、抱合性黄疸、出生前ストレス、腸閉鎖症、腎不全にも見られるため、その特異性は不十分です。 さらに、RTIレベルは、ヨーロッパ人と比較して北米人とアフリカ系アメリカ人で増加しています。

特異性を高めるために第二段階が必要です。 多数の国籍が共存する社会では、RTI / DNAを測定することで遺伝子変異のある患者を特定することはできません。

第2段階の別の代替方法は、膵炎関連タンパク質（PAP）を均一な形で、またはIRTと組み合わせて見つけることです。 このアプローチは、CFTR変異の特定と分析に関連する問題を回避するのに役立ちます。 現在、開発された組み合わせ方法があります：PAP + IRTの決定と評価のためのセット。研究は計画されているだけです。

上記のプログラムは組み合わせる必要があり、兄弟姉妹がいるため、病状が悪化している親戚や一般の人々が使用する必要があります。 嚢胞性線維症の患者症例の半分、つまり保因者に劣性遺伝子が含まれている可能性があります。

NSのネガティブな側面

CF検査が陽性の場合は、早急な治療が必要です。 親が子供のCFについて心配し、非常に疑わしいかもしれないのは、最初の気づきの時期です。 得られたスクリーニングデータと最終診断確認の間に少し時間が経過すると、この状況は心理的に小さな患者の両親の状態に好影響を与え、適切な治療の早期開始と両親との信頼関係の発展に貢献します。医者。

これらの関係を改善することはしばしば困難であり、時には不可能です。 NAの場合、誤検知テストの可能性があります。 したがって、科学者の仕事は、偽陽性テストの可能な限り低いパーセンテージを決定することです。

ロシアのNAプロトコル

1. ИРТ2;
2. 汗試験;
3. DNA診断。

2007年以来、NF on CFは、フェニルケトン尿症、甲状腺機能低下症、ガラクトース血症、副腎生殖器症候群などの重度の遺伝性疾患を検出するための必須の手段として導入されています。

ロシアでの分析のコストは高い（約100ドル）ため、NSが実行されることはめったにありません。

汗のサンプル

主にヨーロッパの医療センターでは、塩化物の存在について汗試験が実施されています。 ロシアでは、汗液中の塩化物を測定するために2つのシステムが登録されています。 これは、これらの物質を測定するための間接的な方法です。

汗の収集と分析システム

アメリカ製のSweat-Chek汗分析装置を備えたMacroductシステムは、生後1か月の子供にうまく使用されています。 分析は、30分以内に実験室条件の外でその助けを借りて実行することができます。

0.1％ピロカルピン溶液の電気泳動による発汗を刺激するシステムと汗コンダクタンスアナライザーを備えたナノダクト装置も使用されています。

分析には3〜6μLの汗が必要です。 したがって、この装置は、マススクリーニングの技術装置として非常に広く使用されています。 80ミリモル/ Lの結果は陽性と見なされます。 指標の境界線-60〜80ミリモル/リットル。

調査データ

3年間の研究で、400万人以上の新生児がNSを受けました 子供の嚢胞性線維症..。 検査されたすべての中で、CFの兆候のある416人の乳児が特定されました。 したがって、ロシアでの発生率は1：10,000人の新生児です。

親がそれ以上の研究を拒否するため、検査が陽性（RTIのレベルが高い）の子供に対しては、繰り返しの研究が行われないことがよくあります。

新生児の臨床検査

病状が検出されると、赤ちゃんは2週間ごとに3か月間、その後6か月間は毎月、その後は2か月ごとから1年まで、および1年ごとに四半期ごとに医師によって観察されます。

病気の兆候がない状態で患者を監視することが重要です。 スカトロジカル検査は1年まで毎月実施され、膵臓エラスターゼは生後1年に2回測定され、全​​血球計算が行われます。 病理学的過程の悪化の進展に伴い、検査はより深くそしてより徹底的に行われなければならない。

嚢胞性線維症の治療

治療法は、病気が診断された瞬間から始まります。 治療の量は、臨床症状と臓器損傷の程度によって異なります。 圧倒的多数の患者では、すべての症状は生後1年と生後1か月に発生します。

新生児の場合、運動療法は、マッサージ、振動、撫でる、ボールのエクササイズを使用して使用されます。 すべての活動は子供にとって楽しいものでなければなりません。

気管支閉塞が付着している場合は、気管支拡張薬と粘液溶解薬が適応となります。

消化不良の症状がある場合は、酵素が代替治療として処方され、脂溶性ビタミンが含まれます。

結論

数年以内に、ロシアにおける嚢胞性線維症の新生児スクリーニングの重要性を評価することが可能になるでしょう。 同時に、州はこれらのイベントの重要性を理解し、あらゆる方法でそれらの実施条件を改善する必要があります。

遺伝子スクリーニングの主な目標は、病気を引き起こすか、その発生の素因となるか、子孫に病気を引き起こす可能性のある集団内の特定の遺伝子型を持つ人々を特定することです。 遺伝子スクリーニングの基本原理は60年代に開発されました。 前世紀、新生児のフェニルケトン尿症の検出に使用され始めたとき。 1968年、世界中のいくつかの国でフェニルケトン尿症のスクリーニングを受けたWHO専門家グループが、新生児スクリーニングプログラムの一般的な要件を発表しました。 遺伝性疾患代謝。 これらの要件は引き続き有効です。

遺伝子スクリーニングの基本原則
遺伝性代謝性疾患の新生児スクリーニングプログラムを実施するための一般的な要件には、以下の基準が含まれます。
人口における病気の頻度は十分に高くなければなりません（それはプログラムの経済的効率にのみ関連しているので、この要件はそれほど厳密ではありません）。
病気は臨床的にそして実験室でよく研究されなければなりません。
スクリーニングプログラムを使用することの利点がそれを実施するコストよりも大きいように、病気は重症または致命的でさえなければなりません。
臨床検査では、1人の患者を見逃さないように、偽陰性の結果が出てはなりません。 プログラムの経済効率を低下させないために、誤検知の結果の頻度も高くすべきではありません。
臨床検査は、単純で、安全で、倫理的に受け入れられるものでなければなりません。
スクリーニング可能な疾患の効果的な治療法を開発する必要があります。
治療が肯定的な結果をもたらす出生からの時間間隔は正確に確立されなければなりません。
スクリーニングは費用効果が高い必要があります。

