طريقة البحث الثقافي (البكتريولوجي) - مجموعة من الأساليب التي تهدف إلى عزل والتعرف على الثقافات النقية للكائنات الحية الدقيقة (البكتيريا) عن طريق الزراعة على وسط المغذيات.
الثقافة النقية هي مجموعة من الكائنات الحية الدقيقة من نفس النوع. في أغلب الأحيان ، يتم الحصول على مزرعة نقية عن طريق اختيار وزراعة مستعمرة معزولة (نسل خلية جرثومية واحدة).
خطوات الطريقة:
1. مجموعة من المواد للبحث.
2. عزل الثقافة النقية وتحديدها.
3 - الخلاصة.
مجموعة من المواد للبحث.يعتمد نوع المادة المدروسة على الغرض من الدراسة (التشخيص - من المريض ؛ التحليل الوبائي - من البيئة والغذاء والمريض و (أو) حامل البكتيريا).
عزل الثقافة النقية. تشمل 3 أو 4 مراحل:
1. زرع المادة (بعد الفحص المجهري الأولي) على كوب به وسط مغذي كثيف (يفضل التشخيص التفاضلي أو الانتقائي) من أجل الحصول على مستعمرات معزولة. يتم إنتاجه في أغلب الأحيان بطريقة الفصل الميكانيكي. في بعض الحالات (على سبيل المثال ، الدم) ، يتم زرع البذور مسبقًا في وسط إثراء سائل ، متبوعًا بثقافة فرعية على طبق بوسط أجار. في بعض الأحيان يتم إجراء معالجة انتقائية للمادة قبل التلقيح (مع مراعاة خصائص الكائن الدقيق المعزول ؛ على سبيل المثال ، المعالجة بالحمض أو القلوي لعزل البكتيريا المقاومة). يزرع عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 18-24 ساعة. وقت زراعة ل أنواع مختلفةيمكن أن تتقلب البكتيريا.
2 (3): أ) دراسة المستعمرات على طبق أجار (السمات الثقافية) ، واختيار أكثرها نموذجية ؛ ب) تحضير مسحات من هذه الطوائف بالتلوين (حسب الجرام أو بطرق أخرى) ؛ أ) غربلة بقية المستعمرة المدروسة على وسط التراكم والنمو في منظم الحرارة عند درجة الحرارة المثلى.
3 (4). دراسة نقاء الثقافة المتحصل عليها على وسط التراكم. مع هذا
الغرض هو تحضير مسحة ، وصمة عار (عادة حسب الجرام) ، دراسة مجهري
التجانس المورفولوجي والصوري (في مجالات الرؤية المختلفة).
4 (5). تحديد الثقافة النقية.
استنتاج.وفقًا لمجموع الميزات مقارنةً بخصائص السلالات المرجعية (النموذجية) ، يُشار إلى نوع الكائن الدقيق المعزول من المادة.
تقييم الطريقة:
مزايا:حساسية ودقة عالية نسبيًا ، والقدرة على تحديد عدد الميكروبات في مادة الاختبار ، وكذلك الحساسية للمضادات الحيوية ؛ محددات:المدة النسبية ، الطريقة مكلفة.
21. الوسائط الغذائية للأيروبس واللاهوائية. متطلبات وسائط المغذيات ، التصنيف.
متطلبات:
يجب أن تكون الوسائط مغذية
يجب أن يكون لديك درجة حموضة معينة
يجب أن يكون متساوي التوتر ، أي يجب أن يكون الضغط الاسموزي في الوسط هو نفسه الموجود في الخلية.
يجب أن يكون رطبًا وليس سائلًا جدًا
يجب أن يكون له بعض الاحتمالية الأكسدة والاختزال
يجب أن تكون معقمة
يجب أن تكون موحدة ، أي تحتوي على كميات ثابتة من المكونات الفردية.
يمكن تقسيم الوسائط الغذائية:
أ) الأصل
1) طبيعي - طعام طبيعي (لحم ، لبن ، بطاطس) ؛
2) اصطناعي - مُعد خصيصًا لنمو الميكروبات: - وسائط من المنتجات الطبيعية (ماء اللحم ، مرق ببتون اللحم (MPB) ، أجار ببتون اللحم (MPA) ، - لا يحتوي على تركيبة ثابتة ؛ - وسائط مغذية اصطناعية - حلول بدقة كميات محددة من الأملاح والأحماض الأمينية والقواعد النيتروجينية والفيتامينات الموجودة في الماء المقطر - لها تركيبة ثابتة ، وتستخدم في زراعة الكائنات الحية الدقيقة ومزارع الخلايا في إنتاج اللقاحات والأمصال المناعية والمضادات الحيوية ؛
ب) عن طريق التعيين:
1) الأغراض العامة (MPB ، MPA) - تنمو عليها معظم الميكروبات ؛
2) اختياري - يعزز بشكل انتقائي نمو نوع واحد من الميكروبات من خليط (على سبيل المثال ، أجار صفار الملح للمكورات العنقودية) ؛
3) التشخيص التفريقي - السماح بتمييز نوع واحد من الميكروبات عن طريق مظهر البيئة عن الأنواع الأخرى (على سبيل المثال ، Endo و Levin media لمجموعة الميكروبات المعوية).
بالإضافة إلى ذلك ، اعتمادًا على أغراض الاستخدامفي مخطط عزل الثقافات النقية ، يمكن تمييز الوسائط التالية حسب الغرض:
1) الإثراء - يمنع نمو الميكروبات المرتبطة بالعامل الممرض ؛
2) للحصول على مستعمرات منعزلة ؛
3) تراكم الثقافة النقية ؛
ب) الاتساق:
1) سائل
2) شبه سائل (مع إضافة أجار أجار بتركيز 0.5-0.7٪) ؛
3) كثيفة - فوق 1٪.
الطريقة البكتريولوجيةيتكون من عزل مزرعة نقية للممرض (مجموعة تحتوي على بكتيريا من نفس النوع) وتحديد هذا العامل الممرض هو الطريقة الرئيسية للبحث البكتيري
تسمى دراسة خصائص الكائنات الحية الدقيقة في المختبر البكتيري من أجل إثبات الانتماء إلى مجموعة منهجية معينة (الأنواع والجنس) تحديدها.
بشكل عام ، فإن طريقة البحث البكتريولوجية عبارة عن دراسة بكتريولوجية متعددة المراحل ، وتستمر من 18 إلى 24 ساعة.
