2. हास्य और सेलुलर प्रतिरक्षा की स्थिति का आकलन करने के तरीके। शरीर की प्रतिरक्षा स्थिति का आकलन।

क्लिनिकल इम्यूनोलॉजी एक नैदानिक ​​और प्रयोगशाला अनुशासन है जो रोगियों के निदान और उपचार से संबंधित है विभिन्न रोगऔर प्रतिरक्षाविज्ञानी तंत्र पर आधारित रोग संबंधी स्थितियां, साथ ही चिकित्सा और रोकथाम में स्थितियां जिनमें इम्युनोप्रेपरेशन एक प्रमुख भूमिका निभाते हैं।

प्रतिरक्षा स्थिति एक संरचनात्मक और कार्यात्मक अवस्था है प्रतिरक्षा तंत्रव्यक्तिगत, नैदानिक ​​​​और प्रयोगशाला प्रतिरक्षाविज्ञानी मापदंडों के एक जटिल द्वारा निर्धारित।

इस प्रकार, प्रतिरक्षा स्थिति प्रतिरक्षा प्रणाली की शारीरिक और कार्यात्मक स्थिति की विशेषता है, अर्थात, एक निश्चित समय में एक विशिष्ट प्रतिजन का जवाब देने की इसकी क्षमता।

निम्नलिखित कारक प्रतिरक्षा स्थिति को प्रभावित करते हैं:

जलवायु-भौगोलिक; सामाजिक; पर्यावरण (भौतिक, रासायनिक और जैविक); "चिकित्सा" (दवाओं का प्रभाव, सर्जिकल हस्तक्षेप, तनाव, आदि)।

जलवायु और भौगोलिक कारकों के बीच, प्रतिरक्षा स्थिति तापमान, आर्द्रता, सौर विकिरण, दिन के उजाले घंटे आदि से प्रभावित होती है। उदाहरण के लिए, दक्षिणी क्षेत्रों की तुलना में उत्तरी क्षेत्रों के निवासियों में फागोसाइटिक प्रतिक्रिया और त्वचा एलर्जी परीक्षण कम स्पष्ट होते हैं। गोरे लोगों में एपस्टीन-बार वायरस का कारण बनता है संक्रमण- मोनोन्यूक्लिओसिस, नेग्रोइड जाति के व्यक्तियों में - ऑन्कोपैथोलॉजी (बर्किट्स लिंफोमा), और पीली जाति के व्यक्तियों में - एक पूरी तरह से अलग ऑन्कोपैथोलॉजी (नासोफेरींजल कार्सिनोमा), और केवल पुरुषों में। यूरोपीय लोगों की तुलना में अफ्रीकी डिप्थीरिया के प्रति कम संवेदनशील होते हैं।

प्रतिरक्षा स्थिति को प्रभावित करने वाले सामाजिक कारकों में पोषण, रहने की स्थिति, व्यावसायिक खतरे आदि शामिल हैं। एक संतुलित और तर्कसंगत आहार महत्वपूर्ण है, क्योंकि इम्युनोग्लोबुलिन के संश्लेषण और प्रतिरक्षात्मक कोशिकाओं के निर्माण के लिए आवश्यक पदार्थ भोजन के साथ शरीर में प्रवेश करते हैं। और उनके कामकाज। यह विशेष रूप से महत्वपूर्ण है कि आवश्यक अमीनो एसिड और विटामिन, विशेष रूप से ए और सी, आहार में मौजूद हों।

रहने की स्थिति का जीव की प्रतिरक्षा स्थिति पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। खराब आवास स्थितियों में रहने से क्रमशः समग्र शारीरिक प्रतिक्रिया में कमी आती है, प्रतिरक्षात्मकता, जो अक्सर संक्रामक रुग्णता के स्तर में वृद्धि के साथ होती है।

व्यावसायिक खतरों का प्रतिरक्षा स्थिति पर बहुत प्रभाव पड़ता है, क्योंकि एक व्यक्ति अपने जीवन का एक महत्वपूर्ण हिस्सा काम पर व्यतीत करता है। उत्पादन कारक जो शरीर पर प्रतिकूल प्रभाव डाल सकते हैं और प्रतिरक्षा को कम कर सकते हैं, उनमें आयनकारी विकिरण, रसायन, रोगाणुओं और उनके चयापचय उत्पादों, तापमान, शोर, कंपन आदि शामिल हैं। विकिरण स्रोत अब विभिन्न उद्योग उद्योग (ऊर्जा, खनन, रसायन) में बहुत व्यापक हैं। , एयरोस्पेस, आदि)।

नमक का प्रतिरक्षा स्थिति पर प्रतिकूल प्रभाव पड़ता है भारी धातुओं, सुगंधित, अल्काइलेटिंग यौगिक और अन्य रसायन, जिनमें डिटर्जेंट, कीटाणुनाशक, कीटनाशक, कीटनाशक शामिल हैं, व्यापक रूप से व्यवहार में उपयोग किए जाते हैं। इस तरह के व्यावसायिक खतरे रासायनिक, पेट्रोकेमिकल, धातुकर्म उद्योगों आदि में श्रमिकों को प्रभावित करते हैं।

एंटीबायोटिक दवाओं, टीकों, एंजाइमों, हार्मोन, फ़ीड प्रोटीन, आदि के उत्पादन से जुड़े जैव प्रौद्योगिकी उद्योगों के श्रमिकों में रोगाणुओं और उनके चयापचय उत्पादों (अक्सर प्रोटीन और उनके परिसरों) द्वारा शरीर की प्रतिरक्षा स्थिति पर प्रतिकूल प्रभाव डाला जाता है।

कम या उच्च तापमान, शोर, कंपन, कम रोशनी जैसे कारक प्रतिरक्षा प्रणाली को कम कर सकते हैं, तंत्रिका तंत्र के माध्यम से प्रतिरक्षा प्रणाली पर अप्रत्यक्ष प्रभाव पड़ता है और अंत: स्रावी प्रणालीजो प्रतिरक्षा प्रणाली से निकटता से संबंधित हैं।

पर्यावरणीय कारकों का किसी व्यक्ति की प्रतिरक्षा स्थिति पर वैश्विक प्रभाव पड़ता है, मुख्य रूप से रेडियोधर्मी पदार्थों के साथ पर्यावरण प्रदूषण (परमाणु रिएक्टरों से खर्च किया गया ईंधन, दुर्घटनाओं के दौरान रिएक्टरों से रेडियोन्यूक्लाइड का रिसाव), कृषि में कीटनाशकों का व्यापक उपयोग, रासायनिक उद्यमों और वाहनों से उत्सर्जन , जैव प्रौद्योगिकी उद्योग।

प्रतिरक्षा स्थिति विभिन्न नैदानिक ​​और चिकित्सीय चिकित्सा जोड़तोड़, ड्रग थेरेपी और तनाव से प्रभावित होती है। रेडियोग्राफी का अनुचित और लगातार उपयोग, रेडियोआइसोटोप स्कैनिंग प्रतिरक्षा प्रणाली को प्रभावित कर सकता है। आघात और सर्जरी के बाद प्रतिरक्षण क्षमता बदल जाती है। बहुत दवाओंएंटीबायोटिक दवाओं सहित, विशेष रूप से लंबे समय तक उपयोग के साथ, एक प्रतिरक्षादमनकारी दुष्प्रभाव हो सकता है। तनाव मुख्य रूप से केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के माध्यम से कार्य करते हुए, प्रतिरक्षा की टी-प्रणाली के काम में गड़बड़ी पैदा करता है।

आदर्श में प्रतिरक्षाविज्ञानी मापदंडों की परिवर्तनशीलता के बावजूद, प्रतिरक्षा स्थिति को प्रयोगशाला परीक्षणों के एक सेट की स्थापना के द्वारा निर्धारित किया जा सकता है, जिसमें गैर-विशिष्ट प्रतिरोध कारकों, हास्य (बी-सिस्टम) और सेलुलर (टी-सिस्टम) प्रतिरक्षा की स्थिति का आकलन शामिल है। .