これらの要件に基づいて、新生児スクリーニングは対策のシステムであり、その主なものは前臨床段階で特定の疾患を持つ新生児の特定です。 早期の病因治療、社会に本格的な個人を与えることを可能にする; 2番目の病気の子供の誕生を防ぐことを目的とした医学的および遺伝的家族カウンセリング。

最も一般的で重度の遺伝性疾患のスクリーニングは、人口の動機付けに影響を与え、障害の顕著な割合を減らし、資源を節約するため、他の健康問題の中でも優先度の高いカテゴリーに分類されます。 新生児スクリーニングは、実際の医療のために遺伝医学によって提案された予防への根本的に新しいアプローチです。

上記の要件は、多くの遺伝性代謝性疾患によって満たされています。 ロシアでは、新生児は1985年からフェニルケトン尿症、1993年から先天性甲状腺機能低下症のスクリーニングを受けています。 2006年以降の国家プロジェクト「Healthofthe Nation」の枠組みの中で、スクリーニングはさらに3つの疾患、ガラクトース血症、副腎生殖器症候群、嚢胞性線維症で補完されています。

フェニルケトン尿症は、常染色体劣性遺伝形式を伴う遺伝性疾患です（患者は一世代で家族に蓄積します）。

ヨーロッパ諸国におけるフェニルケトン尿症の平均頻度は、ロシアのヨーロッパ地域では1:10 000の新生児であり、1：6500-1：7000です。 フェニルケトン尿症のすべての形態の主な診断基準は、血中のフェニルアラニン濃度の上昇です。 高フェニルアラニン血症の不均一なグループには、アミノ酸フェニルアラニンの多くの遺伝性代謝障害が含まれ、その結果、このアミノ酸とその誘導体が体液に蓄積します。 最も一般的な障害は、12番染色体（12q22-q24.2）のフェニルアラニンヒドロキシラーゼ遺伝子の変異によって引き起こされるフェニルケトン尿症の古典的な形態です。 現在までに、フェニルアラニンヒドロキシラーゼ遺伝子に何百もの変異が同定されており、そのうち8つが最も一般的です。 45％の割合で発生する主な突然変異はR408Qです。 遺伝子の突然変異の結果として、酵素は欠陥があり、フェニルアラニンはチロシンに変換できず、血中に蓄積します。

代謝ブロックが発生し、その結果、フェニルアラニンのレベルが絶えず増加し、主に子供の発達中の脳にとって毒性になるような濃度に達します。 治療なしでは、PKUの子供の95％が重症になります 精神遅滞、運動発達の遅延、発作、皮膚の湿疹、および高齢になると、全体的な行動障害が追加されます。

治療を早期に開始し、注意深く実施すれば、子供のフェニルケトン尿症の臨床症状は現れず、健康に成長し、実質的に仲間と変わらないでしょう。 治療の理論的根拠は、子供が受け取る食品中のフェニルアラニンの量を減らすことです。 これは通常、特別な処方と食事療法によって達成されます。 子供の血中フェニルアラニンレベルは常に監視されており、検査室のパラメーターに応じて、フェニルアラニンのレベルを上げないようにこれらの製品の組成が調整されますが、子供の正常な成長と発達が保証されます。 フェニルケトン尿症の患者がいる家族は、医学的および遺伝的カウンセリングを受ける必要があります。その後の妊娠では、出生前のDNA診断を行うことができます。

先天性甲状腺機能低下症は、出生時からの子供の成長と発達の深刻な障害によって現れ、ヨウ素含有ホルモンを産生する甲状腺の完全または部分的な機能障害によって引き起こされます。 ほとんどの場合、先天性甲状腺機能低下症は、甲状腺の欠如、またはその発育不全、または誤った位置が原因​​で発生します。 先天性甲状腺機能低下症を治療せずに放置すると、子供の成長が急激に遅くなり、重度の不可逆的な精神遅滞が発生し、他の人が現れます。 臨床症状病気。 病気は常に進行し、生涯にわたる障害につながる可能性があります。 ただし、その後最初の月に治療を開始した場合
出産、ほとんどの場合、子供は正常に発育します。 先天性甲状腺機能低下症の症例の約80〜85％は非遺伝性であり、偶発的に発生し、通常は甲状腺の奇形が原因で発生しますが、原因は不明です。 下垂体-甲状腺系の一過性機能障害の発症の病因では、甲状腺刺激ホルモンの合成の増加に伴う下垂体の活動の増加と甲状腺ホルモンの産生の阻害の両方が最も重要である可能性があります。

甲状腺ホルモン濃度の低下を伴う一過性の変化の発生のリスクグループには、以下が含まれます。
複雑な妊娠過程、特に胎盤機能不全の母親から生まれた新生児。
内分泌障害、特に甲状腺疾患のある母親から生まれた新生児。
未熟児または子宮内栄養失調による機能的未熟児。

症例の15〜20％で、先天性甲状腺機能低下症は、原則として、常染色体劣性の方法で遺伝します。 その突然変異が甲状腺機能低下症につながる少なくとも7つの既知の遺伝子があります。 そのため、先天性甲状腺機能低下症の分子遺伝学的分析は困難であり、常に効果的であるとは限りません。 しかし、先天性甲状腺機能低下症は、遺伝性および非遺伝性の両方で、早期に発見されれば十分に治療されるため、そのような遺伝子分析の必要性はほとんどありません。