الطريقة البكتريولوجية - كيف يتم تنفيذها؟
في الطريقة البكتريولوجية ، توضع الثقافات اللاهوائية في اللاهوائية. يتم إخراج الهواء من البالون واستبداله بخليط غازي لا يحتوي على أكسجين.
أساس الطريقة البكتريولوجية هو عزل ثقافة نقية من العامل الممرض ، والتي تحدث في المرحلة الأولى من الدراسة. لعزل مزرعة نقية للممرض ، يتم تلقيح المادة المأخوذة. يتم البذر ، كقاعدة عامة ، على وسائط مغذية كثيفة ، يتم اختيارها بناءً على خصائص العامل الممرض المزعوم.
في الطريقة البكتريولوجية ، إذا أمكن ، يتم استخدام الوسائط التي ينمو عليها نوع معين فقط من البكتيريا - الوسائط الاختيارية ، أو الوسائط التي تجعل من الممكن تمييز العامل الممرض المزعوم عن الكائنات الحية الدقيقة الأخرى ، أو وسائط التشخيص التفاضلية.
على سبيل المثال ، في التشخيص البكتريولوجي الالتهابات المعوية- وسط إندو ، تُستخدم وسائط التيلوريت لعزل عصيات الخناق ، وما إلى ذلك. عندما يتم عزل الكائنات الحية الدقيقة الانتهازية بالطريقة البكتريولوجية ، يتم زرع المادة المأخوذة على وسائط مغذية عالمية. مثال على هذه الوسيلة هو أجار الدم.
تتم جميع عمليات التلاعب المرتبطة بعزل الثقافات البكتيرية فوق لهب الموقد.
باستخدام الطريقة البكتريولوجية ، يتم تلقيح المواد على وسط المغذيات إما بملعقة زجاجية أو معدنية ، أو بحلقة بكتيرية بطريقة تنتشر فيها البكتيريا الموجودة في مادة الاختبار على سطح وسط المغذيات. نتيجة لهذا التشتت ، تدخل كل خلية بكتيرية الجزء الخاص بها من البيئة.
عند عزل مزرعة نقية لممرض من مادة مرضية ملوثة بشكل كبير بالنباتات الدقيقة الأجنبية ، غالبًا ما يتم استخدام طريقة بيولوجية لعزل مزرعة نقية. يتم ذلك على النحو التالي: يصيبون حيوانات المختبر الحساسة لمسببات الأمراض بمواد الاختبار. مثال آخر الطريقة البيولوجية- عند فحص المريض لمحتوى المكورات الرئوية في البلغم ، يتم إعطاء المادة داخل الصفاق للفئران البيضاء. يتم الحصول على مزرعة نقية من المكورات الرئوية من دمائهم بعد 4-6 ساعات.
في حالة أنه نتيجة لطريقة البحث البكتريولوجية ، من المتوقع وجود محتوى كمية صغيرة من العامل الممرض في مادة الاختبار ، يتم إجراء التلقيح على وسط مغذي سائل لتراكمه ، ما يسمى بالتخصيب الوسط ، وهو الأمثل لهذه الكائنات الحية الدقيقة. بعد ذلك ، تتم إعادة البذر من وسط المغذيات السائلة إلى الوسائط الصلبة التي تُسكب في أطباق بتري. يتم وضع الوسيط المُلقح بالعامل الممرض في منظم حرارة ، عادةً عند درجة حرارة معينة ، وهو أمر مهم بالنسبة للطريقة البكتريولوجية.
في المرحلة الثانية من طريقة البحث البكتريولوجية ، يتم إجراء دراسة المستعمرات البكتيرية التي تنمو على وسط مغذي كثيف وتنشأ من خلية بكتيرية واحدة. (مستعمرة ومستنبت نقي للممرض). يتم إجراء الفحص المجهري والعياني للمستعمرات بالضوء المنعكس والمنقول: بالعين المجردة ، تحت مجهر منخفض التكبير ، باستخدام عدسة مكبرة.
تمت ملاحظة الخصائص الثقافية للمستعمرات: شكلها وحجمها ولونها وطبيعة الحواف والسطح والبنية والاتساق. علاوة على ذلك ، يتم استخدام جزء من كل خلية مستهدفة لتحضير المسحات. تلطخ مسحات الجرام ، مجهريًا ، لتحديد الخصائص الصرفية (بالنسبة للون) والخصائص المورفولوجية للثقافة المعزولة والتحقق في نفس الوقت من نقاوتها.
يتم تلقيح بقية المستعمرة في أنابيب اختبار مع الوسيط الأمثل لهذا النوع ، على سبيل المثال ، أجار مائل ، من أجل تجميع ثقافة نقية من أجل دراسة أكثر اكتمالاً. يتم تحريك الأنابيب لمدة 18-24 ساعة في منظم حرارة. في المرحلة الثانية ، بالإضافة إلى الدراسات المذكورة أعلاه ، غالبًا ما يتم حساب عدد المستعمرات المزروعة.
هذا له أهمية خاصة في الأمراض التي تسببها مسببات الأمراض الانتهازية. في مثل هذه الأمراض ، يجوز الحكم على الدور الرائد لأي عامل ممرض فقط من خلال محتواه في المادة المرضية بكميات كافية. بأعداد كبيرةوهيمنة هذا العامل الممرض على النباتات الأخرى.
من أجل إجراء مثل هذه الدراسة ، يتم تحضير التخفيفات المتتالية لمواد الاختبار المأخوذة ، والتي يتم من خلالها إجراء البذر على أكواب ذات وسط مغذي ، ويتم حساب عدد المستعمرات المزروعة ، مضروبًا في التخفيف ، والذي منه محتوى الكائنات الحية الدقيقة في المواد.
يعتبر تحديد الثقافة النقية المعزولة للممرض وتحديد الحساسية للمضادات الحيوية وأدوية العلاج الكيميائي الأخرى لهذه الثقافة هي المرحلة الثالثة من الطريقة البكتريولوجية. يتم التعرف على الثقافة البكتيرية المعزولة من خلال الخصائص الصخرية ، المورفولوجية ، البيوكيميائية ، الثقافية ، السمية ، المستضدية.
تتمثل الخطوة الأولى في أخذ مسحة من الثقافة المزروعة على منحدر أجار ، وفحص مورفولوجيا البكتيريا والتحقق من نقاء ثقافة البكتيريا المزروعة. بعد ذلك ، يتم تلقيح الثقافة النقية المعزولة للبكتيريا على وسط Hiss. من المستحسن التطعيم على وسائط أخرى لتحديد الخصائص البيوكيميائية.