प्रतिरक्षा प्रणाली के विकारों से जुड़े रोगों के उपचार की प्रभावशीलता की निगरानी के लिए, विभिन्न संक्रामक और दैहिक रोगों में प्रतिरक्षात्मक कमी का पता लगाने के लिए अंग और ऊतक प्रत्यारोपण, ऑटोइम्यून बीमारियों, एलर्जी के लिए क्लिनिक में प्रतिरक्षा स्थिति का आकलन किया जाता है। . प्रयोगशाला की क्षमताओं के आधार पर, प्रतिरक्षा स्थिति का आकलन अक्सर निम्नलिखित संकेतकों के एक सेट के निर्धारण पर आधारित होता है:

1) सामान्य नैदानिक ​​परीक्षा;

2) प्राकृतिक प्रतिरोध कारकों की स्थिति;

3) हास्य प्रतिरक्षा;

4) सेलुलर प्रतिरक्षा;

5) अतिरिक्त परीक्षण।

एक सामान्य नैदानिक ​​​​परीक्षा के दौरान, रोगी की शिकायतें, इतिहास, नैदानिक ​​लक्षण, एक सामान्य रक्त परीक्षण के परिणाम (लिम्फोसाइटों की पूर्ण संख्या सहित), और जैव रासायनिक डेटा को ध्यान में रखा जाता है।

रक्त सीरम में जी, एम, ए, डी, ई वर्ग के इम्युनोग्लोबुलिन के स्तर से निर्धारित होता है, विशिष्ट एंटीबॉडी की संख्या, इम्युनोग्लोबुलिन का अपचय, तत्काल अतिसंवेदनशीलता, परिधीय रक्त में बी-लिम्फोसाइटों का सूचकांक, विस्फोट परिवर्तन बी-सेल मिटोजेन्स और अन्य परीक्षणों के प्रभाव में बी-लिम्फोसाइटों का।

सेलुलर प्रतिरक्षा की स्थिति का आकलन टी-लिम्फोसाइटों की संख्या के साथ-साथ परिधीय रक्त में टी-लिम्फोसाइटों की उप-जनसंख्या, टी-सेल मिटोजेन्स के प्रभाव में टी-लिम्फोसाइटों के विस्फोट परिवर्तन, थाइमस हार्मोन के निर्धारण, के स्तर द्वारा किया जाता है। स्रावित साइटोकिन्स, साथ ही एलर्जी के साथ त्वचा परीक्षण, डाइनिट्रोक्लोरोबेंजीन के साथ संपर्क संवेदीकरण। एलर्जी त्वचा परीक्षण एंटीजन का उपयोग करते हैं जिसके लिए सामान्य रूप से संवेदीकरण होना चाहिए, उदाहरण के लिए, ट्यूबरकुलिन के साथ मंटौक्स परीक्षण। प्राथमिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को प्रेरित करने की शरीर की क्षमता डाइनिट्रोक्लोरोबेंजीन के साथ संपर्क संवेदीकरण द्वारा दी जा सकती है।

प्रतिरक्षा स्थिति का आकलन करने के लिए अतिरिक्त परीक्षणों के रूप में, आप रक्त सीरम के जीवाणुनाशक ™ का निर्धारण, पूरक के C3-, C4-घटकों का अनुमापन, रक्त सीरम में C-प्रतिक्रियाशील प्रोटीन की सामग्री का निर्धारण, निर्धारण जैसे परीक्षणों का उपयोग कर सकते हैं। रुमेटी कारक और अन्य स्वप्रतिपिंड।

इस प्रकार, प्रतिरक्षा स्थिति का आकलन बड़ी संख्या में प्रयोगशाला परीक्षणों के आधार पर किया जाता है जो प्रतिरक्षा प्रणाली के हास्य और सेलुलर दोनों भागों की स्थिति का आकलन करने की अनुमति देता है, साथ ही साथ गैर-प्रतिरोध कारक भी। सभी परीक्षणों को दो समूहों में बांटा गया है: पहले और दूसरे स्तरों के परीक्षण। स्तर 1 परीक्षण किसी भी प्राथमिक स्वास्थ्य देखभाल नैदानिक ​​प्रतिरक्षा विज्ञान प्रयोगशाला में किया जा सकता है और इसका उपयोग प्रत्यक्ष प्रतिरक्षाविकृति वाले व्यक्तियों की प्रारंभिक पहचान के लिए किया जाता है। अधिक सटीक निदान के लिए, दूसरे स्तर के परीक्षणों का उपयोग किया जाता है।

प्रतिरक्षा की बी-प्रणाली का आकलन (हास्य प्रतिरक्षा)।

प्रतिरक्षा के बी-सिस्टम का आकलन करने के लिए कई विधियों का उपयोग किया जाता है।

रक्त में बी-लिम्फोसाइटों का निर्धारण. इस प्रकार के लिम्फोसाइटों के तीन गुणों का उपयोग किया जाता है।

उपलब्धतापूरक रिसेप्टर्स तथाकथित पूरक रोसेट की गणना करना संभव बनाता है, अर्थात। लिम्फोसाइट्स अपनी सतह पर एक एंटीबॉडी-पूरक परिसर (ईएसी-रोसेट गठन) ले जाने वाले एरिथ्रोसाइट्स के साथ रोसेट बनाते हैं। न केवल लिम्फोसाइट्स, बल्कि ग्रैन्यूलोसाइट्स भी रोसेट बनाने में सक्षम हैं। आई. वोंग, ए. विल्सन ने 1975 में न्यूट्रोफिल द्वारा ईए- और ईएसी-रोसेट गठन के मंचन की तकनीक का वर्णन किया, जिसने इन कोशिकाओं में एफसी रिसेप्टर्स की उपस्थिति को साबित किया। 1976 में, आई. वी. पेट्रोवा एट अल। राम एरिथ्रोसाइट्स के साथ सहज रोसेट गठन के लिए न्यूट्रोफिल की क्षमता का वर्णन किया और दिखाया कि न्यूट्रोफिल की यह उप-जनसंख्या इम्यूनोसप्रेसिव थेरेपी के साथ नाटकीय रूप से बढ़ जाती है। लिम्फोसाइटों के अनुरूप, न्यूट्रोफिल को सहज रोसेट कोशिकाओं, पूरक रोसेट कोशिकाओं और अशक्त कोशिकाओं में विभाजित किया जाता है। पर स्वस्थ लोगस्वतःस्फूर्त रोसेट बनाने वाले न्यूट्रोफिल 25 से 35% तक होते हैं, और पूरक - 14 से 20% तक।

चावल। 1. बी-कोशिकाओं का रोसेट गठन।

उपलब्धताबी-लिम्फोसाइटों में, इम्युनोग्लोबुलिन के एफसी टुकड़े के लिए रिसेप्टर्स इस तथ्य की ओर ले जाते हैं कि वे स्वयं पर एकत्रित -ग्लोब्युलिन को सोख लेते हैं। बी-लिम्फोसाइटों को -ग्लोबुलिन के लेबल वाले समुच्चय का उपयोग करके फ्लोरोसेंट या रेडियोग्राफिक विधि का उपयोग करके पता लगाया जा सकता है। मानव बी-लिम्फोसाइट्स माउस एरिथ्रोसाइट्स के साथ रोसेट बनाते हैं। अंत में, कून्स इम्यूनोफ्लोरेसेंट विधि की मदद से, एंटीग्लोबुलिन सीरा का उपयोग करके, इम्युनोग्लोबुलिन निर्धारकों, यानी बी-लिम्फोसाइट्स को प्रभावित करने वाले सभी लिम्फोसाइटों का पता लगाना और उनकी गणना करना संभव है। इस मामले में, IgM-, IgG या 1gA-निर्धारकों को ले जाने वाली कोशिकाओं की एक विभेदित गणना की जा सकती है। न केवल बी कोशिकाओं का प्रतिशत निर्धारित करना आवश्यक है, बल्कि उनके पूर्ण मात्रा 1 μl रक्त में।

परिभाषाइम्युनोग्लोबुलिन का रक्त स्तर। इम्युनोग्लोबुलिन की कुल एकाग्रता और विभिन्न वर्गों के इम्युनोग्लोबुलिन की संख्या निर्धारित की जाती है। पहले जिंक सल्फेट के साथ नमकीन बनाकर किया जाता है, उसके बाद टर्बिडिमेट्रिक मूल्यांकन, वैद्युतकणसंचलन या इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस किया जाता है। मनुष्यों में कुल इम्युनोग्लोबुलिन का सामान्य स्तर 10 से 20 ग्राम / लीटर तक होता है। आईजीएम, आईजीजी और आईजीए की मात्रा का निर्धारण अक्सर मैनसिनी के अनुसार रेडियल इम्यूनोडिफ्यूजन की विधि द्वारा किया जाता है। IgE रेडियोइम्यूनोसे द्वारा निर्धारित किया जाता है। आदर्श की ऊपरी सीमा 0.0005 g / l है।

परिभाषारक्त सीरम में आइसोहेमाग्लगुटिनिन की उपस्थिति और स्तर, साथ ही व्यापक बैक्टीरिया और वायरस के लिए प्राकृतिक (सामान्य) एंटीबॉडी। एंटीजन के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है कोलाई, स्टेफिलोकोकल टॉक्सिन्स, हर्पीज वायरस, आदि। यह ध्यान में रखना चाहिए कि ά- और β-isohemagglutinins IgM से संबंधित हैं।