先天性甲状腺機能低下症は、ほぼ同じ頻度で世界中で発生します-1：3000-1：4000新生児。 ロシアにおける先天性甲状腺機能低下症の同じ頻度。 女の子では、理由は不明ですが、男の子の2倍の頻度で発見されます。 スクリーニングプログラムでは、一次検査として乾燥血液染色サンプルの甲状腺刺激ホルモン検査を使用します。 血液サンプル中の甲状腺刺激ホルモンの含有量が増加している場合は、再検査が行われ、その結果に基づいて病気の子供が特定されます。 遺伝学者は患者を内分泌専門医に紹介します。内分泌専門医は治療を処方し、将来子供を監視します。

ガラクトース血症は、炭水化物代謝の遺伝性疾患の1つです。 この病気の病因は、代謝酵素の1つであるガラクトースの欠陥に基づいています。ガラクトースは、ラクトース二糖の加水分解中に腸で形成されます。 体の細胞におけるガラクトースの変換の最初の段階はそのリン酸化であり、これは酵素ガラクトキナーゼによって実行されます。 この反応の生成物であるガラクトース-1-リン酸は、ガラクトース-1-ホスファチュリジルトランスフェラーゼによって代謝されてウリジルジホスホガラクトースになります。 後者のさらなる変換は、ウリジルジホスホガラクトース-4-エピメラーゼの助けを借りて起こります。 3つの酵素（ガラクトキナーゼ、ホスファチリジルトランスフェラーゼ、またはウリジルジホスホガラクトース-4-エピメラーゼ）のいずれかの欠乏の結果-血中のガラクトース濃度の増加-ガラクトース血症。 原則として、ガラクトース血症はホスファチュリジルトランスフェラーゼ欠損症として理解されており、その中で最も重症なのは古典的な形態のガラクトース血症です。 文献によると、古典的な形式の頻度は1:50 000-1：60000新生児です。

ガラクトース血症には2つの形態があります。 ガラクトキナーゼ欠損症による古典的なガラクトース血症は、常染色体劣性の方法で遺伝します。 遺伝子は9p13遺伝子座に局在しています。 病気の発症は急性であり、新生児期には、嘔吐、下痢、黄疸、肝腫大、白内障、栄養失調、精神運動発達の遅延、腎尿細管機能障害が現れます。

ウリジルジホスホガラクトース-4-エピメラーゼの全身性機能不全によるガラクトース血症も常染色体劣性遺伝します。 遺伝子は1p36-p35遺伝子座に局在しています。 病気の発症は新生児期です。 白内障（不在）を除いて、病気の症状は同じですが、感音難聴があります。 これらの2つの形態について、ガラクトース血症の無症候性の良性変異体（Duarteの変異体）が報告されており、その集団頻度は古典的な形態よりも高い。

治療を早期に開始すると、子供はガラクトース血症の臨床症状を発症せず、健康に成長します。 治療のポイントは除外す​​ることです 食品主にガラクトースを含む 母乳および他のミルク混合物。 それらは特別な大豆ベースのブレンドと交換することができます。 治療の早期処方は、最適には生後10日より前に、しばしば致命的となる深刻な危機を回避します。 遺伝医学相談では、出生前のDNA診断がその後の妊娠で可能です。

嚢胞性線維症は、最も一般的な遺伝性疾患の1つであり、通常、重症の経過と生涯の予後不良を伴います。 嚢胞性線維症の発生率は、ヨーロッパ人種の代表者の間で、1：600から1：12,000の新生児までさまざまです。 嚢胞性線維症のCFTR遺伝子は、7番染色体の長腕にマッピングされています。この遺伝子で同定された変異の数は2000を超え、そのうちdelF508が最も頻繁に見られ、ロシアの嚢胞性線維症の患者の54％に見られます。

この遺伝子は、細胞内の塩素イオンのチャネルとして機能するタンパク質の合成を担っています。 このチャネルの機能不全のために、肺、膵臓および他の器官の粘液および他の分泌物は非常に厚くて粘稠になります。 これは開発につながります 慢性感染症、膵臓の酵素が腸に入ることができないので、肺組織への損傷、食物の消化不良。 病気は通常、幼い頃に始まります。 嚢胞性線維症には、肺、腸、混合の3つの主要な形態があります。 これらの中で最も一般的なのは混合形式です。 嚢胞性線維症の人の約80％に発生します。 肺の形態は慢性閉塞性肺疾患によって現れます 気管支肺プロセス..。 慢性 炎症過程肺組織の破壊につながります。 患者の血液は酸素で十分に飽和されておらず、そのために心臓、肝臓、その他の臓器が苦しんでおり、子供たちは身長と体重が仲間に遅れをとっています。 肺嚢胞性線維症の患者の治療には、強力な抗生物質を大量に使用する必要があります。 嚢胞性線維症の腸型では、タンパク質や脂肪を分解する膵臓の酵素が腺の管の閉塞のために腸に入らないため、食物の消化プロセスが中断されます。 腸の形の主な治療法は、膵臓の酵素の摂取です。 嚢胞性線維症の混合型では、腸の症状が肺の損傷を悪化させます。 混合形態の治療は最も困難です。 必要な治療を受けていない嚢胞性線維症の患者は、平均余命が短い。 嚢胞性線維症が新生児で検出され、生後2か月からすでに治療が開始されている場合、この病気の臨床症状ははるかに簡単で、子供は実質的に正常に肉体的および精神的に発達します。 彼の平均余命は伸びており、適切な治療のおかげで、先進国では35年以上になります。

スクリーニングプログラムでは、一次検査として、乾燥血液染色サンプル中の免疫反応性トリプシンの含有量の研究を使用します。 1回目と2回目の臨床検査が陽性の場合、他のスクリーニング可能な遺伝性疾患とは異なり、このような診断の可能性は高いですが、これは子供が嚢胞性線維症を患っていることを意味しません。 診断を確認するために、3〜4週齢の乳児に、汗中の塩素濃度を測定する多くの検査が行われます。 ロットテストが陰性の場合、子供は健康であると見なされますが、それでもしばらくの間監視されます。 ロットテストが陽性の場合、嚢胞性線維症の診断は、疾患の臨床症状が現れる前でも確立されていると見なされます。