تعود الخصائص الأنزيمية أو الكيميائية الحيوية للبكتيريا إلى الإنزيمات التي تشارك في تكسير البروتينات والكربوهيدرات ، مما يتسبب في تقليل وأكسدة الركائز المختلفة.
علاوة على ذلك ، ينتج كل نوع من البكتيريا مجموعة ثابتة من الإنزيمات لها. في أغلب الأحيان ، عند دراسة خصائص المستضد ، يتم استخدام تفاعل تراص على الزجاج.
يتم تحديد تكوين الميكروبات للسموم باستخدام تفاعل تحييد السموم مع مضادات السموم في الجسم الحي أو في المختبر. في بعض الحالات ، يتم أيضًا دراسة عوامل الفوعة الأخرى. تسمح لنا الدراسات المذكورة أعلاه ، والتي يتم إجراؤها في المختبر البكتيري ، بتحديد جنس أو نوع العامل الممرض.
بما في ذلك الكشف عن مصدر العدوى ، من أجل تحديد السلسلة الوبائية للمرض ، يتم إجراء تحديد غير محدد للبكتيريا. جوهر تحديد البكتيريا داخل النوع هو تحديد phagovar أو phagotype ، الدراسة خصائص مختلفةالبكتيريا المستضدية المعزولة. تسمى عملية تحديد نوع الملتهمة بكتابة الملتهمة. يتم إجراء كتابة الملتهمة في حالة حمى التيفوئيد ، عدوى المكورات العنقودية، نظيرة ب.
على كوب يحتوي على وسط غذائي ، والذي يتم زرعه بملعقة مستنبتة نقية معزولة ، قم بتطبيق لاقمات تشخيصية مختلفة قطرة تلو الأخرى. إذا كانت المزرعة حساسة لهذه العاثية ، نتيجة للفحص البكتيريولوجي ، يتم ملاحظة ما يسمى بالمستعمرات السلبية (اللويحات) ، والتي تبدو مثل تكوينات مناطق مستديرة من البكتيريا المدمرة. قد تكون ثقافة العامل الممرض حساسة للعديد أو لاقمات واحدة.
بسبب الانتشار الواسع لأشكال البكتيريا المقاومة للأدوية ، لتعيين علاج كيميائي عقلاني ، من الضروري تحديد المضاد الحيوي - المقاومة أو الحساسية لعقاقير العلاج الكيميائي للثقافة النقية المعزولة للممرض. بالنسبة للمضاد الحيوي ، يتم استخدام طريقة القرص الورقي أو طريقة التخفيف التسلسلي الأكثر دقة ولكنها مرهقة.
تعتمد طريقة القرص الورقي على تحديد منطقة تثبيط نمو البكتيريا حول الأقراص المشبعة بالمضادات الحيوية. في حالة استخدام طريقة التخفيف المتسلسل ، يتم تخفيف المستحضر الكيميائي - مضاد حيوي بوسط مغذي سائل في أنابيب الاختبار ، وبعد ذلك يتم تلقيح نفس العدد من البكتيريا في أنابيب الاختبار. من خلال غياب أو وجود نمو جرثومي ، يتم تسجيل النتائج. نتيجة لطريقة البحث البكتريولوجي لتحديد هوية السلالات ، يمكن أن يخدم المضاد الحيوي الناتج أيضًا أغراضًا وبائية.
يمكن إجراء دراسات متكررة عند اكتشاف الناقل الجرثومي ، لأنه من الممكن عدم اكتشاف العامل الممرض في جزء واحد من المادة.
حاليا في العالم الحديثهناك طرق متسارعة لتحديد نوع وجنس البكتيريا. لذلك ، في روسيا يستخدمون نظام أوراق المؤشر - NIB ، والذي يسمح بعد 6-12 ساعة ودون استخدام عدد كبيروسائط الثقافة لعزل ثقافة بكتيرية نقية. تستخدم طريقة الفلورسنت المناعي أيضًا على نطاق واسع للتشخيص السريع للأمراض المعدية (انظر الدراسات المصلية).
طريقة البحث البكتريولوجي (BLMI)- طريقة تعتمد على عزل الثقافات النقية للبكتيريا عن طريق الزراعة على الوسائط المغذية وتعريفها على الأنواع بناءً على دراسة الخصائص المورفولوجية والثقافية والكيميائية الحيوية والوراثية والمصلية والبيولوجية والبيئية للكائنات الحية الدقيقة.
يتم التشخيص البكتريولوجي للعدوى باستخدام مخططات التشخيص القياسية المعتمدة من قبل وزارة الصحة.
ثقافه نقية -بكتيريا من نفس النوع ، نمت على وسط غذائي ، خصائصها قيد الدراسة.
التواء- ثقافة نقية محددة لكائنات دقيقة من نفس النوع ، معزولة عن مصدر معين في وقت محدد. قد تختلف سلالات من نفس النوع بشكل ضئيل في الخصائص الكيميائية الحيوية والجينية والمصلية والبيولوجية وغيرها ، وكذلك في مكان ووقت العزلة.
أهداف BLMI:
1. التشخيص المسببات: عزل الثقافة النقية للكائنات الحية الدقيقة وتحديدها.
2. التعريف خصائص إضافية، على سبيل المثال ، حساسية الكائن الدقيق للمضادات الحيوية والعاثيات.
3. تحديد عدد الكائنات الحية الدقيقة (مهم في تشخيص العدوى التي تسببها UPM).
4. كتابة الكائنات الدقيقة ، أي تحديد الفروق غير المحددة بناءً على الدراسة وراثيو وبائي(fagovars و serovars) علامات.يستخدم هذا للأغراض الوبائية ، لأنه يسمح لك بإثبات قواسم مشتركة للكائنات الحية الدقيقة المعزولة عن مرضى مختلفين ومن كائنات مختلفة من البيئة الخارجية ، في مستشفيات مختلفة ، ومناطق جغرافية.
يتضمن BLMI عدة مراحل ،تختلف عن التمارين الهوائية واللاهوائية الاختيارية واللاهوائية.
I. مراحل BLMI في عزلة ثقافة نقية من الأيروبس واللاهوائية الاختيارية.
المسرح.
أ. جمع المواد ونقلها وتخزينها ومعالجتها مسبقًا.في بعض الأحيان ، قبل البذر ، يتم إجراء معالجة انتقائية للمواد ، مع مراعاة خصائص الكائنات الحية الدقيقة المعزولة. على سبيل المثال ، قبل فحص البلغم أو أي مادة أخرى لوجود المتفطرة السلية المقاومة للأحماض ، تتم معالجة المادة بمحلول حمضي أو قلوي.