अध्ययनकई मारे गए टीकों के साथ सक्रिय टीकाकरण के बाद एंटीबॉडी उत्पत्ति (प्राथमिक और माध्यमिक प्रतिक्रिया)। पर्टुसिस और मारे गए पोलियो के टीके, डिप्थीरिया और टेटनस टॉक्सोइड्स, न्यूमोकोकी, मेनिंगोकोकी और बैक्टीरिया से पृथक पॉलीसेकेराइड एंटीजन लागू करें आंतों का समूह. कई एंटीजन का उपयोग करने की आवश्यकता प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की आनुवंशिक रूप से निर्धारित विशिष्टता से जुड़ी है। किसी एक प्रतिजन के प्रति कम प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्राप्त करना इस तथ्य का परिणाम हो सकता है कि यह व्यक्ति इस प्रतिजन के लिए कम-प्रतिक्रिया वाले जीनोटाइप से संबंधित है। अन्य एंटीजन के प्रति प्रतिक्रिया सामान्य हो सकती है। इसीलिए बी-सिस्टम की कार्यात्मक हीनता का निदान केवल तभी किया जा सकता है जब कई अलग-अलग एंटीजन के प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को दबा दिया जाता है।

अपचय अनुसंधानशरीर में इम्युनोग्लोबुलिन। मानव इम्युनोग्लोबुलिन की एक लेबल वाली तैयारी को रक्त में अंतःक्षिप्त किया जाता है। रक्त से लेबल की निकासी और मूत्र और मल में इसके संचय से इम्युनोग्लोबुलिन का आधा जीवन निर्धारित करना संभव हो जाता है। आईजीजी का सामान्य आधा जीवन 24 दिनों का होता है। एक्सयूडेटिव एंटरोपैथी, नेफ्रोसिस और कुछ अन्य बीमारियों के साथ, इम्युनोग्लोबुलिन के हाइपरकैटाबोलिज्म की स्थिति होती है। उनके चयनात्मक अतिअपचय के तथ्य को स्थापित करने के लिए, लेबल किए गए एल्ब्यूमिन का आधा जीवन समानांतर में निर्धारित किया जाता है।

बायोप्सी लसीकापर्व , अस्थि मज्जा, आंतों के म्यूकोसा के खंड। यह प्रक्रिया प्लाज्मा कोशिकाओं के ऊतकीय पता लगाने, लिम्फोइड फॉलिकल्स की उपस्थिति और संरचना के उद्देश्य से की जाती है। तत्काल अतिसंवेदनशीलता प्रकट करने वाली त्वचा प्रतिक्रियाएं। इन परीक्षणों में पीएएस-प्रतिक्रिया शामिल है। डिप्थीरिया के खिलाफ प्रतिरक्षित लोगों में, जिनके पास डिप्थीरिया विष के प्रति एंटीबॉडी हैं, इस विष के इंट्राडर्मल इंजेक्शन से विशिष्ट एरिथेमा का विकास नहीं होता है।

बी-लिम्फोसाइटों द्वारा इम्युनोग्लोबुलिन जैवसंश्लेषण की उत्तेजनाकृत्रिम परिवेशीय। मानव रक्त से बी-लिम्फोसाइटों की कार्यात्मक गतिविधि का मूल्यांकन इस तथ्य के कारण संभव है कि कुछ माइटोजन, जैसे पोकेवीड के माइटोजन, में बी-लिम्फोसाइटों के पॉलीक्लोनल उत्तेजना पैदा करने की क्षमता होती है। इम्युनोग्लोबुलिन को संश्लेषित करने वाली बी-कोशिकाओं का "सकल" उत्पादन एक माइटोजेन के साथ लिम्फोसाइटों के संवर्धन के 7-12 दिनों के बाद रेडियोइम्यूनोलॉजिकल विधि द्वारा संस्कृति तरल में निर्धारित किया जाता है।

चावल। 2. हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया।

बी-लिम्फोसाइट्स एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं, विदेशी एंटीजन (बैक्टीरिया या वायरस द्वारा किए गए) को पहचानने और हटाने में मदद करते हैं। उन्हें रक्त में परिसंचारी टी-लिम्फोसाइट्स और मैक्रोफेज द्वारा सहायता प्रदान की जाती है।

ए) वायरल कण सतह कोशिकाओं के माध्यम से ऊतक में प्रवेश करते हैं और गुणा करते हैं।

बी) मैक्रोफेज वायरल कणों को खा जाते हैं,

ग) मैक्रोफेज एंटीजन को रक्त में परिसंचारी टी-लिम्फोसाइटों तक पहुंचाते हैं। इससे टी- और बी-लिम्फोसाइटों की एक अतिरिक्त संख्या जुटाई जाती है।

डी) बी-लिम्फोसाइट्स प्लाज्मा बी-कोशिकाओं में टूट जाते हैं, जो हमलावर वायरस और मेमोरी बी-कोशिकाओं के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं।

ई) रक्त में परिसंचारी एंटीबॉडी वायरल कणों के साथ बातचीत करते हैं।

च) मैक्रोफेज वायरस को पहचानते हैं और खा जाते हैं, शरीर को संक्रमण से बचाते हैं।

चित्र 3. प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के दौरान कोशिकाओं की बातचीत।

टी-हेल्पर रिसेप्टर एजी-प्रेजेंटिंग सेल की सतह पर उजागर कक्षा 11 एमएचसी अणु के साथ एंटीजेनिक निर्धारक (एपिटोप) को पहचानता है। टी-हेल्पर सीडी4 का विभेदन एजी आणविक अंतःक्रिया में शामिल है। इस तरह की बातचीत के परिणामस्वरूप, एजी-प्रेजेंटिंग सेल आईएल -1 को गुप्त करता है, जो टी-हेल्पर में आईएल -2 के संश्लेषण और स्राव को उत्तेजित करता है, साथ ही आईएल -2 के समान टी-हेल्पर के संश्लेषण और निगमन को भी उत्तेजित करता है। प्लाज्मा झिल्ली में रिसेप्टर्स। IL-2 टी-हेल्पर्स के प्रसार को उत्तेजित करता है और साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइटों को सक्रिय करता है। बी-लिम्फोसाइटों का चयन इन कोशिकाओं की सतह पर आईजी एम के फैब-टुकड़ों के साथ एजी की बातचीत द्वारा किया जाता है। वर्ग II एमएचसी अणु के संयोजन में इस एजी का एपिटोप टी-हेल्पर रिसेप्टर को पहचानता है, जिसके बाद साइटोकिन्स टी-लिम्फोसाइट से स्रावित होते हैं, बी-लिम्फोसाइटों के प्रसार को उत्तेजित करते हैं और प्लाज्मा कोशिकाओं में उनके भेदभाव को उत्तेजित करते हैं जो इस एजी के खिलाफ एंटीबॉडी को संश्लेषित करते हैं। . साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट रिसेप्टर वायरस से संक्रमित या ट्यूमर सेल की सतह पर कक्षा I एमएचसी अणु के साथ जटिल में एंटीजेनिक निर्धारक से बांधता है। साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट सीडी 8 का भेदभाव एजी आणविक बातचीत में शामिल है। अंतःक्रियात्मक कोशिकाओं के अणुओं के बंधन के बाद, साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट लक्ष्य सेल को मारता है।

चावल। 5. विनोदी प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के विकास के दौरान बातचीत की तीन-कोशिका प्रणाली।

बी-लिम्फोसाइट मैक्रोफेज से एंटीजन के बारे में विशिष्ट जानकारी प्राप्त करता है जिसने एंटीजन मान्यता के बाद टी-लिम्फोसाइट द्वारा स्रावित इम्युनोपोएसिस (II) इंड्यूसर से विदेशी सामग्री और गैर-विशिष्ट जानकारी को अवशोषित किया है। उन स्थितियों में जब तीनों प्रकार की कोशिकाएं सहयोग करती हैं, एक पूर्ण प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया विकसित होती है। यदि बी-सेल केवल मैक्रोफेज से एंटीजन के बारे में जानकारी प्राप्त करता है, और टी-सेल से कोई मदद नहीं मिलती है, तो विशिष्ट गैर-प्रतिक्रिया-सहिष्णुता प्रेरित होती है। बी-सेल पर कार्य करते समय, केवल II गैर-विशिष्ट इम्युनोग्लोबुलिन के संश्लेषण का कारण बनता है।

चावल। 6. एक हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के प्रेरण के दौरान थाइमस की कोशिकाओं (टी-कोशिकाओं का स्रोत) और अस्थि मज्जा (बी-कोशिकाओं का स्रोत) की कोशिकाओं के बीच बातचीत।