副腎生殖器症候群は、副腎ステロイドホルモンの生合成に関与する酵素または輸送タンパク質の1つに欠陥があることに基づく疾患のグループです。 この病気のほとんどの症例（約90-95％）は21-ヒドロキシラーゼ欠損症に関連しており、5-10％は11-p-ヒドロキシラーゼ欠損症に関連しています。

21-ヒドロキシラーゼ遺伝子（CYP21B）は、CYP21A偽遺伝子とともに6p21.3遺伝子座にマッピングされています。 2つの遺伝子の高度な相同性とタンデム配列は、それらの組換えと活性遺伝子の機能の破壊につながる可能性があります。 21-ヒドロキシラーゼ欠損症につながる数十の変異が同定されています。 点突然変異は約80％を占め、欠失は変化の約20％を占めます。 最も頻度の高い点突然変異は12スプライス、次にI172Nなどです。21-ヒドロキシラーゼ欠損症の頻度は非常に高く、1：8000-1：15,000人の新生児になります。 診断が遅れ、時期尚早で 間違った扱い深刻な結果につながる可能性があります：塩を浪費する危機による子供の死、女の子の外​​性器の顕著な男性化を伴う性別の選択の間違い、成長障害、思春期、不妊症。 新生児スクリーニングの導入により、病気をタイムリーに検出し、診断エラーを回避できます。

3つの臨床表現型が区別されます 副腎生殖器症候群:
塩分を失う形-誕生からの「疑わしい」性器。 新生児期-副腎の危機（嘔吐、脱水症、発作、心停止）の形で現れる重度の塩分喪失;
単純な男性化形態-女の子の出生時の「疑わしい」性器、男の子の正常、出生後の両性、第二次性徴の早産、低身長。
弱毒化（非古典的）形態-思春期に発症し、少女のみに発症（乳腺の弱い発達、発毛 男性タイプ、無月経）。

これらの3つの形態は、副腎皮質の先天性過形成の全症例の約90％を占め、そのうち60〜65％が塩を浪費する形態の割合です。 21-ヒドロキシラーゼ欠損症の結果として、この酵素によって制御されるコレステロールのコルチゾールおよびアルドステロンへの変換が損なわれます。 同時に、コルチゾールとアルドステロンの前駆体の蓄積があり、これらは通常男性ホルモンであるアンドロゲンに変換されます。 副腎生殖器症候群にはコルチゾールとアルドステロンの前駆体が多く蓄積するため、通常よりもはるかに多くのアンドロゲンが形成されます。これが、 臨床像副腎生殖器症候群。 この病気は常染色体劣性遺伝します。 スクリーニングプログラムでは、乾燥血液染色サンプル中の17-ヒドロキシプロゲステロンの濃度を一次検査として使用します。 内容が増えた場合は、再検査を行い、病気の子供を特定します。 治療はできるだけ早く処方されるべきです。そうすれば、子供の副腎生殖器症候群の臨床症状は現れず、彼は健康に成長し、仲間と変わらないでしょう。 遺伝医学の診察では、出生前のDNA診断はその後の妊娠で行うことができます。

新生児スクリーニングの基本的な手順
従来、新生児の遺伝性疾患のスクリーニングには5つの段階があります。
第1段階-生後4〜5日目に、産科施設でかかとから新生児から採血します。 ろ紙に血液サンプルを収集するすべての方法について、標準を作成して公開する必要があります。 理想的には、教育機関にビデオ映像を提供する必要があります。 さらに、乾燥血液サンプルを輸送するためのシステムは、シンプルでアクセスしやすいものでなければなりません。これにより、たとえば、ガラクトース血症や副腎生殖器症候群の場合、出生時から発症前の10日以内に分析と治療を短時間で開始できます。危機。
第2段階-適切な検査パラメーターを決定するための迅速な一次スクリーニング。 この分析は、適切な機器を備えた研究所で実施されます。
第3段階-の確認診断 肯定的な結果、できるだけ早く同じ研究所で実施する必要があります。 DNA診断と第2段階および第3段階での臨床検査の品質管理は、連邦参照センターで実施されます。
第4段階-特定された患者の治療。これは、遺伝学者、新生児科医、小児科医、内分泌学者が実施する必要があります。 治療は生後1ヶ月以内に処方されなければなりません。 治療の有効性のモニタリングは、臨床および検査データを使用して実行されます。
第5段階-病気の子供が現れた家族における医学的遺伝カウンセリングと出生前DNA診断。 遺伝医学相談で行われます。

すべてのステージを完全に準備する必要があります。そうすれば、プログラムの実行を開始できます。 開発を成功させるには、プログラム計画の段階で多くの問題を特定して解決する必要があります。 まず第一に、世界のほとんどの国と同様に、私たちの国では新生児スクリーニングが州のプログラムであるため、政府の支援と財源が重要です。

プログラムの実行に直接関連するもの：
産科病院スタッフのトレーニング（血液サンプルの収集）;
実験室の能力（機器）とスタッフのトレーニング。
可用性 通常値スクリーニングされた新生児集団の研究された指標。
血液サンプル輸送スキーム;
実験室作業の調整;
データを収集し、医師に警告するための条件を作成します。
血液サンプル、結論、両親への通知、特定された患者、治療およびその結果に関する情報を保存するためのコンピューター化されたシステムの作成。
実験室の品質管理プログラム;
医療の利用可能性。