ب - البذر في وسط التخصيب(إذا لزم الأمر) يتم إجراؤه إذا كانت مادة الاختبار تحتوي على كمية صغيرة من البكتيريا ، على سبيل المثال ، عند عزل مزرعة دم. للقيام بذلك ، يتم تلقيح الدم المأخوذ في ذروة الحمى بكميات كبيرة (8-10 مل في البالغين ، 4-5 مل في الأطفال) في الوسط بنسبة 1:10 (للتغلب على تأثير مبيد الجراثيم في الدم عوامل)؛ يتم تحضين البذر عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 18-24 ساعة.
ب. الفحص المجهري لمادة الاختبار.يتم تحضير مسحة من مادة الاختبار ، ملطخة بجرام أو طريقة أخرى ويتم فحصها تحت المجهر. تقييم البكتيريا الحالية وكميتها. في سياق البحث الإضافي ، يجب عزل الكائنات الحية الدقيقة الموجودة في اللطاخة الأولية.
ز- البذر في وسط المغذيات من أجل الحصول على مستعمرات منعزلة.يتم تلقيح المادة بحلقة أو ملعقة عن طريق الفصل الميكانيكي على لوحة ذات وسط تشخيصي أو انتقائي تفاضلي من أجل الحصول على مستعمرات معزولة. بعد البذر ، ينقلب الطبق رأسًا على عقب (لتجنب تلطيخ المستعمرات بقطرات من سائل التكثيف) ، ويوقع ويوضع في ترموستات عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 18-24 ساعة.
يجب أن نتذكر أنه عند زرع وإعادة زرع الثقافات الميكروبية ، ينبغي لفت انتباه العامل إلى الامتثال لقواعد التعقيم لمنع تلوث وسائط المغذيات ومنع إصابة الآخرين والعدوى الذاتية!
في حالة العدوى التي تسببها الكائنات الحية الدقيقة الانتهازية ، حيث يكون عدد الكائنات الحية الدقيقة الموجودة في المواد المرضية ، يتم إجراء تلقيح كمي للمادة ، حيث يتم تحضير سلسلة من التخفيفات 100 ضعف للمادة (عادة 3 تخفيفات) في محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر في أنابيب الاختبار. بعد ذلك ، يتم زرع 50 ميكرولتر من كل تخفيف على وسائط المغذيات في أطباق بتري.
المسرح.
أ. دراسة الأشكال الشكلية للمستعمرة على الوسائط وفحصها المجهري.إنهم ينظرون من خلال الأطباق ويلاحظون الوسيط الغذائي الأمثل ، ومعدل النمو ، وطبيعة نمو الكائنات الحية الدقيقة. اختر الدراسة مستعمرات معزولة تقع على طول السكتة الدماغية ، أقرب إلى المركز.إذا نمت عدة أنواع من المستعمرات ، فسيتم فحص كل منها على حدة. قيم علامات المستعمرات (الجدول 7). إذا لزم الأمر ، يتم عرض الأطباق ذات المحاصيل من خلال عدسة مكبرة أو باستخدام مجهر مع عدسة تكبير منخفضة وفتحة ضيقة. يقومون بدراسة الخصائص الحركية للأنماط الشكلية المختلفة للمستعمرات ؛ ولهذا الغرض ، تم إعداد جزء من المستعمرة قيد الدراسة. مسحة،ملطخة بالجرام أو طرق أخرى ، مجهريًا وتحديد مورفولوجيا نقاء الثقافة. إذا لزم الأمر ، ضع ارشادية على الزجاجمع الأمصال متعددة التكافؤ.
ب ـ تراكم الثقافة النقية.لتجميع ثقافة نقية ، تتم زراعة المستعمرات المعزولة من جميع الأنواع المورفولوجية في أنابيب اختبار منفصلة مع أجار مائل أو بعض وسط المغذيات الأخرى ويتم تحضينها في منظم حرارة عند +37 درجة مئوية (درجة الحرارة هذه مثالية لمعظم الكائنات الحية الدقيقة ، ولكن يمكن أن تكون مختلفة ، على سبيل المثال ، ل العطيفة النيابة.- +42 0 ج ، المبيضات النيابة. و يرسينيا بيستيس - +25 0 درجة مئوية).
عادة ما يتم استخدام وسط كليجلر كوسيط تراكم لبكتيريا الأمعاء.
تكوين وسيط كليجلر: MPA ، 0.1٪ جلوكوز ، 1٪ لاكتوز ، كاشف كبريتيد الهيدروجين (كبريتات الحديد + ثيوسلفات الصوديوم + كبريتيت الصوديوم) ، مؤشر أحمر الفينول. اللون الأولي للوسط أحمر توت العليق ، والوسط "مائل" في أنابيب الاختبار: له عمود (2/3) وسطح مائل (1/3).
يتم البذر في وسط Kligler بضربة على السطح وحقن في عمود.
المسرح.
أ. محاسبة النمو على وسيط التراكم ، وتقييم نقاء الثقافةفي مسحة غرام. أنماط النموثقافة نقية معزولة. تتميز الثقافة النظيفة بصريًا بنمو موحد. في الفحص المجهريتم العثور على مسحة ملطخة محضرة من مثل هذه الثقافة ، وخلايا متجانسة شكليًا وصغيرًا في مجالات نظر مختلفة. ومع ذلك ، في حالة تعدد الأشكال المتأصل في بعض أنواع البكتيريا ، قد تحدث الخلايا ذات التشكل المختلف في وقت واحد في مسحات من ثقافة نقية.
إذا تم استخدام وسيط مؤشر Kligler كوسيط تراكم ، فسيتم تقييم تغيرات لونه في العمود والجزء المشطوف ، وفقًا لذلك يتم تحديد الخصائص الكيميائية الحيوية: تخمر الجلوكوز واللاكتوز وإنتاج كبريتيد الهيدروجين. عندما يتحلل اللاكتوز ، يتحول لون الجزء المنحدر من الوسط إلى اللون الأصفر ؛ وعندما يتحلل الجلوكوز ، يتحول العمود إلى اللون الأصفر. مع تكوين ثاني أكسيد الكربون أثناء تحلل السكريات ، تتشكل فقاعات غاز أو كسر في العمود. في حالة إنتاج كبريتيد الهيدروجين ، يلاحظ اسوداد على طول الحقن بسبب تحويل كبريتيد الحديدوز إلى كبريتيد الحديدوز.