हास्य प्रतिक्रिया एक जटिल प्रक्रिया के रूप में विकसित होती है जिसमें कई प्रकार की कोशिकाएँ शामिल होती हैं। केवल अस्थि मज्जा कोशिकाओं - बीसीएम (बी-लिम्फोसाइट्स) या केवल थाइमस कोशिकाओं - टीएफसी (टी-कोशिकाओं) के विकिरणित चूहों का परिचय पर्याप्त शक्ति की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के विकास को सुनिश्चित नहीं करता है। इसी समय, इन कोशिकाओं के मिश्रण की शुरूआत से राम एरिथ्रोसाइट्स के लिए एंटीबॉडी के गहन उत्पादन का निर्माण होता है। इसके अलावा, कोशिकाओं के इस तरह के संयुक्त परिचय के साथ प्रतिक्रिया विभिन्न मूल के कोशिकाओं के अलग प्रशासन के साथ प्रतिक्रियाओं के योग से बहुत अधिक है। अन्यथा सहयोग विभिन्न प्रकार केकोशिकाएं एक सहक्रियात्मक प्रभाव की ओर ले जाती हैं। प्रतिक्रिया का आकलन तिल्ली में पट्टिका बनाने वाली कोशिकाओं (पीसीसी) की संख्या से किया गया था।

चावल। 7. हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का विकास।

"कुल" योजना, लिम्फोसाइटों के उप-जनसंख्या को ध्यान में रखते हुए जो एंटीबॉडी उत्पत्ति के प्रेरण में शामिल हैं, आईजीएम संश्लेषण को आईजीजी संश्लेषण में बदलना और स्मृति कोशिकाओं के निर्माण में शामिल हैं। मैक्रोफेज (एमएफ) द्वारा कब्जा कर लिया गया एंटीजन (एजी) एक इम्यूनोजेनिक रूप में कोशिका की सतह पर प्रदर्शित होता है। एक फेनोटाइप वाले "अर्ली" टी-हेल्पर्स उच्च रक्तचाप की मान्यता की प्रतिक्रिया में प्रवेश करते हैं, जो "देर से" टी-हेल्पर्स की परिपक्वता में योगदान करते हैं जो एंटीबॉडी उत्पादन में मदद करते हैं। प्राथमिक IgM प्रतिक्रिया के विकास के लिए Tx Lut1 की सहायता की आवश्यकता नहीं है। आईजीएम एंटीबॉडी (पीसी आईजीएम) का उत्पादन करने वाले प्लाज्मा कोशिकाओं के संचय के लिए, यह स्पष्ट है कि एमएफ सतह पर एजी की एक साधारण पहचान पर्याप्त है। हालांकि, आईजीजी संश्लेषण के लिए आईजीएम संश्लेषण के इंट्रासेल्युलर स्विचिंग, आईजीजी (आईजीजी पीसी) को संश्लेषित और स्रावित करने वाले प्लाज्मा कोशिकाओं के संचय और माध्यमिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में मेमोरी कोशिकाओं (आईजीजी पीसी) के प्रवेश के लिए टीएक्स लुट 1 की मदद आवश्यक है।

सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को प्रतिबद्ध इम्युनोकोम्पेटेंट कोशिकाओं के प्रसार की विशेषता है जो विदेशी कोशिकाओं की सतह पर वर्ग I MHC अणु के साथ संयोजन में प्रतिजन के साथ प्रतिक्रिया करते हैं या स्वयं के वायरस से संक्रमित सतह पर वर्ग I MHC अणु के साथ जटिल में अंतर्जात इम्युनोजेन्स। और ट्यूमर कोशिकाएं। साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में शामिल है। साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट (टीसी) लक्ष्य सेल की सतह पर प्रस्तुत किया गया, Ag वर्ग I MHC अणु के संयोजन में साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट रिसेप्टर को बांधता है। इस प्रक्रिया में Tc कोशिका झिल्ली का CD8 अणु शामिल होता है। टी-हेल्पर द्वारा स्रावित IL-2 साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइटों के प्रसार को उत्तेजित करता है। लक्ष्य सेल का विनाश। साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट लक्ष्य कोशिका को पहचानता है और उससे जुड़ जाता है। एक सक्रिय साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट के साइटोप्लाज्म में, छोटे अंधेरे अंग होते हैं जो स्रावी कोशिकाओं के भंडारण कणिकाओं के समान होते हैं। कणिकाओं को टी-किलर के उस हिस्से में केंद्रित किया जाता है, जो लक्ष्य सेल के संपर्क के बिंदु के करीब स्थित होता है। समानांतर में, साइटोस्केलेटन का पुनर्संयोजन होता है और गोल्गी कॉम्प्लेक्स के इस क्षेत्र में एक बदलाव होता है, जिसमें कणिकाओं का निर्माण होता है। इनमें साइटोलिटिक प्रोटीन पेर्फोरिन होता है।

टी-किलर द्वारा छोड़े गए पेर्फोरिन अणु लक्ष्य कोशिका की झिल्ली में Ca2+ की उपस्थिति में पोलीमराइज़्ड होते हैं। लक्ष्य कोशिका के प्लाज्मा झिल्ली में बने पेर्फोरिन छिद्र पानी और लवण को गुजरने देते हैं, लेकिन प्रोटीन अणुओं को नहीं। यदि बाह्य अंतरिक्ष में या रक्त में पेर्फोरिन का पोलीमराइजेशन होता है, जहां कैल्शियम की अधिकता होती है, तो बहुलक झिल्ली में प्रवेश करने और कोशिका को मारने में सक्षम नहीं होगा। टी-किलर की विशिष्ट क्रिया केवल इसके और लक्ष्य सेल के बीच निकट संपर्क के परिणामस्वरूप प्रकट होती है, जो टी-किलर रिसेप्टर्स के साथ पीड़ित की सतह पर एजी की बातचीत के कारण प्राप्त होती है। टी-किलर ही पेर्फोरिन की साइटोटोक्सिक क्रिया से सुरक्षित है। आत्मरक्षा का तंत्र अज्ञात है। लक्ष्य कोशिका के विनाश के लिए एक वैकल्पिक तंत्र, जिसके अनुसार साइटोटोक्सिक टी-लिम्फोसाइट्स और एनके कोशिकाएं एक संकेत का स्रोत हैं जो लक्ष्य सेल में पहले से मौजूद आत्मघाती कार्यक्रम को ट्रिगर करती हैं। इस संकेत की क्रिया को ग्लूकोकार्टिकोइड्स द्वारा बढ़ाया जाता है।

A. हास्य प्रतिरक्षा का अध्ययन

1. बी-लिम्फोसाइटों की संख्या का निर्धारण।लिम्फोसाइटों की कोशिका झिल्ली पर कई ग्लाइकोप्रोटीन होते हैं, जिन्हें मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करके फ्लो साइटोमेट्री द्वारा पता लगाया जा सकता है। इनमें से कुछ ग्लाइकोप्रोटीन एक विशेष सेल प्रकार के लिए विशिष्ट हैं, जैसे कि टी-, बी- और एनके-लिम्फोसाइट्स, टी-लिम्फोसाइट्स के विभिन्न उप-जनसंख्या, मोनोसाइट्स, और यहां तक ​​​​कि उनकी परिपक्वता और भेदभाव के कुछ चरणों तक। इन अणुओं को आमतौर पर सीडी के रूप में जाना जाता है। कई सीडी के कार्य वर्तमान में परिभाषित हैं (तालिका 18.8 देखें)। अध्ययन के परिणामों का मूल्यांकन करते समय, रोगी की उम्र को ध्यान में रखना आवश्यक है। इसके अलावा, अभिकर्मकों की गुणवत्ता और कार्यप्रणाली के पालन की लगातार निगरानी करना आवश्यक है, क्योंकि इसका मामूली उल्लंघन भी अध्ययन के परिणामों को विकृत करता है। फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके बी-लिम्फोसाइटों का निर्धारण कोशिका की सतह, सीडी19 और सीडी20 पर तय इम्युनोग्लोबुलिन का पता लगाने पर आधारित है (तालिका 18.8 देखें)। बड़े बच्चों और वयस्कों में, बी-लिम्फोसाइट्स बच्चों में सभी रक्त लिम्फोसाइटों का 10-20% बनाते हैं छोटी उम्रउनमें से अधिक हैं।

2. एंटीबॉडी अनुमापांक का निर्धारण।यदि ह्यूमर इम्युनिटी की कमी का संदेह है, तो प्रोटीन और पॉलीसेकेराइड एंटीजन के एंटीबॉडी के टिटर का आकलन किया जाता है। आमतौर पर वे टीकाकरण या संक्रमण के बाद निर्धारित होते हैं।