プログラムのすべてのセクションで質の高いパフォーマンスを維持するための効果的な方法は、準備です。 実用的な推奨事項プログラムの各段階の手順の詳細な説明付き。 また、新たな問題解決の実務経験をまとめた総合マニュアル（マニュアル）を作成する必要があります。 新生児スクリーニングプログラムの実施を成功させるための重要な条件の1つは、プログラムのいわゆる教育ブロックである集団の準備です。 人々は、新生児スクリーニングとは何か、それがどのように行われるか、それが人口のすべての人にどのように役立つかを知る必要があります。

少なくとも我が国では、3つの機関が新生児のスクリーニングに関与しています：産科病院（新生児からの採血）、医学的および遺伝的相談（第2および第3段階の実施、特定の疾患の治療、およびスクリーニングされたすべての疾患の治療の検査室モニタリング、医療および遺伝的家族カウンセリング）、リファレンスセンター（検査室の品質管理、DNA診断）。 スクリーニングプログラムの国際的なネットワークがあります。

実験室研究
一般的な原則
新生児スクリーニングに使用される生物学的材料は、濾紙上で血液乾燥されます。

生物学的材料の入手
各新生児からの採血は、その時点で子供がいる医療機関で、生後4〜5日（生後72時間以内）に厳密に行われます。 採血するまでに、子供は少なくとも24時間は十分な栄養を摂取する必要があります。 未熟児は生後7日目と14日目に採血します。 輸血または血液透析を受けた小児では、最後の処置から1か月後に採血が繰り返されます。

採血は、現在、特殊な形態の濾紙（Whatman 903）でのみ実施されています。すべての医療機関への形態の供給は、地域の遺伝医学研究所によって実施されています。 実験室での測定、それらの評価および解釈は、同じ種類の紙で作られた校正サンプルおよび対照材料を使用して実行されるため、この目的で他の紙またはフォームを使用することは許可されません。 血液サンプルを採取する前に、新生児のかかとを洗浄し、70％エタノール溶液で湿らせた滅菌ナプキンで拭き、乾燥した滅菌ナプキンで吸い取ります。 エタノールの代わりに他の消毒液を使用することは、それらのいくつかが測定結果に影響を与える可能性があるため、望ましくありません。 血液は使い捨てのスカリファイヤーを使用して採取されます。 溶血を避けるために、ピアス後の最初の一滴を乾いた滅菌綿棒で取り除きます。 ブランクに示されている各円は、ブランクで子供のかかとに触れることなく、1滴の大きな血に浸されています。 血液の染みは、少なくともフォームに示されているサイズである必要があります。染みの種類は、フォームの両側で同じです。 この量の血液は、スクリーニング研究に十分です。 円の血液の充填が不完全な場合は、ピアスを繰り返す必要があります。 血液ブランクは、直射日光を避けて、室温で2〜3時間乾燥させます。 血液は通常の方法で、つまり指から年長の子供から採取する必要があります。

次の情報は、血液とともにフォームに明確かつ読みやすく記録されています。産科病院で血液を採取する場合は母親の名前、名前、父称、別の医療機関で血液を採取する場合は子供。 子供の生年月日、採血日、子供の登録の詳細な住所と出発日、電話番号、医療機関のコード、および採血した人の名前。 次に、付随する情報が記録されます：子供の体重、在胎週数、未熟児、子供の輸血、血液透析、母親および/または子供による受容 薬物、特にデキサメタゾン、30mg / dLを超える高ビリルビン血症など。

フォームは、記入する文書であり、採血の正確性とフォームに示されている情報の正確性に責任があります。 血液ブランクは室温で乾燥され、きれいな紙の封筒に詰められ、少なくとも3日に1回、地域の医療遺伝学研究所に送られます。 異常を伴って採取された血液サンプルは、分析に適さないと評価されます。 この場合、2回目の採血を行う必要があります。

分析手順と品質管理の一般原則 実験室研究
この地域で新生児スクリーニングを実施している遺伝医学研究所は、得られた生物学的材料の品質を評価します。 血液の形は分類され、コンピューターベースに登録されます。 直径3mmの5枚のディスクを各血液サンプルからノックアウトし、5枚の別々のマイクロプレートに配置します。 各マイクロプレートで、疾患の生化学的マーカーである1つの分析物が測定されます。 フェニルケトン尿症の場合、マーカーは血中のフェニルアラニンの濃度、先天性甲状腺機能低下症-甲状腺刺激ホルモンのレベル、嚢胞性線維症-免疫反応性トリプシノーゲン、ガラクトース血症-総ガラクトース、副腎生殖器症候群-17-ヒドロキシプロゲステロンです。

試薬キットからのキャリブレーションサンプル、既知の分析物濃度のコントロールマテリアル、および新生児からのテスト血液サンプルは、96ウェルマイクロプレートに配置されます。 次に、キットの指示に従って標準的な分析手順が実行されます。 各プレートの測定結果は、キャリブレーターの蛍光値、検量線、コントロール材料中の分析物の蛍光値と濃度、蛍光との値を含む印刷された形式で表示されます分析された血液サンプル中の分析物の濃度。

対照物質中の測定された分析物濃度の評価により、実験室での品質管理が可能になります。 少なくとも20の測定値を含む一連の設置では、各ラボが独自の平均値と許容誤差を決定します。 すべてのプレートの測定結果が管理図に入力されます。 対照物質の値が2000年2月7日のM3RF No.45の順序で定められた要件を満たしている場合「ロシアの医療機関における臨床検査研究の質を改善するための措置のシステムについてフェデレーション」、タブレットの測定結果は許容できると評価されます。 それ以外の場合、タブレットは再設計されます。

新生児スクリーニング検査室も連邦制度の一部です 外部評価品質。これは、調査の正確性を評価し、システムエラーを特定するために必要な外部の独立した制御として機能します。 これに加えて、このプロファイルのロシア連邦の多くの研究所は、国際的な品質管理、特にCDCの参加者です。