تفسر طبيعة التغيير في لون وسط Kligler (الشكل 23) من خلال الكثافة غير المتكافئة لتفكك المواد النيتروجينية بواسطة الكائنات الحية الدقيقة وتكوين المنتجات القلوية تحت الهوائية (على سطح مائل) واللاهوائية (في a العمود) الشروط.
في ظل الظروف الهوائية ، يحدث تكوين قلوي أكثر كثافة على سطح مائل منه في عمود متوسط. لذلك ، أثناء تحلل الجلوكوز الموجود في الوسط بكمية صغيرة ، يتم تحييد الحمض المتكون على السطح المائل بسرعة. في الوقت نفسه ، أثناء تحلل اللاكتوز ، الموجود في وسط بتركيز عالٍ ، لا تستطيع المنتجات القلوية تحييد الحمض.
في ظل الظروف اللاهوائية في العمود ، تتشكل المنتجات القلوية بكميات ضئيلة ، لذلك يتم اكتشاف تخمر الجلوكوز هنا.
أرز. 23.متوسط مؤشر كليغلر:
1 - أولي ،
2 - مع النمو بكتريا قولونية
3- مع النمو S. paratyphi B ،
4 - مع النمو S. typhi
بكتريا قولونيةتحلل الجلوكوز واللاكتوز بتكوين الغاز ، لا تنتج كبريتيد الهيدروجين. إنها تسبب اصفرار العمود والجزء المشطوف مع فواصل الوسائط.
S. paratyphiيتحلل الجلوكوز بتكوين غاز ، سلبي اللاكتوز. أنها تسبب اصفرار العمود مع فواصل ، الجزء المشطوف لا يتغير لونه ويبقى التوت. حيث S. paratyphi بإنتاج كبريتيد الهيدروجين (يظهر لون أسود أثناء الحقن) ، S. paratyphi ألا يتم إنتاج كبريتيد الهيدروجين.
S. typhiيحلل الجلوكوز بدون تكوين غاز ، سلبي اللاكتوز ، ينتج كبريتيد الهيدروجين. تتسبب في تحول العمود إلى اللون الأصفر بدون فواصل ، ولا يتغير لون الجزء المشطوف ويظل توت العليق ، ويظهر اللون الأسود أثناء الحقن.
الشيغيلا النيابة.موجب الجلوكوز ، اللاكتوز سلبي ، لا تنتج كبريتيد الهيدروجين. أنها تسبب اصفرار العمود (مع أو بدون فواصل حسب السيروفار) ، الجزء المشطوف لا يتغير لونه ويبقى قرمزي.
ب- التحديد النهائي للثقافة النقية(تحديد الموقع المنهجي للكائن الدقيق المعزول على مستوى الأنواع أو المتغير) وتحديد طيف الحساسية للمزرعة المعزولة للمضادات الحيوية.
لتحديد الثقافة النقية في هذه المرحلة ، تمت دراسة الخصائص البيوكيميائية والوراثية والمصلية والبيولوجية (الجدول 8).
في الممارسة المعملية الروتينية ، ليست هناك حاجة لدراسة جميع الخصائص أثناء تحديد الهوية. استخدام إعلامي ، سهل الوصول إليه ، اختبارات بسيطة، وهو ما يكفي لتحديد نوع (البديل) الانتماء للكائنات الحية الدقيقة المعزولة.
هذه هي الطريقة الرئيسية المستخدمة في التشخيص المختبري. أمراض معدية. يتمثل جوهر طريقة البحث البكتريولوجي في نثر المواد المرضية من المرضى وعزل الثقافة النقية لمسببات الأمراض ، متبوعًا بتحديدها من خلال الخصائص المورفولوجية والثقافية والتنكيرية والكيميائية الحيوية والمستضدية.
طريقة عزل الثقافات النقية ، والتي تسمح بعزل أنواع معينة من الميكروبات من موطن طبيعي أو آخر ، هي أهم طريقةالبحوث الميكروبيولوجية. أول من اقترح طريقة لعزل مزرعة نقية كان L. Pasteur.
تضمن طريقة باستير ، القائمة على استخدام وسائط المغذيات السائلة ، عزل الثقافة النقية بشكل رئيسي من مادة تحتوي على نوع واحد من الميكروبات (على سبيل المثال ، من الدم في إنتان الدم ، إلخ). كان أقل فعالية في الحالات التي كان من الضروري فيها عزل الأنواع الفردية من الكائنات الحية الدقيقة من خليطها. وفي الوقت نفسه ، في ظل الظروف الطبيعية ، غالبًا ما تحتوي مادة الفحص البكتريولوجي (البلغم ، القيح ، التربة ، الماء ، إلخ) على خليط من الكائنات الحية الدقيقة المختلفة.
أصبح العزل الناجح للمخاليط البكتيرية والدراسة المعزولة للأنواع الفردية ممكنًا بسبب تحسين طريقة عزل الثقافات النقية بواسطة روبرت كوخ (R. Koch) ، الذي استخدم لهذا الغرض في عام 1881 وسائط المغذيات الصلبةحيث يمكن أثناء البذر توزيع المواد بطريقة يتم فيها عزل الخلايا الميكروبية الفردية عن بعضها البعض. في ظل الظروف المناسبة (وسط المغذيات ، درجة الحرارة المثلى) ، ينتج عن تكاثر الخلايا المعزولة ذرية من نفس النوع ، أي ثقافة نقية لأنواع جرثومية معينة.
بعد فترة معينة (غالبًا في يوم واحد) ، في تلك الأماكن التي يوجد بها وسط غذائي كثيف توجد فيه خلايا معزولة ، تتشكل مجموعات من الميكروبات المضاعفة - ما يسمى مستعمرة،مرئي للعين المجردة. إنها لا تمثل تراكمًا فوضويًا للميكروبات ، والذي يمكن الحكم عليه بالفعل من خلال حقيقة أنه بالنسبة للعديد من أنواع الميكروبات ، تتمتع المستعمرات ببنية مميزة ، مما يجعل من الممكن تحديد نباتات المادة قيد الدراسة تقريبًا واختيارها. المستعمرات التي تخضع لمزيد من الدراسة. إن إعادة بناء مثل هذه المستعمرات على وسط غذائي مناسب هو عزل ثقافة نقية.