ए। प्रोटीन एंटीजन के लिए एंटीबॉडी।ज्यादातर मामलों में, आईजीजी से डिप्थीरिया और टेटनस टॉक्सोइड्स की जांच डीपीटी या डीटीपी के साथ टीकाकरण से पहले और 2-4 सप्ताह बाद की जाती है। चूंकि लगभग सभी वयस्कों को डीटीपी का टीका लगाया जाता है, इसलिए टीकाकरण के बाद एंटीबॉडी का स्तर द्वितीयक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का सूचक होता है। हीमोफिलस इन्फ्लुएंजा टाइप बी वैक्सीन के प्रशासन के बाद पीआरपी एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाना भी संभव है। हालांकि यह एंटीजन एक पॉलीसेकेराइड है, यह संयुग्म वैक्सीन में प्रोटीन एंटीजन के रूप में कार्य करता है। कभी-कभी निष्क्रिय पोलियो वैक्सीन और पुनः संयोजक हेपेटाइटिस बी वैक्सीन के साथ प्रतिरक्षण के बाद एंटीबॉडी का परीक्षण किया जाता है। यदि इम्युनोडेफिशिएंसी का संदेह है तो लाइव वायरस टीके को contraindicated है।

बी। पॉलीसेकेराइड एंटीजन के लिए एंटीबॉडी।पॉलीसेकेराइड एंटीजन, न्यूमोकोकल और के लिए विनोदी प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए मेनिंगोकोकल वैक्सीनजिसमें प्रोटीन वाहक न हों। एंटीबॉडी टिटर टीकाकरण से पहले और 3-4 सप्ताह बाद निर्धारित किया जाता है। कुछ शोध प्रयोगशालाओं में, हेमोफिलस इन्फ्लुएंजा टाइप बी के खिलाफ एक गैर-संयुग्मित टीके का उपयोग इस उद्देश्य के लिए किया जाता है। परिणामों का मूल्यांकन रोगी की उम्र को ध्यान में रखकर किया जाता है। तो, 2 साल से कम उम्र के बच्चों में, पॉलीसेकेराइड एंटीजन के प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया कमजोर होती है, कुछ बच्चों में यह 5 साल तक बनी रहती है। इस संबंध में, छोटे बच्चों में पॉलीसेकेराइड टीकों का उपयोग अनुचित और यहां तक ​​​​कि contraindicated भी है, क्योंकि इससे बड़ी उम्र में प्रतिरक्षात्मक सहिष्णुता और अप्रभावी पुनर्विकास हो सकता है।

वी प्राथमिक और माध्यमिक हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन।प्रतिजन की निकासी निर्धारित करने के लिए, IgM (प्राथमिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में) और IgG (द्वितीयक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में), बैक्टीरियोफेज Fichi 174, एक जीवाणु वायरस जो मनुष्यों के लिए सुरक्षित है, के स्तर का उपयोग प्रोटीन प्रतिजन के रूप में किया जाता है। गैस्ट्रोपॉड हेमोसायनिन, पुनः संयोजक हेपेटाइटिस बी वैक्सीन, मोनोमेरिक फ्लैगेलिन, टिक-जनित एन्सेफलाइटिस वैक्सीन का उपयोग प्राथमिक हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए भी किया जाता है।

डी. प्राकृतिक एंटीबॉडी(आइसोहेमाग्लगुटिनिन, स्ट्रेप्टोलिसिन ओ के प्रति एंटीबॉडी, हेटरोफाइल एंटीबॉडी, जैसे भेड़ एरिथ्रोसाइट्स के एंटीबॉडी) सामान्य रूप से लगभग सभी लोगों के सीरम में मौजूद होते हैं। इसका कारण यह है कि जिन एंटीजन के खिलाफ इन एंटीबॉडी को निर्देशित किया जाता है वे व्यापक हैं और इसमें निहित हैं खाद्य उत्पाद, श्वसनीय कण, माइक्रोफ्लोरा श्वसन तंत्र.

3. आईजीजी उपवर्गों की परिभाषा।यदि आवर्तक के साथ जीवाण्विक संक्रमणश्वसन पथ, IgG का कुल स्तर सामान्य है या थोड़ा कम है या IgA की एक अलग कमी का पता चला है, IgG के उपवर्गों की परिभाषा दिखाई गई है। इस मामले में, एक IgG 2 की कमी का पता लगाया जा सकता है (IgG 2 IgG का लगभग 20% बनाता है), जिसे IgA या IgG 4 की कमी के साथ अलग या जोड़ा जा सकता है। यह याद रखना चाहिए कि कार्यात्मक मूल्यांकनआईजीजी उपवर्गों के मात्रात्मक निर्धारण की तुलना में हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया एक अधिक जानकारीपूर्ण शोध पद्धति है। तो, आईजीजी 2 के सामान्य स्तर के साथ, स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया के पॉलीसेकेराइड एंटीजन के एंटीबॉडी का स्तर अक्सर कम हो जाता है। इसके साथ ही, भारी जंजीरों के संश्लेषण के उल्लंघन के कारण, किसी की अनुपस्थिति में, आईजीजी 2 की जन्मजात कमी संभव है। नैदानिक ​​अभिव्यक्तियाँप्रतिरक्षा की कमी।

4. आईजीए का निर्धारण।सामान्य सीरम IgA के साथ स्रावी IgA की पृथक कमी दुर्लभ है। एक नियम के रूप में, स्रावी और सीरम IgA की एक साथ कमी होती है। पृथक IgA की कमी चिकित्सकीय रूप से मौन है या हल्के ऊपरी श्वसन पथ के संक्रमण के साथ है। यह इस तथ्य के कारण है कि आईजीए की कमी के साथ, सीरम में आईजीजी और श्लेष्म झिल्ली के स्राव में आईजीएम का स्तर प्रतिपूरक बढ़ जाता है। IgA का स्तर आँसू, लार और शरीर के अन्य तरल पदार्थों में मापा जाता है। IgA के दो उपवर्ग हैं - IgA 1 और IgA 2। IgA 1 रक्त और श्वसन पथ के स्राव में प्रबल होता है, जबकि IgA 2 जठरांत्र संबंधी मार्ग के रहस्यों में प्रमुख होता है। सामान्य प्रदर्शनआईजीए 1 और आईजीए 2 के स्तर

5. इन विट्रो में इम्युनोग्लोबुलिन का संश्लेषण।यह परीक्षण उत्तेजित बी-लिम्फोसाइटों द्वारा आईजीएम, आईजीजी और आईजीए के उत्पादन को मापता है। स्वस्थ और बीमार टी- और बी-लिम्फोसाइटों को विभिन्न उत्तेजक पदार्थों के साथ मिलाकर, टी-हेल्पर्स और बी-लिम्फोसाइटों के कार्य का मूल्यांकन करना संभव है। ज्यादातर मामलों में, एंटीबॉडी की कमी प्लाज्मा कोशिकाओं में बी-लिम्फोसाइटों के बिगड़ा भेदभाव के कारण होती है।

6. लिम्फ नोड्स की बायोप्सीके संदेह पर प्राथमिक इम्युनोडेफिशिएंसीआमतौर पर उत्पादन नहीं करते हैं। यह केवल उन मामलों में इंगित किया जाता है जहां निदान स्पष्ट नहीं है और रोगी ने लिम्फ नोड्स को बड़ा कर दिया है, जिसके लिए हेमोबलास्टोसिस के बहिष्करण की आवश्यकता होती है। बायोप्सी आमतौर पर एंटीजेनिक उत्तेजना के 5-7 दिनों के बाद की जाती है। एंटीजन को उस क्षेत्र में इंजेक्ट किया जाता है, जिसमें से लिम्फ लिम्फ नोड्स के समूह में बहता है, जिनमें से एक बायोप्सी के अधीन होता है। लिम्फ नोड में ह्यूमर इम्युनिटी की कमी के साथ, प्लाज्मा कोशिकाओं की संख्या कम हो जाती है, प्राथमिक रोम की संख्या बढ़ जाती है, द्वितीयक रोम अनुपस्थित होते हैं, कॉर्टिकल पदार्थ की मोटाई कम हो जाती है, लिम्फ नोड ऊतक का पुनर्गठन देखा जाता है, और कभी-कभी मैक्रोफेज और डेंड्राइटिक कोशिकाओं की संख्या बढ़ जाती है।

1. पहले स्तर के तरीके एंटीजन-एंटीबॉडी सिस्टम में बातचीत के साक्ष्य पर आधारित हैं। सकारात्मक परिणाम प्रतिक्रियाओं की विशिष्टता का संकेत देते हैं। सिद्धांत रूप में, तीन प्रकार की प्रतिक्रियाओं को प्रतिष्ठित किया जा सकता है:

संयुग्मन परीक्षण। इस मामले में, अभिकर्मकों में से एक को लेबल किया जाता है, परिणामों का मूल्यांकन भौतिक या के आधार पर अन्य अभिकर्मकों के लिए बाध्यकारी द्वारा किया जाता है रासायनिक गुणसंयुग्म (प्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस, इम्यूनोपरोक्सीडेज विधि, ऑटोरैडियोग्राफी);

अभिकर्मकों में से एक के गुणों में परिवर्तन के आधार पर परीक्षण (उदाहरण के लिए, प्रतिदीप्ति में परिवर्तन, विद्युत क्षमता, समाधान चिपचिपाहट; उच्च आणविक भार वाले यौगिकों का संश्लेषण, एंटीजन की एंजाइमिक गतिविधि में परिवर्तन)। इन परीक्षणों में सीमित क्षमताएं हैं;

सॉल्टिंग आउट, वर्षा, उपयोग की तकनीक का उपयोग करके अनबाउंड अभिकर्मकों से एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स के पृथक्करण पर आधारित परीक्षण विशिष्ट एंटीबॉडीया कोशिका की सतह पर आसंजन। इनमें अधिकांश रेडियो- और एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट एसेज़ शामिल हैं।

2. दूसरे स्तर के तरीके एक एंटीजन (पॉलीवेलेंट) एंटीबॉडी (कम से कम द्विसंयोजक एंटीबॉडी) के बीच बातचीत की अधिक जटिल प्रकृति पर आधारित होते हैं। इस मामले में, वर्षा, एग्लूटिनेशन, आदि के तंत्र, पहले स्तर के तरीकों की तुलना में अधिक हद तक परिसर में अंतर्निहित हैं, पीएच, आयनिक शक्ति और अन्य प्रतिक्रिया स्थितियों पर निर्भर करते हैं। इसलिए सकारात्मक नतीजेहमेशा एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया की गंभीरता का निर्धारण नहीं करते हैं, और नकारात्मक का मतलब इस प्रतिक्रिया की अनुपस्थिति नहीं है। फिर भी, इस समूह के तरीकों में से, कोई ऐसे प्रतिरक्षाविज्ञानी परीक्षणों को भी नोट कर सकता है जो नैदानिक ​​अभ्यास के लिए विशेष महत्व रखते हैं।

दूसरे स्तर के तरीकों में निम्नलिखित प्रतिक्रियाएं शामिल हैं: वर्षा, एग्लूटिनेशन, पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया। पहले और दूसरे स्तर के तरीकों के बीच एक मध्यवर्ती स्थिति पृथक कोशिकाओं पर अध्ययन द्वारा कब्जा कर लिया गया है, उदाहरण के लिए, साइटोलिसिस या ईोसिनोफिल की भागीदारी के साथ मध्यस्थों की रिहाई की घटना।

एग्लूटीनेशन की घटना पर आधारित प्रतिक्रियाएं. एग्लूटीनेशन के दौरान वर्षा की प्रतिक्रिया के विपरीत, एंटीजन को एक कॉर्पस्कुलर रूप (एरिथ्रोसाइट्स या बैक्टीरिया का प्रत्यक्ष एग्लूटिनेशन) में प्रस्तुत किया जाता है या वाहक कणों (अप्रत्यक्ष रूप, निष्क्रिय एग्लूटिनेशन) से बंधा होता है। एग्लूटीनेशन का तंत्र अभी तक पूरी तरह से समझा नहीं गया है। एक सिद्धांत के अनुसार, मुख्य भूमिका कोशिका की सतह पर एंटीबॉडी के विशिष्ट सोखने की होती है, जिससे सतह की क्षमता में कमी या झिल्ली के हाइड्रोफोबिक गुणों में वृद्धि होती है। यह सिद्धांत इस तथ्य से समर्थित है कि एग्लूटिनेशन, जैसे वर्षा, काफी हद तक इलेक्ट्रोलाइट्स की ट्रेस मात्रा की उपस्थिति पर निर्भर करता है। एक अन्य अवधारणा के अनुसार, और यह मैरक के "जाली" सिद्धांत से मेल खाती है, एग्लूटीनेशन तब होता है जब एक द्विसंयोजक एंटीबॉडी का एक सक्रिय केंद्र एक एंटीजेनिक निर्धारक के साथ जुड़ता है, और दूसरा सक्रिय केंद्र दूसरे निर्धारक के साथ। एंटीबॉडी की अधिकता या कमी से एग्लूटिनेशन का निषेध होता है। यद्यपि कण आकार और आईजी संरचना जैसे गुण डेटा की व्याख्या को सही करते हैं, फिर भी इस सिद्धांत के पक्ष में महत्वपूर्ण तर्क हैं।

वर्षा की तरह, इस पद्धति का उपयोग अर्ध-मात्रात्मक विश्लेषण के रूप में किया जाता है, जो अधिकतम सीरम कमजोर पड़ने को निर्धारित करता है जिस पर एग्लूटिनेशन अभी भी संभव है। परिणामों का आकलन मैक्रोस्कोपिक रूप से किया जा सकता है। विभिन्न एंटीजन-एंटीबॉडी प्रणालियों के बीच एग्लूटीनेशन की संवेदनशीलता काफी भिन्न होती है। इसके अलावा, एग्लूटिनेशन वर्षा प्रतिक्रिया (लगभग 103 गुना) की तुलना में अधिक संवेदनशील तरीका है। इष्टतम परिस्थितियों में, 0.05 मिलीलीटर तक की न्यूनतम एकाग्रता के साथ एंटीबॉडी का पता लगाना संभव था। आईजी ज्ञात वर्गों में विभिन्न एग्लूटिनेशन गुण होते हैं। इस प्रकार, आईजीएम अणुओं की एग्लूटीनेट करने की क्षमता आईजीजी अणुओं की तुलना में 60-180 गुना अधिक है।

एक प्रत्यक्ष एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया तब होती है जब एंटीजन कोशिका झिल्ली का एक तत्व होता है या अन्य कणों (एरिथ्रोसाइट्स, बैक्टीरिया, पराग कण) की सतह पर मौजूद होता है। इस प्रतिक्रिया का निर्माण दोनों टेस्ट ट्यूबों में किया जाता है (फिर अवसादन के बाद परिणामों का मूल्यांकन किया जाता है), और एक विशेष प्लेट पर स्थित कुओं में। विशेष रूप से, मानव रक्त समूह का निर्धारण एक आम तौर पर स्वीकृत एक्सप्रेस विधि है, जो एग्लूटीनेशन की घटना पर भी आधारित है। रक्त समूह की पहचान करने के लिए, एरिथ्रोसाइट निलंबन की एक बूंद को एक निश्चित विशिष्टता के मानक एग्लूटीनेटिंग सीरम की एक बूंद के साथ मिलाया जाता है: सकारात्मक प्रतिक्रियाएग्लूटीनेट पहले से ही मैक्रोस्कोपिक रूप से दिखाई दे रहे हैं, अगर कोई प्रतिक्रिया नहीं होती है, तो एरिथ्रोसाइट निलंबन सजातीय रहता है।

एंटीग्लोबुलिन परीक्षण(कोम्ब्स प्रतिक्रिया)। एंटीग्लोबुलिन परीक्षण सीरम में गैर-एग्लूटीनेटिंग या "अपूर्ण" एंटीबॉडी की उपस्थिति को साबित करने का कार्य करता है। अक्सर, इस पद्धति का उपयोग प्रतिरक्षा हेमोलिसिस के कारण होने वाले रक्त रोगों के निदान में किया जाता है। प्रारंभ में, शोधकर्ताओं ने एंटीग्लोबुलिन सीरम (मानव ग्लोब्युलिन के खिलाफ) का उपयोग किया, लेकिन बाद में यह पाया गया कि यह पूरक घटकों के साथ प्रतिक्रिया करता है। वर्तमान में, इसके बजाय, आईजी (मोनोक्लोनल एंटीबॉडी) के कुछ वर्गों के खिलाफ मोनोस्पेसिफिक एंटीसेरा को तीव्रता से पेश किया जा रहा है। परीक्षण का सीधा संस्करण सेल-बाउंड "अपूर्ण" एंटीबॉडी का पता लगाने का कार्य करता है; अप्रत्यक्ष रूप में, परिसंचारी एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है: परीक्षण सीरम को एरिथ्रोसाइट्स के साथ पूर्व-ऊष्मायन किया जाता है, और फिर प्रत्यक्ष परीक्षण को पुन: पेश किया जाता है। गैर-एग्लूटीनेटिंग ऑटोएंटीबॉडी और रीगिन दोनों का पता लगाने के लिए निष्क्रिय रक्तगुल्म के संयोजन में एक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण विकसित किया गया था। और अंत में, अप्रत्यक्ष प्रतिदीप्ति तकनीक भी एंटीग्लोबुलिन परीक्षण के संशोधनों में से एक है।