フェニルケトン尿症の新生児スクリーニング
フェニルケトン尿症のスクリーニングは、新生児スクリーニングプログラムの標準であり、その実施から40年以上にわたって、疾患の病因、検査室での診断および治療方法に関する膨大な量の資料が蓄積されてきました。 現在、線維腺腫の濃度を測定する方法は、これまでに使用されてきた阻害性微生物検査からタンデム質量分析まで、さまざまな方法があります。 ロシア連邦では、乾燥血液スポットの線維腺腫のレベルは、マイクロプレート蛍光法によって決定されます。 乾燥血液スポットの線維腺腫の濃度を測定する原理は、線維腺腫とニンヒドリンの蛍光複合体の形成に基づいており、その蛍光強度は、ジペプチドL-ロイシル-b-アラニンとの相互作用によって増強されます。 蛍光は、485nmの波長で多機能アナライザーを使用して測定されます。 蛍光の強さは、血液サンプル中の線維腺腫の量に正比例します。 ソフトウェアは、分析された血液サンプルの蛍光強度をキャリブレーションサンプルの蛍光と比較します。 分析の精度は、対照サンプルの線維腺腫の値によって評価されます。

結果の解釈
基本は、製造業者が推奨する試薬のセット、この地域の新生児の分析物レベルの母集団値、およびロシアの同様の研究所からの情報を考慮して、研究所によって開発された線維腺腫濃度のしきい値です連邦および海外。 この指標を選択するには、カットオフ値に応じて再テストの回数を見積もることが重要です。 生後1か月の新生児および小児の場合、2 mg / dL（120μmol/ L）の線維腺腫レベルがしきい値として最も頻繁に使用され、1か月を超える小児の場合-3 mg / dL（150μmol/ L） 。 最初の線維腺腫の測定値が異常に高い血液サンプルは、同じ血液サンプルを使用した並行分析でさらに分析されます。 並行測定中に線維腺腫レベルがカットオフ値よりも高かったすべての子供は、再検査する必要があります。

子供から2回目の血液サンプルを採取すること（再検査）は、居住地または彼がいる医療機関で行われます。 このため、アミノ酸濃度の上昇の程度に応じて、血液との形態の情報を利用して、家族との接触を確立します。 線維腺腫のレベルの超過がわずかである場合（最大3 mg / dL（181.5μmol/ L））、家族は再検査の必要性を手紙で通知されます。 線維腺腫の有意な増加（3 mg / dL以上）に伴い、家族との緊急連絡が必要です。 再検査の提供に対する地域の管理は、研究所が電話または電子メールで絶えず連絡を取っている市である地区の保健部門の主任小児科医によって行われます。

ほとんどの場合、特に一次隆起がわずかな小児では、再検査分析での線維腺腫のレベルは正常です。 指標の最初の増加は、肝酵素系の未熟さ、分娩過程の特徴、未熟児、重度と関連している可能性があります 一般的なコンディション子供など

再検査で線維腺腫の濃度が3から8mg / dL（150-484μmol/ L）に繰り返し増加した小児は、高フェニルアラニン血症と診断されます。 彼らは、線維腺腫のレベルの定期的な検査室モニタリングと、治療が適切かどうかを決定する遺伝学者による監督を必要としています。 再検査で8mg / dL（484μmol/ L）以上の線維腺腫のレベルが検出された場合、フェニルケトン尿症の診断は確定したと見なされます。これは、この指標が疾患の信頼できる検査基準として機能するためです。 子供を持つ親は遺伝医学の相談に招待されます。 遺伝学者は、乳腺線維腺腫を制限するために子供に適切な治療法を緊急に処方し、両親に食事療法を計算するように教えます。 現代の基準によれば、フェニルケトン尿症の診断を下し、子供の生後1か月以内に治療を開始する必要があります。 その後の治療は、長年にわたって行われ、血液中の線維腺腫のレベルの一定の生化学的制御の下で行われ、これも遺伝医学研究所によって行われています。 治療中の血中アミノ酸の最適濃度は、1〜6 mg / dL（60.5〜363μmol / L）の範囲であると考えられています。

先天性甲状腺機能低下症の新生児スクリーニング
先天性甲状腺機能低下症の病因は異なりますが、甲状腺ホルモン欠乏症はそのすべての形態に特徴的です。 新生児の臨床症状の特異性が低くぼやけているため 早期診断先天性甲状腺機能低下症は、甲状腺ホルモンのレベルの研究に基づいてのみ可能です。 スクリーニングは、甲状腺刺激ホルモンのレベルを決定することに基づいています。甲状腺刺激ホルモンは、病気の原発性形態で増加します。 乾燥血液スポットの甲状腺刺激ホルモンのレベルの測定は、甲状腺刺激ホルモン分子の2つの異なる部位に対する非常に特異的なモノクローナル抗体の「サンドイッチ」を使用して、時間分解能でランタニド免疫蛍光分析の方法によって実行されます。 蛍光レベルは安定しており、その強度はサンプル中の甲状腺刺激ホルモンの量に正比例します。

結果の解釈
スクリーニング中に得られた甲状腺刺激ホルモンの値の解釈は、製造業者が推奨する一連の試薬と、その地域の新生児の甲状腺刺激ホルモンのレベルに関する人口データを考慮して行われます。 子供の人生の4〜7日目に行われた分析の場合、カットオフは14μIU/ mlであり、14日以上の子供は-5μIU/ mlです。 甲状腺機能低下症を疑うための閾値として 高度確率では、80μIU/ mlの値が使​​用されます。 この値を超える甲状腺刺激ホルモンレベルを持つすべての子供は、再検査、つまり緊急の再検査の対象となります。 そのような子供たちの再採取された血液は、採取後48時間以内に検査室に届けられなければなりません。 甲状腺刺激ホルモンレベルの上昇が再検出された子供は、内分泌代謝科医に紹介され、診断（先天性または一過性甲状腺機能低下症）を確認し、治療を処方します。