إن عزل الثقافات النقية مع تحديدها اللاحق له أهمية قصوى في تشخيص الأمراض المعدية ، مما يضمن التعرف السريع عليها وعلاجها في الوقت المناسب والوقاية منها. لا تقل أهمية في تحديد البكتيريا في دراسة الحالة الصحية والصحية للأجسام البيئية (الهواء والماء والتربة وما إلى ذلك) ، وكذلك في البحث العلمي.
تتوفر الآن طرق عديدة لعزل الثقافات النقية. يتم استخدام بعضها إلى حد محدود ، والبعض الآخر تطبيق واسع. أكثر الطرق شيوعًا هي الطرق الموضحة أدناه لعزل الثقافات البكتيرية النقية (طريقة دريغالسكي). في حين أن الكائنات الحية الدقيقة الأخرى - اللولبيات ، والبروتوزوا - تتطلب استخدام طرق خاصة للعزل أو لا يمكن عزلها على الإطلاق في وسط المغذيات الاصطناعية (بعض البروتوزوا ، الريكتسيا ، الفيروسات).
عادة ما يتم تقسيم طرق عزل الثقافات النقية من الخلائط الميكروبية إلى مجموعتين رئيسيتين: الطرق القائمة على مبدأ الفصل الميكانيكي للميكروبات في وسط مغذي ، والطرق القائمة على استخدام الخصائص البيولوجية للميكروبات. تتضمن المجموعة الأولى طرقًا لعزل الخلايا الفردية: 1) في عمق وسط المغذيات ؛ 2) على سطح الوسط و 3) تحت سيطرة العين. تستخدم المجموعة الثانية خصائص الميكروبات مثل حركتها وموقفها من درجة الحرارة والأكسجين وخصائصها المسببة للأمراض.
تقنية البذر وإعادة البذر
بالبذرفي الممارسة الميكروبيولوجية ، يطلق عليه إدخال بعض مواد الاختبار في وسط مغذي معقم للكشف عن الكائنات الحية الدقيقة.
إنقاصهو نقل الكائنات الدقيقة المستزرعة إلى بيئة معقمة. تعد الثقافات والثقافات الفرعية للميكروبات واحدة من أكثر الطرق شيوعًا في ممارسة علم الأحياء الدقيقة.
يتم إجراء عمليات إعادة البذور بطريقة لا تدخل فيها الكائنات الحية الدقيقة الغريبة إلى وسط المغذيات من الهواء أو من سطح الكائنات المحيطة. لهذا ، من الضروري التقيد الصارم الحيل التالية:
1) تصنع المحاصيل مباشرة بالقرب من الموقد المضاء ، حيث يتم تعقيم الحلقات والملاقط والسدادات القطنية وحواف أنابيب الاختبار ؛
2 بوصة اليد اليسرىأخذ أنبوب اختبار واحد مع ثقافة فرعية ، والآخر (مع وسط مغذي معقم) يتم الاحتفاظ به في وضع مائل بين الإبهام والسبابة ؛
3) يتم تثبيت الحلقة في وضع عمودي فوق لهب الموقد ويتم تحميص الجزء المعدني من الموقد بالحرارة ، ثم يميل أفقيًا ويتم تعقيم حامل الحلقة ؛
4) أخرج سدادات قطنية وامسكها بإصبع البنصر والخنصر من اليد اليمنى ؛ لا ينصح بوضع الفلين على الطاولة أو على أي شيء ؛
5) حرق حواف كلا الأنبوبين.
6) أدخل حلقة في أنبوب الاختبار مع الثقافة المراد ثقافتها الفرعية بعناية ، دون لمس الجدران ، والتقاط قطرة من السائل أو كمية صغيرة من اللويحة على الوسط الصلب ونقلها ، محاولًا عدم لمس الجدران ، إلى الثانية أنبوب اختبار مع وسط مغذي مستنفد ؛
7) يتم إخراج الحلقة ، وحرق حواف أنابيب الاختبار والأطراف الداخلية للسدادات. إذا اشتعلت النيران في السدادة القطنية ، فأغلق أنبوب الاختبار بها ، وأطفئ الطرف الخارجي بيد أو ملاقط ؛
8) يتم إطلاق الحلقة مرة أخرى في اللهب ، يتم عمل نقش مناسب على أنبوب الاختبار: اسم الثقافة وتاريخ البذر.
البذر في وسط سائليمكن إنتاجه باستخدام ماصة باستور أو ماصة متدرجة. عند استخدام ماصة باستور ، استخدم الملاقط المحترقة لكسر النهاية المختومة وحرق الماصة بأكملها برفق. يتم وضع أنبوب الاختبار مع المزرعة قيد الدراسة في اليد اليسرى ، ويتم وضع الماصة في اليمين بين الإبهام والأصابع الوسطى ، مع إمساكها فتحة علويةالسبابة.
بعد إزالة السدادة القطنية من أنبوب الاختبار ، احرق حواف الأخير. قم بخفض الماصة بعناية في أنبوب الاختبار وقم بإزالة السبابة. ثم أغلق الفتحة العلوية للماصة بإصبع السبابة ، ثم أخرجها من أنبوب الاختبار. يتم إطلاق سدادة القطن وحواف أنبوب الاختبار قبل إغلاقها. يتم نقل مادة الاختبار إلى وسط سائل. بعد التلقيح ، توضع الماصات في محلول مطهر.
البذر على وسائط صلبة.عند البذر على أجار مائل ، يتم تطبيق ضربة مستقيمة أو متعرجة. للقيام بذلك ، يتم إدخال الحلقة مع المادة الملقحة في أنبوب الاختبار حتى يتراكم ماء التكثيف في القاع وبعناية ، دون تخفيف الأجار ، يتم تطبيق السكتة الدماغية. يتم الحصول على التلقيح الصلب عن طريق تلطيخ اللقاح على كامل سطح الأجار المائل.
على وسط كثيف في طبق بتري ، يتم التلقيح على النحو التالي. يتم إذابة وسيط المغذيات في أنابيب الاختبار في حمام مائي مغلي ، ثم يتم تبريده إلى 48-50 درجة مئوية ويصب في أكواب معقمة في طبقة متساوية بارتفاع 3-5 مم. يتم تجفيف الوسط المتصلب في منظم حرارة في أكواب مغلقة لمدة 20-30 دقيقة. توضع الأكواب المفتوحة رأسًا على عقب على أرفف الترموستات مغطاة بورق معقم. يتم وضع الأغطية بجانب الأكواب. أثناء التجفيف ، يتبخر ماء التكثيف من سطح وسط المغذيات والسطح الداخلي للأكواب. يتم البذر بحلقة في شكل ضربات متوازية أو بملعقة زجاجية.