एंटीग्लोबुलिन खपत परीक्षण(स्टीफन टेस्ट)। इस पद्धति पर ध्यान देना चाहिए, हालांकि इस मामले में हम केवल एक संकेतक प्रतिक्रिया के साथ काम कर रहे हैं। इस परीक्षण से ऊतक कोशिकाओं, कोशिका नाभिक या अघुलनशील ऊतक तत्वों के प्रतिजनों के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है। एग्लूटिनेशन टेस्ट का उपयोग करके इन एंटीबॉडी को निर्धारित करना असंभव है। अप्रत्यक्ष परीक्षण में, एंटीजन (होमोजेनाइज्ड टिश्यू) को टेस्ट सीरम से इनक्यूबेट किया जाता है और फिर अनबाउंड एंटीबॉडी को हटाने के लिए अच्छी तरह से धोया जाता है। इसके बाद, एक ज्ञात अनुमापांक के साथ एंटीग्लोबुलिन सीरम इस समरूप के साथ ऊष्मायन किया जाता है। नतीजतन, एंटीग्लोबुलिन का सेवन ऊतकों पर adsorbed एंटीबॉडी द्वारा किया जाता है। तदनुसार, एंटीग्लोबुलिन सीरम का अनुमापांक घट जाता है। ऊष्मायन से पहले और बाद में अध्ययन किए गए एंटीबॉडी का स्तर अपूर्ण एंटीबॉडी के साथ संवेदनशील एरिथ्रोसाइट्स से युक्त एक संकेतक प्रणाली का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है, इसलिए इस विकल्प को हेमाग्लगुटिनेशन अवरोध प्रतिक्रिया के संशोधन के रूप में माना जा सकता है। परीक्षण का प्रत्यक्ष संस्करण स्थापित करते समय, परीक्षण सीरम के साथ पूर्व-ऊष्मायन नहीं किया जाता है।

इस पद्धति का उपयोग रुमेटीइड गठिया में स्वप्रतिपिंडों को निर्धारित करने के लिए किया जाता है, प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस में डीएनए के प्रति एंटीबॉडी, साथ ही ल्यूको- और प्लेटलेट्स पर एंटीजन के लिए एंटीबॉडी के उत्पादन को साबित करने के लिए। विधि कई गैर-विशिष्ट कारकों पर भी निर्भर करती है - यही कारण है कि उपयुक्त नियंत्रण विधियों का विशेष महत्व है। परिणामों की व्याख्या करते समय, यह नहीं भूलना चाहिए कि पारंपरिक तकनीक हमेशा एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स के कारण ग्लोब्युलिन बाइंडिंग का प्रदर्शन नहीं कर सकती है।

पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया. इस अप्रत्यक्ष विधिएंटीबॉडी या एंटीजन का पता लगाने के लिए। प्रतिक्रिया इस तथ्य पर आधारित है कि पूरक कई एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रियाओं में भाग लेता है। प्रयोग दो चरणों में स्थापित किया गया है: चरण I पर, परीक्षण सीरम और एक ज्ञात एंटीजन पूरक के साथ ऊष्मायन किया जाता है, चरण II में, एक संकेतक प्रणाली तैयार की जाती है, जिसमें हेमोलिटिक सीरम और एरिथ्रोसाइट्स होते हैं, और अभिकर्मकों के मिश्रण में जोड़ा जाता है। यदि प्रयोग का पहला चरण एंटीजन-एंटीबॉडी प्रतिक्रिया के साथ समाप्त होता है, तो पूरक निर्धारण होता है, जबकि संकेतक एरिथ्रोसाइट्स का हेमोलिसिस अनुपस्थित या थोड़ा व्यक्त होता है। यदि अध्ययन के तहत सिस्टम में एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स नहीं बनता है, तो पूरक पूरी तरह से संकेतक प्रणाली में शामिल होता है, जिससे हेमोलिसिस होता है। पूरक का स्रोत आमतौर पर ताजा रक्त सीरम होता है। बलि का बकरा. इसका पूरक सभी स्तनधारी प्रजातियों के एंटीबॉडी के साथ प्रतिक्रिया करता है। एक नियम के रूप में, राम एरिथ्रोसाइट्स राम एरिथ्रोसाइट्स के लिए खरगोश एंटीबॉडी के साथ संवेदनशील राम एरिथ्रोसाइट्स का उपयोग संकेतक प्रणाली में किया जाता है।

इम्यून हेमोलिसिस प्रतिक्रिया और साइटोटोक्सिक परीक्षण. इम्यून हेमोलिसिस एक ओर, पूरक गतिविधि के साक्ष्य के रूप में काम कर सकता है, दूसरी ओर, एरिथ्रोसाइट्स के लिए एंटीबॉडी के साइटोटोक्सिक प्रभाव; इसलिए, ये प्रतिक्रियाएं इम्यूनोमेटोलॉजिकल निदान के लिए महत्वपूर्ण हैं। पैसिव हेमग्लगुटिनेशन को एक निष्क्रिय हेमोलिसिस प्रतिक्रिया में परिवर्तित किया जा सकता है, जबकि अभिकर्मक मिश्रण में एंटीबॉडी, उपयुक्त एंटीजन के साथ लोड एरिथ्रोसाइट्स और पूरक होना चाहिए।

रोगजनक तंत्र के अध्ययन में साइटोलॉजिकल परीक्षण सूचनात्मक है। हालांकि, सेल कल्चर विधियों की जटिलता को देखते हुए इसके उपयोग की संभावनाएं सीमित हैं। साइटोटोक्सिक प्रतिक्रियाओं को एंटीबॉडी (पूरक सक्रियण), हत्यारा कोशिकाओं और संवेदनशील टी लिम्फोसाइटों द्वारा मध्यस्थ किया जा सकता है।

तटस्थता परीक्षण. परीक्षण का सिद्धांत यह है कि एंटीबॉडी के संपर्क में आने पर एंटीजन के कुछ जैविक गुण निष्प्रभावी हो जाते हैं। यह सबसे व्यापक रूप से एंटीटॉक्सिक (टेटनस, डिप्थीरिया) और एंटीवायरल एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है।

अन्य तरीके। पहले अलग-अलग अध्यायों में वर्णित विधियों के अलावा (शुल्त्स-डेल के अनुसार इन विट्रो एनाफिलेक्सिस में, बेसोफिलिक ग्रैन्यूलोसाइट्स और मस्तूल कोशिकाओं से हिस्टामाइन की रिहाई, त्वचा परीक्षण, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, निष्क्रिय त्वचा एनाफिलेक्सिस और प्रुस्निट्ज-कुस्टनर प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए एक परीक्षण के रूप में एलर्जीन की "अनुमेय" खुराक), किसी को आईजीई के उत्पादन को साबित करने के तरीकों का नाम देना चाहिए, प्रतिरक्षा परिसरों के विश्लेषण के लिए नैदानिक ​​​​परीक्षण, के लिए तरीके स्वप्रतिरक्षी रोगों में स्वप्रतिपिंडों का पता लगाना।

बी-लिम्फोसाइटों की संख्या का निर्धारणफ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके बी-लिम्फोसाइटों का निर्धारण कोशिका की सतह, सीडी19 और सीडी20 पर तय इम्युनोग्लोबुलिन का पता लगाने पर आधारित है। बड़े बच्चों और वयस्कों में, बी-लिम्फोसाइट्स सभी रक्त लिम्फोसाइटों का 10-20% बनाते हैं, छोटे बच्चों में वे अधिक होते हैं।

एंटीबॉडी टिटर का निर्धारणयदि ह्यूमर इम्युनिटी की कमी का संदेह है, तो प्रोटीन और पॉलीसेकेराइड एंटीजन के एंटीबॉडी के टिटर का आकलन किया जाता है। आमतौर पर वे टीकाकरण या संक्रमण के बाद निर्धारित होते हैं।