ガラクトース血症の新生児スクリーニング
現在、ガラクトース血症のスクリーニングスキームとして、さまざまなアルゴリズム（一緒にまたは別々に）が使用されています：ガラクトースおよびガラクトース-1-リン酸の濃度の測定、ガラクトース-1-ホスファチュリジルトランスフェラーゼの酵素活性の分析。

血中のガラクトース濃度を診断基準として使用すると、ガラクトース-1-ホスファチュリジルトランスフェラーゼの欠陥と同時に、ガラクトキナーゼおよびウリジルジホスホガラクトース-4-エピメラーゼの欠陥を特定することができます。これは、これらの分析物の濃度が増加するためです。 3つのケースすべてで。 ただし、食事制限が課せられているため、この指標は有益ではありません。

ガラクトース-1-ホスファチュリジルトランスフェラーゼの酵素活性の分析の利点は、食事の性質および検査前に導入された食事制限（ある場合）からの独立性です。 ただし、以前に輸血を行った場合は、偽陰性の結果が得られることがあります。 他方、材料を入手、輸送、および保管するための条件（温度、湿度）は、熱不安定性酵素の活性の低下、すなわち偽陽性の結果につながる可能性がある。

いくつかの外国の新生児スクリーニングプログラムでは、分子遺伝学的手法を使用して、ガラクトース-1-ホスファチリジルトランスフェラーゼ遺伝子の最も頻繁な変異を検索します。 この検索は、調査と並行して実行されます 生化学的パラメータまたは同じフォームからの血液検査の後続のステップとして。 DNA分析を使用すると、スクリーニングを最適化できます。つまり、偽陽性の結果の数を減らしたり、古典的な形式を区別したりできます。ただし、限られた数の変異を特定できる可能性があるため、病気。 ガラクトースレベルは、すべての形態のガラクトース血症で上昇します。 そのため、この基準は主要な生化学的指標として使用されます。

乾燥血液スポット中の総ガラクトースの測定は、マイクロプレート蛍光法によって行われます。 使用されるガラクトースオキシダーゼ法は、総ガラクトースの濃度、すなわち、遊離ガラクトースとガラクトース-1-リン酸の濃度の合計を定量的に決定することを可能にする。 分析物測定の精度は、ラボ内の品質管理を実行して、コントロール材料中の濃度を決定することによって評価されます。

結果の解釈
スクリーニング中に得られた総ガラクトースの値の解釈は、製造業者が推奨する試薬のセット、地域の人口データ、および利用可能なものに基づいて開発されたカットオフを考慮して実行されます経験。 ロシア連邦のほとんどの研究所における新生児の総ガラクトースの閾値濃度として、試験システムの製造業者が推奨する7 mg / dL（385μmol/ L）の値が採用されています。 血液サンプルが7mg / dLを超える子供は再検査する必要があります。

子供から2番目の血液サンプルを取得する緊急性（再テスト）は、総ガラクトースの増加の程度によって異なります。 ガラクトース血症の古典的な形態は、新生児期の急性の重篤な症状、生命を脅かすもの、総ガラクトース値が15 mg / dL（825μmol/ L）を超えることを特徴とするため、家族と緊急に連絡する必要があります。子供の状態に関する情報を入手し、再検査を受けるための地域の主任小児科医。 再検査でこの指標のレベルの上昇が確認された場合、および子供の健康状態に基づいて、新生児科医または小児科医は、診断の検査室検証の結果を待たずに、子供をガラクトースを含まない食事に緊急に移すことを決定する場合があります。

血中のガラクトース濃度の上昇は必要ですが、ガラクトース血症の診断には不十分な基準です。 分析物濃度のわずかな増加は、Duarteフォームの特徴です。 さらに、出産の過程の特殊性、子供の一般的な状態の困難さ、不十分な肝機能、染色体異常は、血中のガラクトースのレベルの増加につながります。

ガラクトース血症の形態を明らかにするには、必須の追加検査が必要です。ガラクトース-1-ホスファチリジルトランスフェラーゼの酵素活性の研究と、ガラクトース-1-ホスファチリジルトランスフェラーゼ遺伝子の変異またはその配列決定の分析です。 DNA分析はあなたが調査することを可能にするので 数量限定変異、ガラクトース-1-ホスファチュリジルトランスフェラーゼの不十分な酵素活性の検出は重要な診断基準です。 診断が確定した場合、子供は緊急にガラクトースを含まない食事と家族の遺伝医学カウンセリングを処方されます。 さらなる治療子供は血中のガラクトースの測定の制御下で実行されます。

粘液嚢胞性線維症の総スクリーニング
嚢胞性線維症の新生児スクリーニングには多くのスキームがあり、その最初の段階は免疫反応性トリプシノーゲンのレベルを決定することです。 トリプシノーゲンは膵臓分泌の主な産物の1つであり、膵臓によってのみ生成される唯一の酵素であるため、膵臓機能の特定のマーカーです。 嚢胞性線維症では、血中の免疫反応性トリプシノーゲンのレベルの増加が子供の生後2か月で観察されます。 さらに、免疫反応性トリプシノーゲンのレベルは減少し、平均母集団値に達します。

免疫反応性トリプシノーゲンのレベルを測定することによって得られた結果は、さまざまな組み合わせでの汗試験および/またはDNA分析でさらに補足されます。
ИРТ->汗試験-> DNA分析;
ИРТ-> DNA分析->汗試験;
ИРТ1->ИРТ2->汗試験-> DNA分析。

後者のスキームは、ロシアで一般的に受け入れられています。 乾燥血液スポット中の免疫反応性トリプシノーゲンのレベルの測定は、免疫反応性トリプシノーゲン分子の2つの異なる部位に対する非常に特異的なモノクローナル抗体の「サンドイッチ」を使用して、時間分解能でランタニド免疫蛍光分析の方法によって実行されます。 蛍光は安定しており、その強度はサンプル中の免疫反応性トリプシノーゲンの量に正比例します。