عند تحديد نوع الميكروب ولزراعة اللاهوائية ، فإنها تنتج البذر عن طريق الحقنفي عمود أجار أو جيلاتين. للقيام بذلك ، يتم قلب أنبوب الاختبار رأسًا على عقب ويتم ثقب عمود متوسط من أعلى إلى أسفل إلى أسفل بإبرة طويلة مستقيمة مع لقاح. ثم تُزال الإبرة بعناية ويُغلق أنبوب الاختبار بسدادة قطنية محترقة. إذا كانت هناك حاجة إلى احتياطات خاصة ضد العدوى ، يتم إجراء المحاصيل في خزانة خاصة لإعادة زرع الثقافات النقية. يتم وضع الأنابيب الملقحة وأطباق بتري في حاضنة النمو.
الكائنات الحية الدقيقة والجراثيم الموجودة داخل وسط المغذيات أو على سطحها لا يمكن أن تتحرك ، لكنها تبقى في المكان الذي كانت فيه في وقت التصلب. تبدأ كل خلية أو بوغ في التكاثر وبعد 2-3 أيام تتشكل مستعمرة - كمية كبيرةخلايا من نفس النوع. إذا تم تشكيل مستعمرة من خلية واحدة ، فستكون ثقافة نقية للكائنات الحية الدقيقة التي نمت من خليتها.
يُنظر إلى نمو المستعمرات أولاً بالعين المجردة ، ثم بعدسة مكبرة أو تحت المجهر. في الوقت نفسه ، من المستحيل عدم ملاحظة اختلاف المستعمرات في المظهر واللون والهيكل وما إلى ذلك.
إن استخدام الطريقة البكتريولوجية يجعل من الممكن عزل العامل الممرض في مزرعة نقية من المادة التي تم الحصول عليها من المريض ، والتعرف عليه بناءً على دراسة مجموعة من الخصائص. معظم البكتيريا قادرة على الزراعة على مختلف وسائط المغذيات الاصطناعية (باستثناء الكلاميديا والريكتسيا) ، لذا فإن الطريقة البكتريولوجية مهمة في تشخيص العديد من الأمراض المعدية.
إذا تم الحصول على نتيجة إيجابية ، فإن الطريقة البكتريولوجية تجعل من الممكن تحديد حساسية العامل الممرض المعزول للأدوية المضادة للميكروبات. ومع ذلك ، فإن فعالية هذه الدراسة تعتمد على العديد من المعلمات ، على وجه الخصوص شروط الجمعكذالك هو وسائل النقلإلى المختبر.
ل متطلبات أساسيةتشمل متطلبات اختيار ونقل المواد للفحص البكتريولوجي ما يلي:
- أخذ المواد قبل بدء العلاج موجه للسبب ؛
- مراعاة شروط العقم عند جمع المواد ؛
- الدقة الفنية لجمع المواد ؛
- كمية كافية من المواد ؛
- ضمان نظام درجة حرارة تخزين ونقل المواد ؛
- التقليل إلى الحد الأدنى للفترة الزمنية بين جمع المواد والبذر على وسط مغذي كثيف.
يجب أن يتم نقل المواد إلى المختبر في أسرع وقت ممكن ، ولكن ليس أكثر من ساعة إلى ساعتين بعد أخذها. يجب أن تكون عينات المادة عند درجة حرارة معينة ؛ على وجه الخصوص ، يتم تخزين المواد المعقمة بشكل طبيعي (الدم والسائل النخاعي) وتسليمها إلى المختبر عند 37 درجة مئوية. مواد غير معقمة (بول ، إفرازات الجهاز التنفسيإلخ) في درجة حرارة الغرفة لمدة لا تزيد عن ساعة إلى ساعتين أو لا تزيد عن يوم واحد عند 4 درجات مئوية (ظروف الثلاجة المنزلية). إذا كان من المستحيل تسليم العينات إلى المختبر في غضون الإطار الزمني المحدد ، يوصى باستخدام وسائط النقل المصممة للحفاظ على صلاحية مسببات الأمراض في ظل ظروف الحفظ.
الدم للبحثيجب أن يؤخذ من المريض أثناء ارتفاع درجة حرارة الجسم ، في بداية ظهور الحمى. يوصى بفحص 3-4 عينات دم تؤخذ بفاصل 4-6 ساعات ، وهو أمر معقول من حيث تقليل مخاطر تجرثم الدم العابر "المفقود" وزيادة القدرة على تأكيد الدور المسبب للمرض لعزل الدم البكتيريا المسببة للأمراض مشروطإذا تم العثور على هذه البكتيريا في عدة عينات من الدم الوريدي. يتم تلقيح عينة دم بحجم 10 مل في شخص بالغ و 5 مل في الأطفال في قنينتين على الأقل مع وسيط للكائنات الدقيقة الهوائية واللاهوائية بنسبة 1:10. من المستحسن أيضًا إجراء دراسة واحدة للدم الشرياني.
يأخذ السائل النخاعي (CSJ) يتم إنتاجه من قبل طبيب مع ثقب في أسفل الظهر بمقدار 1-2 مل في أنبوب معقم جاف. يتم تسليم العينة على الفور إلى المختبر ، حيث تبدأ دراستها أيضًا على الفور. إذا لم يكن ذلك ممكنًا ، يتم تخزين المادة عند 37 درجة مئوية لعدة ساعات. يزيد بشكل كبير من المبلغ نتائج إيجابيةالفحص البكتريولوجي ، تلقيح 1-2 قطرات من السائل الدماغي النخاعي في أنبوب اختبار يحتوي على وسط شبه سائل مع الجلوكوز ، وفي طبق بتري مع أجار "الدم". لإرسال المواد ، الصناديق المتساوية ، وسادات التدفئة ، والترمس أو أي عبوة أخرى حيث يتم الحفاظ على درجة الحرارة عند حوالي 37 درجة مئوية.
الفضلاتللفحص البكتريولوجي ، يتم أخذها مع ملاعق خشبية معقمة بكمية 3-5 جم في وعاء معقم بغطاء مغلق بإحكام. يجب أن تبدأ دراسة المادة المأخوذة في موعد لا يتجاوز ساعتين.إذا لم يكن من الممكن بدء الدراسة خلال هذا الوقت ، فيجب أخذ كمية صغيرة من المواد ووضعها في وسيلة نقل مناسبة. عند اختيار البراز ، يجب على المرء أن يسعى جاهداً لإرسال شوائب مرضية (مخاط ، صديد ، جزيئات ظهارية ، إلخ) للبحث ، إن وجد ، لتجنب دخول شوائب الدم ذات الخصائص المبيدة للجراثيم إلى المادة.