प्रोटीन प्रतिजनों के लिए एंटीबॉडीज्यादातर मामलों में, आईजीजी से डिप्थीरिया और टेटनस टॉक्सोइड्स की जांच डीपीटी या डीटीपी के साथ टीकाकरण से पहले और 2-4 सप्ताह बाद की जाती है। चूंकि लगभग सभी वयस्कों को डीटीपी का टीका लगाया जाता है, इसलिए टीकाकरण के बाद एंटीबॉडी का स्तर द्वितीयक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का सूचक होता है। हीमोफिलस इन्फ्लुएंजा टाइप बी वैक्सीन के प्रशासन के बाद पीआरपी एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाना भी संभव है। हालांकि यह एंटीजन एक पॉलीसेकेराइड है, यह संयुग्म वैक्सीन में प्रोटीन एंटीजन के रूप में कार्य करता है। कभी-कभी निष्क्रिय पोलियो वैक्सीन और पुनः संयोजक हेपेटाइटिस बी वैक्सीन के साथ प्रतिरक्षण के बाद एंटीबॉडी का परीक्षण किया जाता है। यदि इम्युनोडेफिशिएंसी का संदेह है तो लाइव वायरस टीके को contraindicated है।

पॉलीसेकेराइड एंटीजन के लिए एंटीबॉडीपॉलीसेकेराइड एंटीजन के लिए ह्यूमरल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए, न्यूमोकोकल और मेनिंगोकोकल टीके जिनमें प्रोटीन वाहक नहीं होते हैं, का उपयोग किया जाता है। एंटीबॉडी टिटर टीकाकरण से पहले और 3-4 सप्ताह बाद निर्धारित किया जाता है। कुछ शोध प्रयोगशालाओं में, हेमोफिलस इन्फ्लुएंजा टाइप बी के खिलाफ एक गैर-संयुग्मित टीके का उपयोग इस उद्देश्य के लिए किया जाता है। परिणामों का मूल्यांकन रोगी की उम्र को ध्यान में रखकर किया जाता है। तो, 2 साल से कम उम्र के बच्चों में, पॉलीसेकेराइड एंटीजन के प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया कमजोर होती है, कुछ बच्चों में यह 5 साल तक बनी रहती है। इस संबंध में, छोटे बच्चों में पॉलीसेकेराइड टीकों का उपयोग अनुचित और यहां तक ​​​​कि contraindicated भी है, क्योंकि इससे बड़ी उम्र में प्रतिरक्षात्मक सहिष्णुता और अप्रभावी पुनर्विकास हो सकता है।

प्राथमिक और माध्यमिक हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलनप्रतिजन की निकासी निर्धारित करने के लिए, IgM (प्राथमिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में) और IgG (द्वितीयक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया में), बैक्टीरियोफेज Fichi 174, एक जीवाणु वायरस जो मनुष्यों के लिए सुरक्षित है, के स्तर का उपयोग प्रोटीन प्रतिजन के रूप में किया जाता है। गैस्ट्रोपॉड हेमोसायनिन, पुनः संयोजक हेपेटाइटिस बी वैक्सीन, मोनोमेरिक फ्लैगेलिन, टिक-जनित एन्सेफलाइटिस वैक्सीन का उपयोग प्राथमिक हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए भी किया जाता है।

प्राकृतिक एंटीबॉडी(आइसोहेमाग्लगुटिनिन, स्ट्रेप्टोलिसिन ओ के प्रति एंटीबॉडी, हेटरोफाइल एंटीबॉडी, जैसे भेड़ एरिथ्रोसाइट्स के एंटीबॉडी) सामान्य रूप से लगभग सभी लोगों के सीरम में मौजूद होते हैं। यह इस तथ्य के कारण है कि जिन एंटीजन के खिलाफ इन एंटीबॉडी को निर्देशित किया जाता है, वे व्यापक हैं और खाद्य उत्पादों, साँस के कणों और श्वसन पथ के माइक्रोफ्लोरा में पाए जाते हैं।

IgG उपवर्गों की परिभाषा।यदि, श्वसन पथ के आवर्तक जीवाणु संक्रमण में, कुल IgG स्तर सामान्य या थोड़ा कम हो जाता है, या पृथक IgA की कमी का पता चलता है, तो IgG उपवर्ग का संकेत दिया जाता है। इस मामले में, एक IgG 2 की कमी का पता लगाया जा सकता है (IgG 2 IgG का लगभग 20% बनाता है), जिसे IgA या IgG 4 की कमी के साथ अलग या जोड़ा जा सकता है। यह याद रखना चाहिए कि हास्य प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का कार्यात्मक मूल्यांकन आईजीजी उपवर्गों के मात्रात्मक निर्धारण की तुलना में अधिक जानकारीपूर्ण अनुसंधान पद्धति है। तो, आईजीजी 2 के सामान्य स्तर के साथ, स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया के पॉलीसेकेराइड एंटीजन के एंटीबॉडी का स्तर अक्सर कम हो जाता है। इसके साथ ही, इम्युनोडेफिशिएंसी के किसी भी नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों की अनुपस्थिति में, भारी श्रृंखलाओं के संश्लेषण के उल्लंघन के कारण जन्मजात आईजीजी 2 की कमी संभव है।

आईजीए की परिभाषासामान्य सीरम IgA के साथ स्रावी IgA की पृथक कमी दुर्लभ है। एक नियम के रूप में, स्रावी और सीरम IgA की एक साथ कमी होती है। पृथक IgA की कमी चिकित्सकीय रूप से मौन है या हल्के ऊपरी श्वसन पथ के संक्रमण के साथ है। यह इस तथ्य के कारण है कि आईजीए की कमी के साथ, सीरम में आईजीजी और श्लेष्म झिल्ली के स्राव में आईजीएम का स्तर प्रतिपूरक बढ़ जाता है। IgA का स्तर आँसू, लार और शरीर के अन्य तरल पदार्थों में मापा जाता है। IgA के दो उपवर्ग हैं - IgA 1 और IgA 2। IgA 1 रक्त और श्वसन पथ के स्राव में प्रबल होता है, जबकि IgA 2 जठरांत्र संबंधी मार्ग के रहस्यों में प्रमुख होता है। IgA 1 और IgA 2 का सामान्य स्तर।

इन विट्रो में इम्युनोग्लोबुलिन का संश्लेषण।यह परीक्षण उत्तेजित बी-लिम्फोसाइटों द्वारा आईजीएम, आईजीजी और आईजीए के उत्पादन को मापता है। स्वस्थ और बीमार टी- और बी-लिम्फोसाइटों को विभिन्न उत्तेजक पदार्थों के साथ मिलाकर, टी-हेल्पर्स और बी-लिम्फोसाइटों के कार्य का मूल्यांकन करना संभव है। ज्यादातर मामलों में, एंटीबॉडी की कमी प्लाज्मा कोशिकाओं में बी-लिम्फोसाइटों के बिगड़ा भेदभाव के कारण होती है।

लिम्फ नोड्स की बायोप्सीयदि प्राथमिक इम्युनोडेफिशिएंसी का संदेह है, तो एक नियम के रूप में, उनका उत्पादन नहीं किया जाता है। यह केवल उन मामलों में इंगित किया जाता है जहां निदान स्पष्ट नहीं है और रोगी ने लिम्फ नोड्स को बड़ा कर दिया है, जिसके लिए हेमोबलास्टोसिस के बहिष्करण की आवश्यकता होती है। बायोप्सी आमतौर पर एंटीजेनिक उत्तेजना के 5-7 दिनों के बाद की जाती है। एंटीजन को उस क्षेत्र में इंजेक्ट किया जाता है, जिसमें से लिम्फ लिम्फ नोड्स के समूह में बहता है, जिनमें से एक बायोप्सी के अधीन होता है। लिम्फ नोड में ह्यूमर इम्युनिटी की कमी के साथ, प्लाज्मा कोशिकाओं की संख्या कम हो जाती है, प्राथमिक रोम की संख्या बढ़ जाती है, द्वितीयक रोम अनुपस्थित होते हैं, कॉर्टिकल पदार्थ की मोटाई कम हो जाती है, लिम्फ नोड ऊतक का पुनर्गठन देखा जाता है, और कभी-कभी मैक्रोफेज और डेंड्राइटिक कोशिकाओं की संख्या बढ़ जाती है।

आंतों की बायोप्सीसामान्य चर हाइपोगैमाग्लोबुलिनमिया और पृथक IgA की कमी के साथ उत्पादन करते हैं। बायोप्सी छोटी आंतक्रिप्टोस्पोरिडियम एसपीपी के कारण म्यूकोसा और संक्रमण के खलनायक शोष को बाहर करने के लिए क्रोनिक डायरिया और मैलाबॉस्पशन सिंड्रोम में संकेत दिया गया है। और जिआर्डिया लैम्ब्लिया।

एंटीबॉडी निकासी दरलेबल इम्युनोग्लोबुलिन का उपयोग करके अध्ययन किया गया। यह अध्ययन जठरांत्र संबंधी मार्ग के माध्यम से इम्युनोग्लोबुलिन के संदिग्ध नुकसान के लिए संकेत दिया गया है।