結果の解釈
スクリーニング中に得られた免疫反応性トリプシノーゲンの値の解釈は、カットオフ、製造業者およびロシアの嚢胞性線維症センターが推奨する試薬のセットを考慮して実行されます。 21日未満の子供については、70 ng / mlまでの免疫反応性トリプシノーゲンの値は正常と見なされます。 年長の子供たちの場合、カットオフは40 ng / mlです。

免疫反応性トリプシノーゲンは病気の特定のマーカーではありません;その主要な価値によって診断することは不可能です。 そのため、免疫反応性トリプシノーゲンのレベルが上昇しているすべての子供を再検査する必要があります。 嚢胞性線維症の繰り返し検査（再検査を受ける）の場合、21日から2か月の寿命という厳密に制限された期間があります。 後年に採取された血液は、検査の情報量が不足しているため、研究には適していません。 診断は取り消されるか、他の手段で確認する必要があります。 免疫反応性トリプシノーゲンのレベルの増加は、分娩の過程の特異性に起因する可能性があります-長い無水期間、急速な分娩、および分娩の特異性 産後の期間-新生児ストレス、呼吸窮迫症候群、低血糖症、 先天性感染症、腸閉鎖症、重症先天性および染色体異常など。

汗試験とDNA分析
再検査で免疫反応性トリプシノーゲンの増加が検出された子供、および年齢によって免疫反応性トリプシノーゲンの再検査を受けていない子供は、スクリーニングの第2段階である汗試験が必要です。 汗試験（汗液中の塩素濃度を測定する）は、嚢胞性線維症の主な病理学的診断基準です。 ギブソンアンドクック法による滴定による汗中の塩素濃度の測定は、依然として古典的ですが、汗試験を実施するための時間と労力を要する方法です。 現在、研究は、塩素濃度に相当する汗の電気伝導率を測定する装置を使用して実施されています。 汗の収集は、ピロカルピン電気泳動の収集場所で予備保持しながら、子供の前腕で行われます。 試薬の製造元が推奨する塩素濃度の通常の範囲は、0〜60ミリモル/ Lの汗です。 61〜80ミリモル/ Lの値は疑わしいと見なされ、時間の経過とともに再チェック、繰り返し、および臨床観察が必要になります。 80ミリモル/ Lを超える塩素濃度は嚢胞性線維症に関連しています。

免疫反応性トリプシノーゲンの測定と並行して、頻繁な変異、特にdelF508およびその他の次の頻度の分析が実行されます。これは、次の重要な診断基準として機能します。 この病気新生児スクリーニングを最適化します。 しかし、遺伝子内の既知の突然変異の数が多いため、頻繁な突然変異の研究では、診断を確認または拒否できるとは限りません。 そのため、診断は常に汗の内訳によって確認する必要があります。 診断が確定した子供は、治療と診療観察のために地域センターに送られます。 遺伝学者は家族に遺伝医学カウンセリングを提供します。

副腎生殖器症候群の新生児スクリーニング
副腎生殖器症候群の新生児スクリーニングの最初のステップは、コルチゾールの前駆体である17-ヒドロキシプロゲステロンのレベルを測定することです。 17-ヒドロキシプロゲステロンのレベルは、21-ヒドロキシラーゼまたは11-b-ヒドロキシラーゼの欠乏によって引き起こされる両方の形態の副腎生殖器症候群で増加し、これにより、副腎生殖器症候群の子供の95％以上を検出することが可能になります。 副腎生殖器症候群の他の形態では、17-ヒドロキシプロゲステロンのレベルは変化しませんが、これらの形態の頻度は低いです。 乾燥血液スポット中の17-ヒドロキシプロゲステロンのレベルの決定は、時間分解能を備えたランタニド免疫蛍光分析の方法によって実行されます。 この検査は、17-ヒドロキシプロゲステロンに特異的なモノクローナル抗体との結合部位について、新生児の血液中のユーロピウムで標識された17-ヒドロキシプロゲステロンと17-ヒドロキシプロゲステロンの競合に基づいています。 蛍光は安定しており、その強度はサンプル中の17-ヒドロキシプロゲステロンの量に反比例します。

結果の解釈
17-ヒドロキシプロゲステロンの得られた値の解釈は、製造業者およびESCRAMSの州立研究所の小児内分泌学研究所によって推奨された試薬のセットを考慮して実行されます。 在胎週数が37週を超え、体重が2000 gを超える満期産児の場合​​、血中のカットオフ17-ヒドロキシプロゲステロンは30 nmol / Lです。 閾値として、高い確率で副腎性器症候群を疑うことができるように、90 nmol / Lの値が使用されます。

在胎週数33〜36週、体重2000 g未満の未熟児の場合、17-ヒドロキシプロゲステロンの閾値レベルは60 nmol / Lです。 未熟児が深い（在胎週数-23-32週）場合、17-ヒドロキシプロゲステロンのレベルが150 nmol / Lを超えると、結果は陽性と見なされます。

未熟児に加えて、静脈内輸血を背景に、高ビリルビン血症（30 mg / dL以上）を伴う重度の全身状態の子供で偽陽性の結果が得られる可能性があります。 デキサメタゾンを服用している子供（または母親が薬を服用している場合）は、偽陰性の結果をもたらす可能性があります。 再検査で17-ヒドロキシプロゲステロンのレベルが繰り返し上昇する子供は、診断を確認し、治療を処方するために小児内分泌専門医に紹介されます。 副腎生殖器症候群と診断されたすべての子供、その両親および家族は、分子遺伝学的検査および医学的遺伝カウンセリングを必要とします。

結論として、最新のアルゴリズムを使用したスクリーニングプログラムと 実験方法客観的に原因であるこの病気の患者の100％を検出しません 様々な形態病気、不十分な感度と使用される方法の特異性、組織の欠陥、人的要因など。そのため、病気の臨床的疑いがある場合は、患者を完全に再検査する必要があります。