لأخذ المادة ، يمكن استخدام مسحات من المستقيم (مع طرف قطني). يجب ترطيب المسحة بمحلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر أو وسيلة نقل (وليس هلام زيتي). يتم إدخاله في المستقيم على عمق 5-6 سم ، وتقليب السدادة القطنية ، وإزالتها بعناية ، والتحكم في مظهر لون البراز على السدادة القطنية. توضع المسحة في أنبوب اختبار جاف إذا بدأت دراسة المادة في غضون ساعتين ، وإلا - في وسط النقل.
البول(جزء متوسط من البول الحر) بكمية 3-5 مل يتم جمعها في طبق معقم بعد مرحاض شامل للأعضاء التناسلية الخارجية. يفضل تناول حصص الصباح من البول.
الصفراءجمعت خلال سبر الاثني عشرفي غرفة العلاج بشكل منفصل في الأجزاء A و B و C إلى ثلاثة أنابيب اختبار معقمة ، مع مراعاة قواعد التعقيم.
اغسل ماء المعدةجمعت في برطمانات معقمة بحجم 20-50 مل. يجب أن يؤخذ في الاعتبار أن غسيل المعدة في هذه الحالات يتم فقط مع حلول غير مبالية (ليس لها تأثير جراثيم أو مبيد للجراثيم على الكائنات الحية الدقيقة) - يفضل الماء المغلي (بدون إضافة الصودا ، برمنجنات البوتاسيوم ، إلخ).
اللعاب. يتم جمع البلغم الصباحي المنطلق أثناء نوبة السعال في جرة معقمة. قبل السعال ، يقوم المريض بغسل أسنانه بالفرشاة وشطف فمه بالماء المغلي من أجل إزالة بقايا الطعام ميكانيكيًا ، والظهارة المتقشرة والميكروفلورا تجويف الفم.
شطف المياه من الشعب الهوائية. أثناء تنظير القصبات ، لا يتم حقن أكثر من 5 مل من محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر ، متبوعًا بالشفط في أنبوب معقم.
إفرازات من البلعوم وتجويف الفم والأنف. تؤخذ المادة من تجويف الفم على معدة فارغة أو بعد ساعتين من تناول الطعام بقطعة قطن معقمة أو ملعقة من الغشاء المخاطي ومناطقه المصابة عند مداخل مجاري الغدد اللعابية وسطح اللسان ، من القروح. إذا كان هناك فيلم ، تتم إزالة الأخير بملاقط معقمة. يتم أخذ المواد من تجويف الأنف بمسحة قطنية معقمة جافة ، يتم إدخالها في عمق تجويف الأنف. يتم أخذ المواد من البلعوم الأنفي بمسحة قطنية معقمة من البلعوم الخلفي ، والتي يتم إدخالها بعناية من خلال فتحة الأنف في البلعوم الأنفي. إذا بدأ السعال في نفس الوقت ، فلا يتم إزالة المسحة حتى ينتهي السعال. لإجراء تحليل للدفتيريا ، يتم فحص الأفلام والمخاط من الأنف والبلعوم في وقت واحد ، مع أخذ المواد بمسحات مختلفة.
يتم تلقيح مادة الاختبار على وسط مغذي كثيف باستخدام تقنيات خاصة للحصول على نمو مستعمرات فردية من الكائنات الحية الدقيقة ، والتي يتم بعد ذلك غربلتها من أجل عزل مزرعة نقية للممرض.
يتم عزل أنواع معينة من البكتيريا باستخدام وسائط اختيارية (انتقائية) تؤخر نمو الكائنات الحية الدقيقة الأجنبية أو تحتوي على مواد تحفز نمو بعض الميكروبات المسببة للأمراض.
الكائنات الحية الدقيقة المعزولة في وسط المغذيات تحديد، بمعنى آخر. تحديد نوعهم أو نوع الانتماء. الخامس مؤخرالتحديد الهوية في ممارسة الرعاية الصحية ، يتم استخدام أنظمة الفحص الدقيق ، وهي عبارة عن لوحات بها مجموعة من البيئات التشخيصية التفاضلية ، مما يؤدي إلى تسريع الدراسة. تستخدم أنظمة الفحص الدقيق أيضًا لتحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للأدوية المضادة للميكروبات عن طريق تخفيف المضاد الحيوي في وسط مغذي سائل.
عند تقييم نتائج الدراسة البكتريولوجية ، يجب على الطبيب أن يأخذ في الاعتبار أن النتيجة السلبية لا تعني دائمًا عدم وجود العامل الممرض وقد تترافق مع استخدام الأدوية المضادة للميكروبات ، وارتفاع نشاط المبيدات الدقيقة في الدم ، والأخطاء الفنية. الكشف عن ميكروب ممرض في مادة من مريض خارج الصلة به الصورة السريريةممكن في حالة النقل البكتيرية النقاهة أو الصحية أو العابرة.
عزل من الدم ، مع مراعاة جميع قواعد التعقيم ، للكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض المشروطة (المكورات العنقودية الذهبية ، القولونية) وحتى النبتات الرخامية يجب اعتبارها مظهرًا من مظاهر تجرثم الدم ، خاصةً إذا تم العثور على هذه الميكروبات في أكثر من عينة مادية واحدة أو في ركائز مختلفة (الدم والبول) ، نظرًا لانخفاض نشاط المناعة في الجسم ، فإن هذه الميكروبات وغيرها "غير مسببة للأمراض "الكائنات الحية الدقيقة يمكن أن تكون من مسببات الأمراض العمليات المعدية، بما في ذلك تعفن الدم.
صعوبة معينة هي تفسير نتائج الفحص البكتريولوجي للوسائط غير المعقمة، أي إثبات الدور المسبب للمرض للكائنات الحية الدقيقة الانتهازية. في هذه الحالة ، يتم أخذ مؤشرات مثل نوع المزارع المعزولة ، وعدد الخلايا الميكروبية من نوع معين في المادة ، وعزلها المتكرر أثناء مسار المرض ، ووجود زراعة أحادية أو ارتباط بكائن حي دقيق. حساب في مجمع.
Yushchuk ND، Vengerov Yu.Ya.